全 文 ：·1810· 中草嚼ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第12期2008年12月
方优选，有效减少了实验次数，同时根据优选条件制
备的涂膜剂用于治疗风湿疼痛、跌打损伤，无皮肤过
敏性，舒适度高，符合制剂预期释放要求。
目前，众多有关制剂的制备工艺优选报道中，多
仅选择制剂成型性指标作为测评指标，显然这不利
于制剂的内在质量控制。透皮给药系统研究中，药物
自高分子储库材料中溶出的多少、快慢更是质量控
制的关键。本实验将涂膜剂0．5、6、12h的累积溶出
率评分F。．5h、F。“、F12h作为控释涂膜剂质量的一个
量化指标，显然是必要的。
将均匀实验中各组配方的累积释药率用非溶蚀
型药物体系释放动力学0级模型进行拟合，通过获
得参数K。、口，对其比较分析，不仅得到了一个达到
预期释放目标的处方及其释放过程模型，以此作为
制剂生产过程中的质量控制指标，同时也为今后临
床需要选择相应的配方和模型奠定了基础。
参考文献：
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天花粉多糖的单糖组成和相对分子质量的测定
黄晓兰1，吴惠勤1，王蔚2，黄芳1，林晓珊1
(1．中国广州分析测试中心广东省化学危害应急检测技术重点实验室，广东广州 510070；
2．广州中一药业有限公司，广东广州 510000)
摘要：目的研究天花粉多糖的单糖组成、相对分子质量(Mr)及其分布。方法天花粉用超声波振荡提取、乙醇
沉淀分离出多糖，并用重结晶、色谱柱纯化后，采用气相色谱一质谱(GC—MS)、高效液相色谱(HPI，C)分析天花粉多
糖的单糖组成，用凝胶渗透色谱(GPC)分析天花粉多糖的Mr及其分布。结果天花粉多糖是由鼠李糖、阿拉伯糖、
果糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的杂多糖，经色谱柱纯化得到的天花粉多糖与未经纯化的天花粉粗多糖的单糖
组成相同，但质量分数有所差别；天花粉多糖的GPC图有两个多糖峰，天花粉粗多糖的两个GPC峰的数均相对分
子质量(Mn)分别为1．8×105和1460，天花粉多糖的两个GPC峰的Mn分别为1．60×105和4554。结论两种天
花粉多糖的Mr及单糖组成的质量分数有区别。
关键词：天花粉多糖；单糖组成；相对分子质量；HPI。C；GC—MS；GPC
中图分类号：R286．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)12—1810—03
天花粉又名栝楼，是葫芦科植物栝楼
TrichosantheskirilowiiMaxim．的干燥块根。天花粉
在增强机体免疫功能、抗肿瘤、抗艾滋病毒方面具有
很好的功效[1’2]。天花粉水提物得到的天花粉多糖具
有降血糖的活性[3]。天花粉与其他中药配伍组成的
药物，具有明显的降血糖功效n~6]。目前有关天花粉
多糖的成分分析研究很少文献报道[3’7]。笔者已对天
花粉多糖的提取、分离和纯化方法进行了研究[8]。本
实验进一步采用气相色谱一质谱(GC—MS)、高效液
相色谱(HPLC)、凝胶渗透色谱(GPC)对天花粉多
糖的单糖组成、相对分子质量(Mr)及其分布等进行
研究，对进一步探讨天花粉多糖的药理作用，以及天
花粉多糖的开发利用具有重要的意义。
1仪器与试剂
Agilent1100高效液相色谱仪，美国安捷伦公
司；Agilent6890GC／5973MS气相色谱／质谱联用
仪，美国安捷伦公司；721N型分光光度计，上海分析
仪器厂。
乙腈，Merck公司，HPI。C级；无水乙醇、丙酮、
KH。PO；等试剂，AR级；试验用水，Millipore超纯水。
2方法与结果
2．1 天花粉粗多糖提取与纯化[8]：取天花粉100g，
加入500mL水，45C浸提2h，再超声波振荡提取2
h，静置沉淀后，经真空抽滤得到提取液。清液于
收稿日期：2008—03—28 ·
基金项目：广东省科技计划资助项目(2006835605009)
作者简介：黄晓兰(1964一)，女，广东潮州人，研究员，主要从事药物及食品分析工作。Tel：(020)87686536E—mailzwenhxl@126．com
