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Alkaloidal constituents of Nauclea officinalis

胆木生物碱成分研究



全 文 :·170· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第2期2007年2月
道[9],结果见表2。
表2化合物I~Ⅶ对HeLa和L929细胞生长的
抑制作用(咒一6)
Table2 Inhibitionofc mpoundsI一ⅦonHeLa
andL929cellgrowth(弹一6)
抑制率/%
化合物HeLa L929
30pg/mL10pg/mL 30pg/mL 10pg/mL
5结果与讨论
环菠萝蜜烷型三萜类化合物I~Ⅶ首次从绿升
麻植物中分离得到。抗癌药理实验显示化合物I~
Ⅶ均具有不同程度的细胞毒作用,其中,化合物I和
Ⅱ在质量浓度30ttg/mL时对宫颈癌细胞(HeLa)
和小鼠成纤维细胞(L929)具有较强细胞毒作用。从
表2可以看到,化合物对不同的细胞株可能存在选
择性。因此,在以后的研究中,应增加多种细胞株,以
探讨其细胞毒选择性。而且,继续深入进行绿升麻中
三萜皂苷类成分研究,积累化合物库,并进行衍生
化,探讨其内在的药效关系,为进一步研究和开发利
用绿升麻这一民族医药提供依据。
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胆木生物碱成分研究
宣伟东1’2,卞俊2,陈海生卜
(1.第二军医大学药学院天然药物化学教研室,上海200433;2.解放军第411医院
南京军区药学专科中心,上海200434)
摘要:目的研究胆木Naucleaofficinalis的生物碱成分。方法95%乙醇提取胆木带皮茎枝的化学成分,采用
反复硅胶柱色谱、SephadexLH20凝胶柱色谱和C一18反相硅胶柱色谱分离纯化,通过光谱分析鉴定化合物的结
构。结果从醋酸乙酯部位分离得到11个成分,其中9个为吲哚类生物碱,2个喹啉酮类生物碱,分别鉴定为:牛眼
马钱托林碱(angustoline,I)、19一乙氧基牛眼马钱托林碱(19—0一ethylangustoline,Ⅱ)、3-S一3,4-二氢牛眼马钱托林
碱(3一S一3,4-dihydroangustoline,Ⅲ)、3-R一3,4一二氢牛眼马钱托林碱(3-R一3,4一dihydroangustoline,Ⅳ)、naucleamide
A(V)、异长春花苷内酰胺(strictosamide,V1)、喜果苷(vincosamide,Ⅶ)、6-异乙酰基长春花苷内酰胺(67一aeetyl—
strictosamide,Ⅷ)、2L异乙酰基长春花苷内酰胺(2’一acetyl—strictosamide,1X)、短小蛇根草苷(pumiloside,x)、3-表
短小蛇根草苷(3一epi—pumiloside,XI)。结论化合物I~Ⅺ均为首次从该植物中分离得到。
关键词:乌檀属;胆木;吲哚类生物碱
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2007)02—0170一04
收稿日期:2006—0612
作者简介:宣伟东(1971一),男(汉族),浙江诸暨人,2005年毕业于第二军医大学药学院,获博士学位。现在解放军第411医院南京军区
药学专科中心工作,主要从事天然产物化学方面的研究。Tel/Fax:(021)65280289E—mail:wdxuan@hotmail.corn
*通讯作者陈海生Tel/Fax:(021)25074439Email:haishengc@hotmail.corn
万方数据
中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第2期2007年2月·171·
AlkaloidalconstituentsofNauclea0fficinalis
XUANWei—dong1“,BIANJun2,CHENHai—shen91
(1.DepartmentofNaturalMedicalChemistry,SchoolofPharmacy,SecondMilitaryMe icalUniversity,Shanghai
200433,China;2.CenterofPharmaceutics,PLA411”Hospital,Shanghai200434,China)
Abstract:ObjectiveToinvestigatethelkaloidalconstituentsofNaucleaofficinalis,ananti—i flam—
matoryandantibacterialraditionalChineseherb.MethodsThealkaloidswereisolatedanpurifiedby
silicagel,SephadexLH20,andC一18ODScolumnchromatographyrepeatedly,andtheirstructureswere
identifiedbyspectralanalysis.ResultsElevenalkaloidswereisolatedfromthestemsofN.off,cinalis
andtheirstructureswereidentifiedasangustoline(I),19一。一ethylangustoline(Ⅱ),3-S一3,4-dihydroan—
gustoline(Ⅲ),3一R一3,4一dihydroangust01ine(Ⅳ),naucleamideA(V),strictosamide(Ⅵ),vincosamide
(Ⅶ),67一acetyl—strictosamide(Ⅷ),27-acetyl—strictosamide(Ⅸ),pumiloside(X),3-epi—pumiloside(Ⅺ).
