全 文 ：中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第8期2007年8月·1259·
y一一14．29+9138．9X，r一0。9999。结果表明白
花丹醌在0．0208--0．104弘g峰面积与进样量具有
良好的线性关系。
2．5精密度试验：精密吸取对照品溶液(0．0104
mg／mL)10肛I。注入液相色谱仪器，重复进样5次，
测得峰面积，RSD=0．35％，表明精密度良好。
2．6稳定性试验：样品溶液于配制完成时即避光放
置，间隔4h重复进样，共6次。测得峰面积积分值，
RSD一0．12％，表明对照品溶液避光放置在20h内
保持稳定。
2．7重现性试验：称取白花丹药材(根)样品5份，
每份约1g，制备供试品溶液并进行测定，计算药材
根中白花丹醌的量。结果5份平均质量分数
0．0513％，RSD一0．33％，表明本法具有较好的重
现性。
2．8加样回收试验：精密称取已测定量的药材(根)
样品约1g，分别加入白花丹醌对照品溶液
(0．0104mg／mL)1、2、3mL，按供试品溶液制备及
测定，计算回收率。结果6份样品平均回收率
98．7％，RSD一1．9％。
2．9样品测定：取不同采收期的白花丹根样品，按
供试品溶液处理方法处理。分别进行白花丹醌的测
定，结果如表1。
表1样品测定结果(n一3)
Table1 Determinationofsample(n一3)
样品号 药材采收期／月 白花丹醌／％ 样品号 药材采收期／月 白花丹醌／％
l l 0．1264 7 7 O．3510
2 2 0．5289 8 8 0．3928
3 3 0．3468 9 9 0．213l
4 4 0．3146 10 10 0．3312
5 5 0．3329 1l 11 0．1977
6 0 0．1956 12 12 0．2343
3讨论
3。1 本实验对白花丹有效成分的提取条件、检测波
长、色谱分离条件等方面进行了探索，实验结果表明
本实验方法提取到的白花丹醌量较高，用RP—
HPLC法作为白花丹药材中自花丹醌量的测定，方
法准确度、重现性好，而且简便、快速、可靠，可作为
白花丹药材的质量控制方法。
3．2从本实验结果表明，白花丹药材不同采收期中
白花丹醌的量2月最高，3～5月、7、8、10月均稳定
在较高水平，6、11、12月均较低，从9月到次年1月
有下降的趋势；实验结果规律不是太明显，可能与采
样为野生药材，很难确定其准确的生长年限有关。
3．3考虑到该药材为多年生蔓生亚灌木状草本植
物，在所采样品的产地除1～2月其植株的下部有
落叶现象外，基本上四季生长良好，花期9～10月，
因此笔者认为若以根人药，建议在花前期采收较好。
3．4 可考虑规范化种植后再用本方法对白花丹的
最佳采收期进行进一步研究，并得出更为准确、可靠
的结论。
References：
[1]SongLR，Hongx，DingXL．LargeEhctionaryfModern
ChineseMedicine．[M]．Beijing；PeopleS Medical
PublishingHouse，2001．
[z]ZhaoH，ChangHJ．Thetreatmentof62caseofbody
ringwormandbuttocksringwormwithPlumbagozeylanica
[J]．JExternTherT aditChinMed(中医外治杂志)，2003
(3)：27．
[3]SuWR．Observationofeffectonthetreatmentof50caseof
pruritusof kinwithPlumbagozeylanica[J]．Chin
EthnomedEthnopharm(中国民族医药杂志)，1996，19：27．
[4]LinJ，ZhongEx．Thetreatmentof30caseofbonejoint
diseaseswithcompoundandpowder[J]．RailwayMedJ(铁
道医学)，2001，29(5)：344．
[5]InformationCen erofChineseHerbalMedicine，StatePhar—
maceuticalAdministrationofChi a．Handbook07Active
ConstituentsinPbytomedicine(植物药有效成分手册)[M]．
Beijing：People‘SMedicalPublishingHouse，1986．
[6]LiuY，DengF，LiuC，eta1．Determinationofpiumbaginin
differentpartsofPlumbagozeylanicabyRPHPLC[J]．
