全 文 ：中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs象38卷第4期2007年4月·617·
HPLC法测定侧金盏花中铃兰毒苷
刘 娟，崔向微
(佳木斯大学化学与药学院，黑龙江佳木斯 154007)
侧金盏花AdonisamurensisRegeletRadde为
毛茛科侧金盏花属植物，干燥全草入药，具有强心、
利尿、镇静作用。其主要有效成分为强心苷，强心苷
中单体成分铃兰毒苷又是研究较多、疗效较好的一
类成分。在我国侧金盏花主要分布于东北三省，为早
春特有植物。据文献报道花期中所含的强心苷量最
高，各地由于气候、土壤等条件影响，侧金盏花中所
含的强心苷量是否存在差异尚未见报道，因此在花
期采集了东北不同产地的侧金盏花进行铃兰毒苷的
测定，通过所得数据，可为其质量控制和评价提供基
础性资料。
1材料、仪器与试剂
1．1 材料：侧金盏花于2005年4月中旬分别采自
辽宁省千山地区、吉林省长白山地区、黑龙江省伊春
地区。经本校生药学教研室刘娟教授鉴定。
1．2 仪器与试剂：Agilent1100高效液相色谱仪，
G1314A紫外检测器，BP211DSartorius电子天平，
德国。铃兰毒苷对照品购自Sigma公司，甲醇为色
谱纯，乙醇、氯仿、磷酸为分析纯，水为蒸馏水。
2方法与结果
2．1色谱条件：色谱柱：C。。柱；流动相：甲醇一水一磷
酸(650：350：3)；体积流量：0．4mL／min；柱温：
30℃；检测波长：218nm；进样量：2弘L；在此条件下
铃兰毒苷的保留时间为5．0min，铃兰毒苷能与其
他成分很好地分开。色谱图见图1。
2．2对照品溶液的制备：精密称取铃兰毒苷对照品
1mg，加甲醇溶解并定容至10mL，作为对照品
溶液。
2．3供试品溶液的制备：精密称取药材干燥粉末5
g，放入95％乙醇25mL浸泡24h，反复共4次，抽
滤，合并滤液，减压浓缩至5mL，加入5mL蒸馏
水，放人冰箱中冷冻24h去胶，滤过。滤液用氯仿
10mL及氯仿一乙醇(1：1)10mL反复交替萃取，
直至水层对3，5-二硝基苯甲酸试液显阴性为止。合
并萃取液，减压蒸馏除去溶剂，加入甲醇5mL，溶
解，作为供试品溶液。
B
铃
兰
毒
苷
‰ ． ～
C
铃
兰
毒
苷
、～^
图1 铃兰毒苷(A)、侧金盏花地下部分(B)和地上部分(C)HPLC图
Fig．1HPLCChromatogramofconvallatoxin(A)，undergroundpart(B)andaerialpart(C)ofA·amurensis
2．4标准曲线的绘制：分别精密吸取铃兰毒苷对照 次进样，测其峰面积。计算其RSD为1·54％(竹一
品溶液1、2、3、4、5弘L进样测定，以峰面积(A)为5)。表明仪器重现性良好。
纵坐标(y)，迸样量(pg)为横坐标(X)，绘制标准2．7 稳定性试验：取同一质量浓度样品溶液在4、
曲线，得回归方程为Y一278．35X一1．43，r一8、12、24、48h进样测定，计算其RSD为1·12％
0．999。对照品在0．1～0．5Pg与峰面积呈线性 (咒一5)。表明样品溶液在48h内稳定性良好。
关系。
2．5 精密度试验：取同一对照品溶液连续进样5
次，测其峰面积，计算RSD为0．8％(行一5)，表明仪
器精密度很好。
2．6重现性试验：取同一浓度样品溶液重复提取5
收稿13期：2006—07—20
2．8加样回收率试验：精密称取6份已测铃兰毒苷
量的样品，分别精确加入铃兰毒苷对照品，按样品测
定项下方法操作。计算铃兰毒苷的平均回收率为
98．8％，RSD=1．1％(以=6)。
2．9样品测定：取3个不同产地的侧金盏花样品地
万方数据
·618· 中草菊ChineseTraditt’onalandHerbalDrugs第38卷第4期2007年4月
上、地下部分粉末分别制备供试品溶液，取2弘L进
样作HPLC分析，其测定结果见表1。
表1不同产地侧金盏花样品中铃兰毒苷(露一5)
Table1 DeterminationofconvallatoxinofA．amurensis
fromvariOUShabitats
3讨论