ConclusionCompoundsI一Ⅺareisolatedfromthisplantforthefirsttime.
Keywords:NaucleaL.;thestemsofNaucleaofficinalisPierrcexPitard;indolealkaloids
胆木Naucleaoff,cinalisPierrcexPitard,又名
乌檀、药乌檀、黄羊木,为茜草科乌檀属乔木,主要分
布于广东、广西和海南等地,为我国重点保护的珍稀
野生植物物种之一。胆木性味苦、寒,具有清热解毒、
消肿止痛之功效。我国南方民间常用于感冒发热、肺
炎、肠炎、痢疾、湿疹、皮疹、脓疡等病的治疗。临床有
“胆木注射液”和“胆木浸膏片”用于急性扁桃腺炎、
急性咽喉炎、急性结膜炎及上呼吸道感染。国内外尚
未对该植物进行系统的化学成分研究,已经报道的
主要为吲哚类生物碱成分‘1~3]。笔者曾经对胆木
95%乙醇提取物的氯仿部位进行研究,从中分离得
到了8个非生物碱成分[4],2个新的吲哚类生物碱
乌檀酰胺A、B(naucleactoninA、B)以及乌檀费新
碱、乌檀费丁碱。笔者进一步对其醋酸乙酯部位进行
研究,从中分离得到了11个生物碱成分,通过理化
性质和波谱学数据确定了其化学结构,其中9个吲
哚类生物碱,分别为牛眼马钱托林碱(I)、19一乙氧
基牛眼马钱托林碱(Ⅱ)、3-S一3,4一二氢牛眼马钱托
林碱(n1)、3-R一3,4一二氢牛眼马钱托林碱(IV)、nau—
cleamideA(V)、异长春花苷内酰胺(VI)、喜果苷
(Ⅶ)、6-异乙酰基长春花苷内酰胺(Ⅷ)、27~异乙酰
基长春花苷内酰胺(Ⅸ);2个喹啉酮类生物碱苷,分
别为短小蛇根草苷(X)和3一表短小蛇根草苷(Ⅺ)。
化合物I~X1均为首次从该植物中分离得到。首次
从该属植物中分离得到了3对C一3位差向异构体,
并对其核磁共振数据进行了归属。
1实验部分
RY一2熔点测定仪(未校正);BrukerDRX一
500核磁共振仪(TMS为内标);VarianMAT一212
质谱仪;SephadexLH20凝胶为Pharmacia公司产
品;柱色谱硅胶(200~300目)、薄层色谱硅胶(40
u)、HSGF。。。高效薄层色谱板均为烟台芝罘黄务硅
胶开发试验厂生产。胆木带皮茎枝于2002年5月采
集自海南省万宁市兴隆地区,经自然风干后切片。由
中国医学科学院药用植物研究所海南分所朱平主任
鉴定为茜草科乌檀属乔木乌檀Ⅳ.锨cinalisPierrc
exPitard。
2提取和分离
胆木干燥带皮茎枝3.6kg经粉碎后用95%乙
醇浸泡提取3次,每次7d,减压回收溶剂后将剩余
干浸膏(260g)均匀分散于蒸馏水中,依次用氯仿(1
L×3)、醋酸乙酯(1L×3)萃取,分别得到氯仿萃取
物12.5g和醋酸乙酯萃取物120g。取醋酸乙酯萃
取物100g,湿法装硅胶柱(120cm×10.5cm,1000
g,200~300目),CDCl。一MeOH混和溶剂梯度洗脱。
各洗脱组分经反复硅胶柱色谱、SephadexLH20凝
胶色谱和C一18反相硅胶柱色谱分离纯化,分别得到
化合物I(86mg)、Ⅱ(28mg)、Ⅲ(30mg)、IV(35
mg)、V(96mg)、VI(10.5g)、Ⅶ(124mg)、Ⅷ(66
mg)、Ⅸ(38mg)、X(3.6g)、XI(200mg)。
3 结构鉴定
化合物I:C。。H。,N。o:,深棕色颗粒状结晶
(CDCl3~MeOH1:1),mp294~296℃(分解),在
氯仿溶液中显示紫色荧光。1H—NMR低场一组吲哚
环A环未取代的4个芳氢信号,结合C一5、C一6位亚
甲基氢信号,确定p—carboline母环;低场另外3个
芳氢单峰归属吡啶环;较高场连氧次甲基氢与甲基
氢双峰偶合,表明CH。CHOH一片断存在。EI—MS
m/z(%):331([M+],100.0),316(64.7),388
(6.78),158(3.99),1】5(3.97)。1H—NMR(DMSO—
万方数据
·172· 中草喃 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第2期2007年2月