ChinaJChin]V[aterMed(中国中药杂志)，2006，31(20)：
16R4]686
高效液相色谱法测定蜜柑草中槲皮索
吴冬梅
(河南省中医院，河南郑州450002)
蜜柑草为大戟科叶下珠属蜜柑草Phyllanthus
matsumuraeHayata的干燥全草，具有清肝、明目、
健胃、止痢、渗湿的功效‘¨，槲皮素是蜜柑草中黄酮
类化合物的主要成分之一[2]，具有抗自由基、抗氧
化、抗菌、抗癌防癌卜5|、抗病毒等m73多种药理作用
和生物活性‘8|。蜜柑草中槲皮素的测定方法还没有
报道，笔者用HPLC法测定槲皮素的量，优选出比
较好的提取方法和分离条件，以控制蜜柑草中槲皮
收稿日期：2006—10—12
作者简介：吴冬梅(1969一)，女，河南省中医院，硕士，主管药师，从事中药制剂研究。Tel：(0371)60908707E—mail：wdm。z@163．com
万方数据
·1260· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第8期2007年8月
素的量，方法简单、快速、准确，具有实用性。
1材料与仪器
日本岛津LC一20AT高效液相色谱仪，SPD一
20A型紫外检测器，CBM--102型色谱工作站，超
声波清洗器(HS6150D型，天津市恒奥科技发展有
限公司生产)，电子天平(BS224S，北京赛多利斯仪
器系统有限公司)。
槲皮素对照品：中国药品生物制品检定所提供
(10008l一200406)。
蜜柑草药材经河南中医学院药学院陈随清教授
鉴定为蜜柑草PhyllanthusmatsumuraeHay ta。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱岛津ODS柱(150mmx
4．6mm，5pm)，流动相为甲醇一0．4％磷酸溶液
(50：50)；体积流量1mL／min；检测波长为360
rim；柱温：40℃。在上述条件下蜜柑草中槲皮素与
其他干扰峰分离良好，理论板数以槲皮素峰计算不
低于2500。色谱图见图1。
0 5 10 15 20 0 5 lO 15 20
f／min
图1槲皮累对照品(A)、蓄柑草(B)的HPLC图
Fig．1HPLCChromatogramsofquercetinreference
substance(A)andP．matsumurae(B)
2．2对照品溶液的制备：精密称定槲皮素对照品
2．0mg，置10mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻
度，制成含槲皮素0．2mg／mL的对照品溶液。
2．3供试品溶液的制备：取样1g精密称定，置索
氏提取器中，用甲醇一25％盐酸溶液(4：1)20mL
提取至无色，提取液浓缩至5mL，移到10mL量瓶
中，并加甲醇至刻度，摇匀，即得。
2．4标准曲线的绘制：精密量取对照品溶液2．5、
5．0、7．5、10．0、12．5肛L，进样，测定槲皮素的吸收峰
面积，以进样量为横坐标，吸收峰面积为纵坐标，绘制
标准曲线，计算回归方程为：Y=601405．772
X一133307．35，r一0．9999，槲皮素在0．5～2．5
弘g线性关系良好。
2．5稳定性试验：吸取对照品溶液10弘L，每隔2h
进样测定1次，连续测定10h，槲皮素色谱峰面积
的RSD—1．35％。表明槲皮素在10h内稳定。
2．6精密度试验：精密吸取对照品溶液10肛L，连
续进样5次，按上述条件进行测定，槲皮素相对保留
时间稳定，峰面积积分值的RSD一0．90％，表明精
密度良好。
2．7重现性试验：取同一批样品，平行制备5份，按
上述条件进行测定，槲皮素的平均质量分数为
0．013％，RSD一1．69％。
2．8 回收率试验：取已测定量的蜜柑草粉末1g，
精密称定，分别加入0．10mg／mL槲皮素对照品溶
液1．0、2．0、3．0mL，按供试品溶液制备方法处理，
得到5份加样回收供试液。精密吸取各加样回收供
试液10FL，按上述色谱条件测定，结果槲皮素的平
均回收率为97．9％，RSD一1．10％。
2．9样品测定结果：精密称取5批样品，每批3份，
制备供试品溶液。精密吸取供试液10弘L，按上述色
谱条件测定，结果见表1。
表1 蜜柑草中槲皮素测定结果(宠一3)
Table1 DeterminationofquercetininP．matsumurae
(心一3)
样品号 槲皮素／％ 样品号 槲皮素／％
1 0．0t46 4 0．0139
2 O．0123 5 0．0164
3 0．0167
3讨论
3．1提取条件的选择：曾采用甲醇超声提取，甲醇
定容制备供试品，结果槲皮素的提取率较低。用甲
醇一25％盐酸溶液(4：1)混合液加热回流提取效率
