全 文 ：·1574· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第10期2006年10月
情况下可保持数年不落。-
笋芽的直径生长缓慢而平稳，即使高生长停止
后，直径生长也未迅速增粗。在引种地栽培过程中，
茎粗细比较均匀，茎的中间部分“鼓槌”状不明显，并
且无翼状叶鞘包被或不明显。而野生条件下的当年
生茎株“鼓槌”状明显，银白色翼状叶鞘包被茎株可
达1～2年，到第三年时才慢慢脱落，因此新老茎株
容易区分。
’
3讨论
鼓槌石斛主要分布于云南南部至西南部，印度
东北部、缅甸、越南、老挝和泰国也有分布。常生于海
拔500～1700m的疏林中树上或山腰至山脊的岩
石上。
西双版纳地区，其野生资源在海拔1100～
1400m这一垂直带比较常见：本实验栽培观察的
分株苗采白海拔1300m处，年平均气温18．9℃，
年平均降水量1496mm，相对湿度80％，年平均日
照时数2440．1h，气候凉爽湿润。实验地海拔高584
m，平均气温22．2℃，最高月均温26．1℃，最低月
均温16．0℃，年降水量1080．3mm，平均相对湿度
80％，年日照时数205．6h(1975—1995年资料)。
鼓槌石斛从高海拔1300m的地区引种到低海拔
584m地区，亦能开花结果，并生长良好。随着天然
林保护工程的实施，人们对生物多样性保护的意识
逐渐增强，鼓槌石斛的人工栽培是保护野生资源免
遭厄运的重要途径之一。鼓槌石斛的栽培基质为碎
砖块的试种成功，一方面可利用西双版纳有着丰富
的森林资源进行林下种植，不与农民争田地，充分节
约和利用土地资源。另一方面，可便于管理，解决因
树高而采收困难的问题。从而避免掠夺性采收发生，
这对其野生资源保护有着重要意义。一
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不同产地知母中皂苷类成分的测定
原 源1’3，陈万生2’3。，孙连娜1’3，郑水庆1’3，娄子洋1，张汉呀1
(1．第二军医大学药学院，上海200433；2．第二军医大学附属长征医院药学部，上海200003；
3．第二军医大学现代中药研究中心，上海200433)
知母为百合科植物知母Anemarrhenaasphode—
loidesBunge的根茎，始载于《神农本草经》，列为中
品。具有滋阴降火、润燥、滑肠的功效，常用于外感热
病、高热烦渴、肺热燥咳、骨蒸潮热、内热消渴、肠燥
便秘等症的治疗。知母的化学成分主要为甾体皂苷、
双苯吡酮类、木脂素类、多糖类等，活性成分主要是
甾体皂苷[1]。血小板聚集和血栓形成是缺血性心脑
损伤的重要原因，现代药理研究证明，知母皂苷E。、
B一11、B、Anl均能抑制血小板聚集，AⅢ的抑制活性
最强[2叫]。此外，知母皂苷可明显改善大鼠脑缺血再
灌注损伤引起的行为症状、缩小脑梗死体积、降低脑
缺血大鼠脑水肿[5]，还是很强的Na+，K+一ATP酶
的抑制剂，并具较强抗病毒(流感A一3型)作用E1|。现
代生药学研究资料表明，药用植物种内的变异是影
响生药品质的重要因素，在种的进化过程中，不同产
地知母因生长环境等多种因素的长期作用，形态特
征已发生分化[6]。为探讨种内的变异是否会造成其
化学成分的改变，影响生药品质，本实验选择知母中
分得的4种甾体皂苷，建立高效液相色谱一蒸发光散
射法[7]，考察测定不同产地知母中该类成分的变化。
1仪器与试药
美国Waters510型泵；法国SEDEX75型蒸发
光散射检测器(ELSD)；甲醇、乙腈为色谱纯，水为
双蒸水：SrA3dy色谱数据工作站；知母皂苷E。、知
收稿日期：2005—12—20
基金项目：上海市科委重大科技专项(03DZl9514)
作者简介：原源(1974一)，女，山东省荣成市人，博士，主要从事中药质量控制方面的工作。E—mail：yuanyuan74@mail．china．corn
*通讯作者陈万生E—mail：chenws@vnet．citiz．net
万方数据
中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第371卷第10期2006年10月·1575·
母皂苷B一Ⅱ、知母皂苷B、知母皂苷AⅢ对照品(自
提，质量分数为99％以上)；知母生药采集于全国lO
个地区，生药来源见表1。各批生药均经第二军医大
学长征医院药学部陈万生副教授鉴定为百合科植物
知母A．asphodeloidesBunge的干燥根茎。
一 表1知母样品
：Table1 SamplesofA．asphodeloides
2方法与结果
2．1色谱条件：色谱柱；依利特HypersilODSC。8
柱(200mm×4．6mm，5弘m)；柱温：25℃；流动相：
采用乙腈一蒸馏水梯度洗脱：0～10min乙腈o．oA～
30％，10～20rain乙腈30％～60％，20～30min乙
腈60％～100％；体积流量：0．8mL／min；ELSD检
测器漂移管温度：40℃；载气流速：340kPa。理论塔
板数按知母皂苷B一Ⅱ计算应不低于4000。
Z．2对照品溶液制备：分别精密称取知母皂苷E，、
知母皂苷B一Ⅱ、知母皂苷B、知母皂苷AⅢ对照品
12．02、10．00、12．80、10．20mg，以水溶解，定容10
mL量瓶中，摇匀，配制成1．202、1．000、1．280、
1．020mg／mL的对照品溶液。
2．3供试品溶液制备：不同产地知母生药样品60
℃烘干，粉碎，过10目筛，分别精密称取10g，以5
倍量30％乙醇浸24h，渗漉，收集24倍量渗漉液，
浓缩，定容至100mL，取1mL；稀释^并定容于25