d6,500MHz)艿:11.84(1H,s,H一1),9.26(IH,s,H一
17),8.79(1H,s,H一21),7.62(1H,d,J一7.0Hz,H一
9),7.49(1H,d,J一7.0Hz,H一12),7.28(1H,t,J一
7.0Hz,H一11),7.27(1H,s,H—14),7.09(1H,d,J一
7.0Hz,H一10),5.56(1H,s,OH一19),5.34(1H,q,
J一7.0Hz,H一19),4.45(2H,m,H一5),3.12(2H,t,
J一7.0Hz,H一6),1.54(3H,d,J一6.0Hz,H一18)。
13C—NMR数据见表1。以上1H—NMR数据与文献报
道[51的angustoline一致,故确定为牛眼马钱托林
碱,为首次报道。
化合物Ⅱ:C。。H。。N。0:,黄色块状结晶
(MeoH),在氯仿溶液中显示紫色荧光。EI—MS给
出分子离子峰:359,脱甲基峰(344),脱乙基峰
(330),脱乙氧基峰为基峰(315)。1H—NMR除了多出
较高场相互偶合的连氧次甲基4重峰与甲基双峰
外,其余与化合物I一致,提示Ⅱ为C一17位乙氧基
取代。EI—MSm/z(%):359(EM+],55.11),344
(11.37),330(3.84),315(100.0),300(18.91),287
(7.62),156(7.41),149(15.29)。1H—NMR(MeOH—
d。,500MHz)d:9.28(1H,s,H一17),8.58(1H,s,H一
21),7.55(1H,d,J一8.0Hz,H一9),7.42(1H,d,J一
8.0Hz,H一12),7.25(1H,t,J一8.0Hz,H一11),7.21
(1H,s,H一14),7.06(1H,d,J一8.0Hz,H—10),5.02
(1H,q,J一7.0Hz,H一19),4.61(1H,m,H一5a),
4.41(1H,m,H一5b),3.55(1H,dp,J一7.0,3.0Hz,
H一24b),3.43(1H,dp,J一7.0,2.0Hz,H一24a),
3.13(2H,t,J一6。5Hz,H一6),1.59(3H,d,J一7。0
Hz,H—18),1.23(3H,t,J一7.0Hz,H一23)。
13C—NMR数据见表1。以上数据和文献报道[6]的19~
o—ethylangust01ine一致,确证化合物Ⅱ为19一乙氧
基牛眼马钱托林碱。
化合物Ⅲ:C。。H。。N。O:,黄色针状结晶
(MeoH)。化合物皿1H—NMR谱和I相比,少了H一
14单峰,多了霸5.0左右的H一3峰和“2.9H~14
亚甲基峰,C一5和C一6同碳质子产生裂分,其他基本
一致;”C—NMR谱中少了C一3、C一14两个芳碳,多了
C一3、C~14碳信号,推断Ⅲ的结构与I类似,只是C~
3、C一14为饱和键。由于H一3和H一14a、H一14b的偶
合常数都较小,确定Ⅲ的H一3为a取向,C一3为S构
型。EI—MS研屈(%):333([M+],100.0),315
(73.42),300(51.04),286(9.09),169(63.64),157
(9.09),144(15.04),115(11.52)。1H—NMR(DM~
SO—d6,500MHz)艿:9.03(1H,s,H一17),8.75(1H,s,
H一21),7.47(1H,d,J一7.0Hz,H一9),7.35(1H,d,
J=7.0Hz,H一12),7.11(1H,dt,J一7.0,1.0Hz,
H一11),7.01(1H,dt,J一7.0,1.0Hz,H一 0),5.17
(1H,q,J=7.0Hz,H一19),5.12(1H,ddd,J一13.0,
5.O,2.0Hz H 5a),5.02(1H,m,H一3),3.92(1H,
dd,J一16.0,4.OHz,H一6a),3.06(1H,dt,J一13.0,
12.0,4.0Hz H一5b),2.94(1H,m,H一6b),2.89
(2H,m,H一14),1.64(3H,d,J一7.0Hz,H一18)。
”C—NMR数据见表1。以上数据和文献报道[73的3一