较高，且易于分离。
3．2柱温的选择：柱温对样品出峰时间和分离效果有
着明显的影响，以25、30、40℃的柱温进行筛选，结果
以40℃条件下分离效果好，而且出峰时间适宜。
3．3 流动相比例的选择：以甲醇一0．4％磷酸溶液
(50：50)为流动相，曾对其比例进行调整，随着甲
醇比例的增加槲皮素的拖尾稍有改善，但出峰时间
提前，不利于槲皮素与杂质峰的分离，所以选择了
50：50的比例。
References：
[1]JiangsuNewMedicalCo lege．DictionaryofChineseMateria
Medica(中药大辞典)[M]．Shanghai：ShanghaiPeopleS
PublishingHouse，1977．
E2]ChenYW，RenLJ．Studiesontheanticancerconstituents
ofMatsumuraLeafflower(Phyllanthusmatsumurae)I．
Isolationandidentificationofflavonoidc mpounds[J]．Chin
TraditHerbDrugs(中草药)，1997，28(1)：5-7．
[33HuJF．InhibitoryeffectsofPhyllanthusemblicajuiceon
formationofN——nitrosomorpholineinvitroa dN·-nitroso—-
prolineratandhuman[J]．ChinJPreyMed(中华预防医
学杂志)，1990(3)：132—135．
[4]SyamasunderKV，SinghB，ThakurRS，eta1．Antihepa—
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第8期2007年8月·1261·
totoxicprinciplesofPhy lantusnir riherbs[J]．Ethnophar—
macology，1985，14(1)：41．
[mlWangCJ，YuanDP，ChenW，ela1．EffectsofPhyllanthus
urinariaL．onhumanhepatomacells[J]．LishizhenJTradit
ChinMedRes(时珍国药研究)，1997，8(6)：499．
[6]ThyagarajanSP，ThiruneelakanK，SubramanianS，eta1．
Invit—roinactivationofHbsAgby EclipaalbaHasskand
PhyllanthusniruriLinn．[J]．1ndMedRes，1982，76
(Suppl)：124．
[73XuDW，MaHL，RenzY，eta1．EffectsofPhyllathus
AmarusonhepatitisBv rus[J]．TianjinMedJ(天津医药)，
1994(12)：?17，
[8]ChenXH，HuYM，LiaoYQ．Theprotectiveeff ctof
ChongqingPhyllanthusurinariaL．OHCCL4damagedhepato—
cyteofrats[J]．PharmClinChinMaterMed(中药药理与临
床)，1994，10(4)：17—18．
HPLC法测定白术中的白术内酯I、lI、Ⅲ
刘伟祥，黎琼红。，谢晨，段启
(广东康美药业股份有限公司，广东普宁 515300)
白术为菊科植物白术Atractylodesmacroce—
phalaKoidz．干燥根，主产于浙江、安徽、湖北、湖南
等省。其性味甘、苦，温，具有健脾益气，燥湿利水，止
汗，安胎的功效[1]。主要含有挥发油成分和内酯类成
分。其中内酯类成分具有抗炎、抗肿瘤作用[2’3]，该类
成分还具有调节胃肠道功能和促进营养物质吸收的
功能，尤以白术内酯I作用明显H]。为有效控制白术
质量，本实验采用HPLC法建立内酯类成分的定量
分析方法。该方法可操作性强，重现性好，为更好地
控制白术药材质量提供了科学依据。
1仪器与试药
美国Agillent1100高效液相色谱仪，二级管阵
列检测器，1100色谱工作站。白术内酯I、Ⅱ、Ⅲ对
照品购自中国药品生物制品检定所，批号分别是：
1396—060123、1397—060123、1398—060123。乙腈和甲
醇均为色谱纯，水为纯化水。药材购于不同产地，经
江西中医学院鉴定教研室鉴定为正品白术。
2方法与结果
2．1色谱条件：DikmaKromasilC18(250mm×4．6
mm，5Urn)色谱柱，以乙腈为流动相A，水为流动
相B，梯度洗脱程序为(A)：0～16rain：60％～