mL量瓶中，0．45p．m微孑L滤膜滤过，滤液为供试品
溶液。
2．4标准曲线的制备：精密吸取知母皂苷E。对照
品溶液0．05、0．1、0．2、0．5、1．0mL置10mL量瓶
中，加水至刻度，摇匀，进样20弘L。以峰面积的常用
对数为纵坐标，质量浓度的常用对数为横坐标，线性
回归，回归方程见表2。
精密吸取知母皂苷B一Ⅱ对照品溶液0．1、0．2、
0．5、1．0、2．5mL置5mL量瓶中，加水至刻度，摇
匀，进样20肛L。以峰面积的常用对数为纵坐标，质
量浓度的常用对数为横坐标，线性回归，回归方程见
表2。
精密吸取知母皂苷B对照品溶液0．1、0．3、
0．6、0．8、1．0mL置10mL量瓶中，加水至刻度，摇
匀，进样20弘L。以峰面积的常用对数为纵坐标，质
量浓度的常用对数为横坐标，线性回归，回归方程见
表2。
精密吸取知母皂苷AⅢ对照品溶液0．05、0．1、
0．2、0．5、1．0mL置10mL量瓶中，加水至刻度，摇
匀，进样20弘L。以峰面积的常用对数为纵坐标，质
量浓度的常用对数为横坐标，线性回归，回归方程见
表2。
表2知母皂苷的线性方程、相关系数与线性范围
Table2 Linearequation，correlativec．oeffici nt，and
linearrangeofsaponinsofA．asphodeloides
2．5稳定性试验：取知母皂苷Ef、知母皂苷B一Ⅱ、
知母皂苷B、知母皂苷AⅢ对照品混合溶液，于配制
后的0、4、8、12、24、48h测定，其峰面积积分值的
RSD分别为1．76％、1．32％、1．51％、1．48％。结果
表明在48h内稳定。
2．6精密度试验：取同一份知母供试品溶液连续重
复进样3次，测定峰面积积分值，计算知母皂苷E。、
知母皂苷B一Ⅱ、知母皂苷B、知母皂苷Am日内精密
度的RSD分别为1．38％、1．15％、1．73％、1．89％。
另取同一份知母供试品溶液每日进样1次，连续重
复3日，测定峰面积积分值，计算知母皂苷E。、知母
皂苷B一Ⅱ、知母皂苷B、知母皂苷Am日间精密度的
RSD分别为1．64％、2．15％、1．79％、2．32％。
2．7重现性试验：取同一批样品精密称取5份，制
备供试品溶液，测定峰面积得RSD值，分别为知母
皂苷E。：0．76％；知母皂苷B一Ⅱ：0．54％；知母皂苷
B一Ⅱ：0．35％；知母皂苷A11：0．78％。
2．8加样回收率试验：精密称取已测定量的知母样
品约1g，定量加入知母皂苷E。、知母皂苷B一1、知
母皂苷B、知母皂苷A1I对照品，按供试品制备及测
定方法操作，平均回收率及RSD为(咒一3)：知母皂
苷E。：101．36％，1．83％；知母皂苷B一Ⅱ：99．62％，
1．92％；知母皂苷B：102．71％，2．04％；知母皂苷A
Ⅲ：99．30％，2．36％。
2．9样品测定：分别吸取对照品及各供试品溶液
20止注入液色相谱仪，测定峰面积，用外标法计
算，色谱图见图1，结果见表3。
万方数据
·1576· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第10期2006年10月
知母皂苷B—II
B
6 。6．6 fl 知母皂苷III知母粤苷B 知母岂苷AI【1
0 5 10 15 20 25
t／min
图l 对照品(A)和供试品(B)HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramofreferences
substances(A)andsample(B)
表3不同产地知母中皂苷测定结果((n=3)
Table3 Determinationofsap insofA．asphode·
loidesfromvarioushabitats((厅一3)
历代本草指出知母主要分布区域为河北、陕西、
山西等黄河以北省区，道地药材产于山西沁县等地；
而现代研究表明知母分布于华北、西北、东北地区，
以河北易县所产为道地药材[8]。古今说法虽然有出
入，但其认为的道地药材的说法都在本实验中得到
验证。笔者前期的研究表明[6]，气候、土壤等环境条
件不同对知母的生长有着很大的影响，其形态特征
已发生分化产生种内变异，本研究结果提示，知母的
种内变异可能是其生药品质差异的重要因素之一。
知母皂苷B为知母皂苷B一Ⅱ变构产物，长时间
存放，可致知母皂苷B一Ⅱ转化为知母皂苷B。测定
结果表明，2003年采集的知母样品大多可测到知母
皂苷B，而在多数新采集的样品中未见；知母皂苷
B一Ⅱ量高的，长时间存放后知母皂苷B量也较高。
提示药材中知母皂苷B的量可能与知母皂苷B一Ⅱ
的量高低及贮存时间有关联，采收后中药的贮存条
件及时间也是非常重要的一个环节，会直接影响药
材的品质。
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万方数据
不同产地知母中皂苷类成分的测定
作者： 原源， 陈万生， 孙连娜， 郑水庆， 娄子洋， 张汉明
作者单位： 原源,孙连娜,郑水庆(第二军医大学药学院,上海,200433;第二军医大学,现代中药研究中心
,上海,200433)， 陈万生(第二军医大学附属长征医院,药学部,上海,200003;第二军医大学
,现代中药研究中心,上海,200433)， 娄子洋,张汉明(第二军医大学药学院,上海,200433)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(10)
被引用次数： 5次

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