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第12期2008年12月· 811·
60℃水浴浓缩至100mL，加入无水乙醇400mI，使
乙醇的体积分数为80％，沉淀出多糖。用80％乙醇反
复洗涤沉淀，于60℃水浴烘干，得到天花粉粗多糖。
再经过SephadexG一50葡聚糖凝胶色谱柱进一步纯
化，收集第101～275mL淋洗液，于60C水浴烘干，
得到天花粉多糖。
2．2天花粉多糖的HPI。C分析
2．2．1多糖的水解：取500mg天花粉多糖，加入
2mol／LH2S0。38mL加热回流6h，冷却，用饱和
Ba(OH)。溶液中和至中性，滤过，清液浓缩定容至
10mL，进行HPLC法分析。
2．2．2色谱条件：KromasilNH2色谱柱(250mm×
4．6mm)；流动相为乙腈一水(80：20)；柱温为
45‘C；体积流量为1．2mL／min；示差折光检测器；
恒温45℃；进样量：20弘L。
2．2．3天花粉粗多糖的HPLC分析结果：天花粉多
糖水解后用高效液相色谱分析其单糖组成，并与单
糖对照品进行对照，色谱图见图1。结果表明，天花粉
多糖由鼠李糖、阿拉伯糖、果糖、葡萄糖、半乳糖组
成，其鼠李糖、阿拉伯糖、果糖、(葡萄糖+半乳糖)的
质量比例为5．1：25．5：31．3：27．5。
Z 4 6 8 lU
t／min
1一鼠李糖2一阿拉伯糖3一果糖4一葡萄糖5一半乳糖
1-rhamnose2-arabinose3-fructose4-glucose5-galactose
图1天花粉多糖的HPLC色谱图
Fig．1HPLCChromatogramofpolysaccharide
fromRadixTriehosanthis
2．3天花粉多糖的GC—MS分析
2．3．1多糖水解产物的乙酰化：取天花粉多糖水解
溶液，彻底蒸千水分，加入70mg盐酸羟胺，5mI。吡
啶，于90℃水浴加热1h；取出稍冷，加入5mL醋酸
酐，再于90C水浴加热1h；冷却，加10mL水破坏醋
酐，用氯仿萃取乙酰化产物，氯仿萃取液用水洗涤，
无水硫酸钠脱水，上清液通氮气浓缩定容至1mL，
进行GC—MS分析。
2．3．2 GC—MS条件：SE一30弹性石英毛细管柱
(15m×0．2mm×0．33／．Lm)；柱温初温100‘C，以
10℃／min程序升温至280‘C，保持10min；载气He，
柱前压70kPa，分流比10：1，溶剂延迟2min，进样
量1．0弘L。EI离子源，电子能量70eV，四极杆温度
150，c，离子源温度230℃，电子倍增器电压2300
V，GC—MS接口温度280‘C，质量扫描范围m／z
29～500。
2．3．3天花粉多糖的GC—MS分析结果：天花粉多
糖水解并乙酰化后用GC—MS分析其单糖组成，将单
糖对照品同时乙酰化进行对照。结果表明，天花粉多
糖主要是由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳
糖组成的杂多糖(图2)。由于果糖不能发生乙酰化反
应，故无法用GC—MS测定；而HPI。C图谱中由于甘
露糖与果糖分不开，未能测定出甘露糖。综合HPI。C
及GC—MS的分析结果，天花粉多糖的单糖组成为鼠
李糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖。采用
苯酚一硫酸分光光度法测定天花粉多糖的量[8]，结果
天花粉粗多糖和天花粉多糖质量分数分别为
58．8％、90．5％。其单糖组成的相对质量分数见表1。
6
10
t／min
1一鼠李糖2一阿拉伯糖3一木糖4一甘露糖5·葡萄糖6一半乳糖
1-rhamnose2-arabinose3-xylcose4-mannose5-glucose
6-galactose
图2天花粉多糖的GC—MS总离子流色谱图
Fig．2TIChromatogramofpolysaccharide
fromRadixTrichosanthis
表l天花粉多糖的单糖组成及质量分数
TableMOnosaccharidecompositionandrelativecontents
