全 文 ：·1344· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第9期2006年9月
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球面对称设计优化荨麻多糖的提取工艺
宋学伟，潘 兰，韩泳平。，钟亚玲，任磊
(西南民族大学少数民族药物研究所，四川成都 610041)
荨麻为常用的中药和民族药物，药用历史悠久，
具有祛风定惊、温胃消食等功效，现代药理研究表明
荨麻还具有抗过敏、提高免疫力等作用口]。荨麻多糖
还是抗炎、抗癌的主要活性成分之一[2’3]。目前，对荨
麻的化学成分研究已有报道[4]，但对荨麻多糖提取
工艺的研究少见报道[5]。本实验采用球面对称设计
法对荨麻多糖的提取工艺进行了研究。
1材料与仪器
荨麻购于成都五块石药材市场，经成都中医药
大学药用植物鉴定教研室严铸云博士鉴定为宽叶荨
麻UrticafissaE．Pritz．
721分光光度计(上海第三仪器分析厂)，
MettlerToledoA1104电子电平；葡萄糖对照品(成
都科龙化学试剂公司，AR级)，所用其他试剂均为
国产分析纯试剂。．
2方法与结果
2．1 粗多糖的提取与精制：称取一定量的药材粗
粉，加入蒸馏水适量，加热浸提，滤过。滤渣在同样条
件下重复提取一次，滤过，合并两次滤液，浓缩后醇
沉，静置12h，离心分离，沉淀物用水复溶，除去不
溶物，再次醇沉，干燥，得粗多糖。粗多糖于蒸馏水中
溶解至适当体积后，经过Savage法脱蛋白、透析、活
性炭脱色、乙醇沉淀等步骤处理后，60℃下真空干
燥得到荨麻多糖精制样品。
2．2对照品溶液的配制：精密称取干燥至恒重的葡
萄糖60．0rng，配成100．0mL溶液，即得0．60mg／
mL葡萄糖对照品溶液，备用。
2．3标准曲线的绘制：分别取葡萄糖对照品溶液
1．0、2．0、3．0、4．0、5．0、6．0mL置于50mL量瓶
中，稀释至刻度，得系列溶液，上述溶液分别取1．0
mL，置于10mL量瓶中，加入2．0mL苯酚溶液，加
入浓硫酸4．5mL，摇匀，放置20min，于60℃水浴
30min，蒸馏水定容至刻度，在490nm处测定吸光
度(A)，以不加样为空白。以质量浓度(C)对吸光度
(A)回归的方程：C一0．0875A+0．0036，r一
0．9984，线性范围为1．2～7．2pg／mL。
2．4换算因素的测定：精密称取60℃真空干燥至
恒重的精制荨麻多糖100mg，置于250mL量瓶中，
加蒸馏水至刻度溶解，移取1．0mL于100mL量瓶
中，加蒸馏水至刻度，取1．0mL溶液于10mL量瓶
中，按2．3项下方法操作，在490nm处测定A值，
根据回归方程计算多糖中葡萄糖的质量浓度，按下
式计算换算因素厂，测得厂一1．37。
f=W／(CD)
式中Ⅳ为多糖的质量(mg)，C为溶液中葡萄糖的质量浓度
(mg／mL)，D为稀释因素
2．5 供试品溶液的制备：称取5．00g药材11份，
分别按照球面对称设计的条件进行提取与精制多糖
(步骤同2．1项下操作)，所得多糖置250mL量瓶
中，加水溶解至刻度，即得供试品溶液。
2．6多糖的测定：分别精密移取各供试品溶液1．0
mL，置于100mL量瓶中，加蒸馏水至刻度，取1．0
mL溶液于10mL量瓶中，按2．3项下方法操作，测
定供试品溶液中多糖的质量浓度，按下式计算多糖
得率。
多糖得率=CDf／药材质量×100％
2．7提取工艺的优化：采用目前国外较为流行的球
面对称设计法对荨麻多糖的提取工艺条件进行优
化。选取提取温度(X，)、提取时间(X。)、加水量(料
液比，X。)为参考因素，以多糖得率为考察指标。因
素水平见表l，试验设计见表2。
收稿日期：2005—11—28
基金项目：教育部留学回国人员科研启动基金(2004527)；西南民族大学人才引进项目(234377)
作者简介：宋学伟(1982一)，男，土家族，湖南省湘西自治州人，有机化学专业在读硕士研究生，主要从事天然有机物、天然药物研究与开
发。Tel(029)85524283E—mail：sxweul982@163．com
*通讯作者韩泳平Tel：(028)85521206E—mail：yongpinghan@mail．china．corn
万方数据
中革芮 ChineseTraditionalandHerbalDrl；gs第37卷第9期2006年9月·1345·
表1因素水平