侧金盏花中强心苷量最高的时期为花期，因而
选取花期为特征性指标对不同地区的侧金盏花进行
测定。测定结果表明辽宁省千山地区侧金盏花中铃
兰毒苷的量略高于吉林省长白山地区，高于黑龙江
省伊春地区。由此可推断各地由于气候、土壤等地理
条件的不同，其有效成分的量也有较大差异。因此在
人工栽培时应考虑这些必要的因素，选择合适的栽
培地点，为高量药材的栽培提供有利的条件。同时本
实验也为选取道地药材、主产区等提供了科学依据。
中国东南部4种绞股蓝中黄酮成分的分析
王临涡，黄明珠
(浙江大学医学院附属第一医院，浙江杭州 310003)
绞股蓝Gynostemmapent phyllum(Thunb．)
Makino系葫芦科绞股蓝属草质藤本植物，产于亚
洲热带和东亚，我国主要分布于秦岭及长江以南15
个省，野生资源极为丰富。药理学研究证明，绞股蓝
具有明显的强壮作用和抗疲劳作用，延长细胞寿命，
调节血脂、降低血糖水平，增强肌体免疫等功能。
1976年，日本植物化学家竹本常松从甘茶蔓(甜昧
型绞股蓝G．pentaph3，llumSweet)中分析得到人
参含有的5种皂苷以来，在中国各地(主要在长江以
南各省)掀起了研究绞股蓝的热潮，研究工作做得尤
其多的是绞股蓝中皂苷和总苷的量。然而，对其中的
另一类活性成分黄酮却极少有人研究。在中国东南
部江苏、浙江、安徽、江西和福建等5个省，据研究调
查存在5种绞股蓝：绞股蓝G．pentaphyUum、小果
绞股蓝G．zhejiangenseX．J．Xue，sp．nOVL1J、白脉
绞股蓝G．pallidinerveZ．Zhang，sp．nOVL2]、喙果
绞股蓝G．yixingense(Z．P．Wang．etQ．Z．Xie)
C．Y．WuetS．K．Chen和疏花绞股蓝G．
1axiflDmmC．Y．WuetS．K．Chen。其中分布在
安徽的疏花绞股蓝现已无法找到。笔者对其他4种
绞股蓝的黄酮成分进行了检测，分析其差异。
1仪器与试样
日本岛津UV一3000紫外分光光度计。对照
品：芦丁(由中国药品生物制品检定所提供)。药材
来源：绞股蓝，采自浙江杭州龙井；小果绞股蓝，采自
浙江杭州玉皇山；白脉绞股蓝，采自浙江建德林科
所；喙果绞股蓝，采自浙江杭州赤山埠。4种绞股蓝
的原植物均由浙江大学薛祥骥教授鉴定。氯仿、甲
醇、丁酮试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1 对照品溶液的制备：精密称取于120℃干燥
至恒重的芦丁对照品6mg，置于100mL量瓶中，
加乙醇溶解、稀释至刻度，摇匀，即得质量浓度为
0．06mg／mL的芦丁对照品溶液。
2．2供试品溶液的制备：称取4种样品粗粉各约5
g，准确称定，分别置于索氏提取器中，用60％乙醇
加热回流提取3次(1．5、1、1h)，合并提取液，滤过
并回收乙醇至干，用少量热水溶解后，滤过并用乙醚
脱脂至醚层近无色，分取水层，蒸干水液，残渣用
95％乙醇溶解，滤过，于50mL量瓶中定容，摇匀，
即分别得绞股蓝、小果绞股蓝、白脉绞股蓝和喙果绞
股蓝供试品溶液。
2．3标准曲线绘制：精密吸取“2．1”项下对照品溶
液0．5、1．0、1．5、2．0、2．5mL，分别置于干燥试管
中，各加乙醇稀释至5．0mL(另取5．0mL乙醇液
为空白对照)，精密加入0．1mol／LA1C1。乙醇液
3．0mL及1mol／LKAc乙醇液5．0mL，摇匀，放
置40rain，滤过，滤液在420nm波长处测定吸光度
收稿日期：2006—07—10
作者简介：王临润(1963一)，男，浙江义乌市人，副主任药师，学士，从事医院药学、药物分析等科研工作。
Tel：(0571)87236531E—mail：linrunw@yahoo．corn．cn
万方数据
HPLC法测定侧金盏花中铃兰毒苷
作者： 刘娟， 崔向微
作者单位： 佳木斯大学化学与药学院,黑龙江,佳木斯,154007
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(4)
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