S一3,4一dihydroangustoline一致,确定为3一S一3,4一二
氢牛眼马钱托林碱。
表1化合物I~v的”C—NMR光谱数据
Table1 ”C—NMRDataofcompoundsI—V
a;125MHz,DMSO—d6b:125MHz,MeOH—d4
化合物Ⅳ:C。。H,。N。O:,黄色针状结晶
(MeOH)。化合物IV的EI—MS给出与Ⅲ相同的谱
图,”C—NMR几无差别。两者的1H—NMR谱基本一
致,Ⅳ的H一3为一宽二重峰,C一14的两个质子裂分
成了两个二重峰,与H一3的偶合事常数分别为
J3I;。一10Hz,J。t14b一5Hz,推断Ⅳ为化合物噩的C一
3位差向异构体,H一3和H一14a处在反式直立键位
置,即H一3为B位取向,C一3为尺构型。EI—MSm/z
(%):333(100.0),315(73.42),300(51.04),286
(9 09) 169(63.64),157(9.09),144(15.04),115
( 1.52)。1H—NMR(DMSO—d。,500MHz)艿:9. 4
(1H,s,H—17),8.82(1H,s,H一21),7.48(1H,d,J一
.0Hz,H一9),7.36(1H,d,J一7.0Hz,H—12),7.12
(1H,t,J=8.0Hz,H一11),7.02(1H,t,J一8.0Hz,
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第2期2007年2,El·173·
H一10),5.28(1H,q,J=6.0Hz,H一19),5.13(1H,
dd,J—13.0,4.0Hz,H一5a),5.03(1H,brd,J一
13.0Hz,H一3),3.88(1H,dd,J一16.0,4.0Hz,H一
6a),3.06(1H,dt,J一13.0,13.0,4.0Hz,H一5b),
2.95(1H,1TI,H一6b),2.90(1H,dd,J一13.0,10.0
Hz,H一14a),2.81(1H,dd,J一13.0,5.0Hz,H一
14b),1.49(3H,d,,一6.0Hz,H一18)。¨C—NMR数
据见表1。以上数据与文献报道[7]一致,确定为3一R一
3,4一二氢牛眼马钱托林碱。
化合物V:C:。H。。N:0。,无色针状结晶
(MeOH)。13C—NMR数据见表1。EI—MS、1H—NMR、
”C—NMR光谱数据和文献报道嘲的naucleamideA
一致。
化合物Ⅵ:C。。H。。N:08,白色粉末(MeOH)。
13C—NMR数据见表2。EI—MS、1H—NMR、13C—NMR
数据与文献报道[93异长春花苷内酰胺一致。
表2化合物Ⅵ~Ⅺ的”C—NMR光谱数据
Table2 13C—NMRDataofcompoundsVl—XI
a:125MHz,DMSO—d6b:125MHz,MeOH—d{
化合物Ⅶ:C。。H。。N:O。,白色粉末(MeOH),mp
213~215℃。13C—NMR数据见表2。EI—MS、
1H—NMR、13C—NMR数据与文献报道嘲的喜果苷一致。
化合物Ⅷ:C:。H。。N。o。,白色粉末(MeOH)。
”C—NMR数据见表2。ESI—MS、1H—NMR、nC—NMR
数据与文献报道[10]的67一异乙酰基长春花苷内酰胺一
致。
化合物Ⅸ:C。。H。。N。o。,白色粉末(MeOH)。
13C—NMR数据见表2。ESI—MS、1H—NMR、13C—NMR
数据与文献报道[9]的27一异乙酰基长春花苷内酰胺
一致。
化合物x:C:。H:8N20。,无色针晶(MeOH),
p>300℃,Morlishi反应呈阳性。13C—NMR数据
见表2。EI—MS、1H—NMR、”C—NMR数据与文献数
据‘113对照,确定化合物x为短小蛇根草苷。
化合物Ⅺ:C。。H:8N20。,白色粉末(MeOH),
rap>300℃,Morlishi反应呈阳性。”c—NMR数据
见表2。EI—MS、1H—NMR、”C—NMR光谱数据与文献
对照m],确定化合物Ⅺ为3一表短小蛇根草苷。
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万方数据