76％；16～18rain：76％～100％；18～30rain：
100％。体积流量为1．0mL／min，柱温25℃，白术
内酯I、Ⅲ检测波长为220nm、白术内酯Ⅱ检测波
长为276nm，进样量10弘L。理论塔板数以白术内
酯I计算应不低于5000。色谱图见图1。
2．2对照品溶液的制备：精密称取白术内酯I、Ⅱ、
Ⅲ对照品2．85、1．94、8．03mg，置于25mL量瓶
0 4 8 12 16 20
D
0 4 8 12 16 200 4 8 12 IO ZU
，／min
1一白术内酯Ⅲ 2一白术内酯I 3一白术内酯Ⅱ
1一atractylen。1ideⅢ 2-atractylenolideI 3-atractylen01ideⅡ
图1 白术内酯I、皿(A，220rim)、白术内酯Ⅱ
(B，276am)和样品(C、D)HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramsfatractylenolidesI， Ⅲ
at220nm(A)，Ⅱat276nm(B)，samples
at220nm(C)，and276am(D)
中，用甲醇溶解定容至刻度，制成含有白术内酯I、
Ⅱ、Ⅲ分别为0．114、0．078、0．321mg／mL的混标
储备液，即得。
2．3供试品溶液的制备：称取白术药材粉末(过3
号筛)约1g，置于50mL锥形瓶中，加入甲醇40
mL，超声30rain，滤过，滤液浓缩至小体积，以甲醇
转移并定容至10mL量瓶中，摇匀，得100mg／mL
的供试品溶液。
2．4线性关系考察：分别精密吸取白术内酯I、Ⅱ、
Ⅲ对照品储备液0．1、0．2、0．5、1．0、2．0、5．0、10．0
mL加甲醇定容至10mL量瓶中，摇匀。在上述色谱
条件下进行分析，分别以色谱峰面积(y)对质量浓
度(X)绘制标准曲线。结果表明：白术内酯I、Ⅱ、
收稿日期：2006—11-10
作者简介：刘伟祥，男，副主任药师，主要从事药物新剂型研究。
*通讯作者黎琼红(1979一)，女，硕士研究生。Tel：(0663)2920370E—mail：kj6868kjf@163．COrn
0
万方数据
高效液相色谱法测定蜜柑草中槲皮素
作者： 吴冬梅
作者单位： 河南省中医院,河南,郑州,450002
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(8)

参考文献(8条)
1.Jiangsu New Medical College Dictionary of Chinese Materia Medica 1977
2.Chen Y W;Ren L J Studies on the anticancer constituents of Matsumura Leafflower (Phyllanthus
matsumurae) I.Isolation and identification of flavonoid compounds 1997(01)
3.Hu J F Inhibitory effects of Phyllanthus emblica juice on formation of N-nitrosomorpholine in
vitro and N-nitrosoproline in rat and human 1990(03)
4.Syam asunder K V;Singh B;Thakur R S Antihepatotoxicprinciples of Phyllantus niruri herbs[外文期刊]
1985(01)
5.Wang C J;Yuan D P;Chen W Effects of Phyllanthus urinaria L.on human hepatoma cells 1997(06)
6.Thyagarajan S P;Thiruneelakan K;Subramanian S Invit-roinactivation of HbsAg by Eclipaalba Hasskand
Phyllanthusniruri Linn 1982(zk)
7.Xu D W;Ma H L;Ren Z Y Effects of Phyllathus Amarus on hepatitis B virus 1994(12)
8.Chen X H;Hu Y M;Liao Y Q The protective effect of Chongqing Phyllanthus urinaria L.on CCL4 damaged
hepatocyte of rats 1994(04)

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