Table1 Factorsandlevels
水平
因 素
X1
70
76
85
94
100
X2
Z
3．3
5．O
6．7
8．O
X3
5：1
7；1
8：1
9：1
11：1
表2球面对称设计试验及结果
Table2 Sphericalsymmetricdesigna dtheirresults
试验号 x-／℃ 拖／h X3 多糖得率／％
将实验数据进行多元回归处理、二项式拟合，
得：Y一2．59176+1．40268X 一1．21434X3—
0．00045X；一0．01391X22—0．00548X；一
0．0125X1X2+0．01773X X3—0．03911X2X3；
r一0．9986，F一89．3062，P一0．01l1，S桑一
0．02053，回归方程显著、有效。
根据回归方程计算得优化条件为：X。一i00℃，
X2=2h，X3=11：1。
理论上在优化此条件下多糖总的理论得率应为
3．04％。
2．8 优化条件的验证：称取荨麻药材粗粉10．00g，
在最佳条件下进行验证，多糖得率为2．76％(咒一3)。
3讨论
球面对称设计法是目前在国外较为流行的试验
方案优化设计方法，该法具有实验次数少、精度高的
特点。本实验采用该方法，通过多元回归处理，得出
了荨麻多糖的最佳实验条件：以药材量11倍的水作
为溶剂在100℃下提取2h；并在此条件下进行工艺
验证试验，从验证试验效果来看，该方法适合于荨麻
多糖提取条件的优化设计。
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RP—HPLC法测定大蒜油中二烯丙基三硫和二烯丙基二硫
刘丽梅，王瑞海，陈 琳，丁家欣，张秋海
(中国中医研究院基础理论研究所，北京100700)
大蒜油是百合科葱属植物大蒜Alliumsativum
L．的地下鳞茎外皮干燥后经水蒸气蒸馏提取而得
到的挥发油。大蒜油具有抗菌、调血脂、降血糖、降压
利尿、抗血小板凝集、增加纤维蛋白溶解性、保肝、抗
衰老、抗肿瘤等多种功能[1’2]，特别是对心血管、肿瘤
有很好的生理活性，使其在新药开发、保健品生产上
存在着很大潜力。我国每年约有20t大蒜油出口，也
给大蒜油的生产厂家带来巨大的商机。但我国目前
没有完善的大蒜油生产质量标准，仅依据挥发油的
收稿日期：2005—11—24
基金项目：“十五”国家重大科技专项(2001BA701A36—6)
物理常数，使生产和出口受到一定的限制。为此本实
验选择大蒜油中主要活性成分二烯丙基三硫和二烯
丙基二硫为质量控制指标，对大蒜油的质量进行监
控，旨在为制定国家标准提供依据。
1仪器与材料
高效液相色谱仪(美国HPll00，包括四元泵、
二极管阵列检测器、自动进样器、HP化学工作站)，
精密天平DT—100(jt京光学仪器厂)，控温多用高速
组织捣碎机(江苏江阴科研器械厂)。
／1
2
一
“
3
1
O
1
3
一
l
3
3
7
7
O
0
O
O
0
0
O
●
●
●
●
●
●
●
●
●
●
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3
3
6
6
5
5
2
8
5
5
5
6
4
6
4
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5
5
5
5
5
7
9
7
9
7
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8
I
1
2
3
4
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6
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9
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1【l
万方数据
球面对称设计优化荨麻多糖的提取工艺
作者： 宋学伟， 潘兰， 韩泳平， 钟亚玲， 任磊
作者单位： 西南民族大学少数民族药物研究所,四川,成都,610041
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(9)
被引用次数： 8次
参考文献(5条)
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