胆木生物碱成分研究
作者: 宣伟东, 卞俊, 陈海生, XUAN Wei-dong, BIAN Jun, CHEN Hai-sheng
作者单位: 宣伟东,XUAN Wei-dong(第二军医大学药学院,天然药物化学教研室,上海,200433;解放军第
411医院南京军区药学专科中心,上海,200434), 卞俊,BIAN Jun(解放军第411医院南京军区
药学专科中心,上海,200434), 陈海生,CHEN Hai-sheng(第二军医大学药学院,天然药物化
学教研室,上海,200433)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2007,38(2)
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2. 宣伟东.卞俊.陈海生.XUAN Wei-dong.BIAN Jun.CHEN Hai-sheng 大孔树脂法分离纯化胆木中短小蛇根草苷[期
刊论文]-中药材2007,30(10)
3. 黄有兴.刘春.HUANG You-xing.LIU Chun HPLC法测定胆木浸膏胶囊中异长春花苷内酰胺的含量[期刊论文]-中国
热带医学2008,8(12)
4. 陶佳颐.戴胜军.刘军锋.窦德强.裴月湖.刘珂 胆木化学成分的研究[期刊论文]-中草药2007,38(8)
5. 宣伟东.陈海生.袁志仙.朱平.XUAN Wei-dong.CHEN Hai-sheng.YUAN Zhi-Xian.ZHU Ping 中药胆木的化学成分
[期刊论文]-中国天然药物2005,3(3)
6. 李海龙.谭银丰.赖伟永.刘明生.符乃光.张俊清.LI Hai-long.TAN Yin-feng.LAI Wei-yong.FU Nai-guang.LIU
Ming-sheng.ZHANG Jun-qing 海南胆木药材指纹图谱研究[期刊论文]-时珍国医国药2009,20(11)
7. 李备.朱毅.赵毓梅.郑霞.刘春.LI Bei.ZHU Yi.ZHAO Yu-mei.ZHENG Xia.LIU Chun 胆木注射液的部分毒理观察
[期刊论文]-中国新药与临床杂志2007,26(10)
8. 赵红兰 胆木注射液滴眼治疗重症药疹所致结膜炎效果观察[期刊论文]-基层医学论坛2010,14(11)
9. 宣伟东 中药胆木和云南狗牙花活性成分研究[学位论文]2005
10. 唐艳丽.杨爱梅.张樱山.汪汉卿.TANG Yan-l.YANG Ai-mei.ZHANG Ying-shan.WANG Han-qing 灰绿黄堇生物碱
化学成分的研究(Ⅰ)[期刊论文]-中国中药杂志2005,30(3)

引证文献(10条)
1.邓世明.汤丽昌.王宁.杨先会 胆木叶的水溶性成分研究[期刊论文]-时珍国医国药 2011(5)
2.潘桂玲.孟兆青.刘文君.丁岗.原少伟.苗宏伟.萧伟 正交试验优选胆木中异长春花苷内酰胺提取工艺[期刊论文]-
世界科学技术-中医药现代化 2012(2)
3.王和飞.陈道运.王雪 胆木硬枝扦插育苗研究[期刊论文]-天津农业科学 2011(4)
4.李海龙.谭银丰.赖伟永.刘明生.符乃光.张俊清 海南胆木药材指纹图谱研究[期刊论文]-时珍国医国药 2009(11)
5.王和飞.梁柳.张燕.刘进平 胆木愈伤组织与悬浮细胞培养研究[期刊论文]-热带农业科学 2011(6)
6.王和飞.张燕.林应邀.陈川平.刘进平 胆木组织培养与快速繁殖技术研究[期刊论文]-热带作物学报 2011(10)
7.姜燕.刘艳丽 胆木饮片及其三种不同制剂的质量分析研究[期刊论文]-中国药事 2012(4)
8.宣伟东.卞俊.陈海生 大孔树脂法分离纯化胆木中短小蛇根草苷[期刊论文]-中药材 2007(10)
9.张俊清.戴水平.杨卫丽.田建平.刘明生 海南黎药资源调研现状分析[期刊论文]-海南医学院学报 2009(3)
10.姜燕.刘艳丽.吕恂琪.邵晓丽 胆木及其制剂的研究现状[期刊论文]-中国药师 2012(8)


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