inpOlysaccharideofRadixTrichosanthis
质量分数／％
组成—1瓦丽再百———了瓦i历天花粉粗多糖 天花粉多糖
2．4天花粉多糖的GPC分析
2．4．1 GPC色谱条件：TSK—GELG3000SWXL
色谱柱(300mm×7．8mm)，柱温35℃；流动相：
0．05mol／LNaH2P04一Na2HPO。缓冲液(pH6．7，加
-III^¨¨iiijiiiiiiij¨H¨¨¨i【5●llR¨¨ni二i¨i¨¨UI_
万方数据
·1812· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第12期2008年12月
0．05％NaN。)；体积流量：0．5mL／min；示差折光检
测器，恒温35C；进样量：20肛L。
2．4．2 GPC校正曲线的建立：取Mr为738、
5800、1．22×104、2．37×104、4．8×104、1．0×105、
1．86×105、3．8×105、8．53×105的多糖对照品，用
0．05mol／LNaH2P04一Na2HP04缓冲液(pH6．7，加
0．05％NaN。)溶解，经0．45pm滤膜滤过，进行GPC
分析。已知Mr多糖对照品的相应保留时间见表2。以
多糖对照品的淋洗体积为横坐标，Mr为纵坐标做
GPC的校正曲线，见图3。
表2多糖对照品的保留时间
Table2 Retentionmeofpolysaccharides
referenceSUbstance
曩譬望翌 保留时间／。i。 要篓竺翌 保留时间／。i。分子质量⋯⋯“ 分子质量 ⋯⋯‘
738 22．6 1．0X105 12．3
5 800 20．1 1．86×105 11．9
1．22×104 18．3 3．8X105 11．7
2．37×104 16．3 8．53×105 11．7
4．8×104 13．8
嘲
但
№
求
霞
罂
淋洗体积／mL
图3多糖对照品的凝胶色谱校正曲线
Fig．3GPCCurveofpolysaccharidesrefer ncesubstance
2．4．3样品分析：取一定量的天花粉多糖样品，用
0．05mol／LNail2P0^一Na2HP04缓冲液(pH6．7，加
0．05％NaN。)溶解，经0．45肛m滤膜滤过，进行GPC
分析。根据样品的出峰时间在校正曲线上求得多糖
峰的平均Mr及其分布。根据峰面积归一化求得该
多糖的相对质量分数，结果见表3。天花粉粗多糖和
多糖的凝胶渗透色谱图见图4。结果表明天花粉粗多
糖有3个峰，第3个峰为溶剂及小分子杂质的混合
峰，前2个峰为多糖峰。峰1的保留时间为11～16
rain，Mr较大，数均相对分子质量(Mn)达1．81×
105，其质量分数为7．8％；峰2的保留时间为21．9
rain，Mr较小，数均分相对分子质量为1460，其质量
分数为45．3％。天花粉多糖也有3个峰，但第3个峰
即溶剂及小分子杂质峰仅少量残留，样品中大部分
为前2个多糖峰。峰1的保留时间为11～13rain，Mr
较大，Mn为1．60×105，其质量分数为12．6％；峰2
表3天花粉多糖的相对分子质量和质量分数
Table3 Molecularweightandcontentsi polysaccharide
ofRadiXTrichosanthis
样 品 峰保留时间／minMn Mw D质量分数／％
A
6
／’
0 lO
B
．√选
30 O lO
t|mln
图4天花粉粗多糖(A)和多糖(B)的凝胶色谱图
Fig．4GPChromatogramsofpolysaccharide
(A)，andpurifiedpoIysaccharide(B)
fromRadixTrichosanthis
的保留时间为19．8rain，Mr较小，Mn为4554，其质
量分数为78．9％。
3讨论
天花粉多糖主要是由鼠李糖、阿拉伯糖、果糖、
甘露糖、葡萄糖、半乳糖6种单糖组成的杂多糖，经
过SephadexG一50葡聚糖凝胶色谱柱纯化后得到的
天花粉多糖的单糖组成，与未经色谱纯化的天花粉
粗多糖相同，但质量分数有所差别；而天花粉多糖的
GPC谱图主要有两个多糖峰，天花粉粗多糖的两个
GPC峰的Mn分别为1．8l×105和146 ，天花粉粗
多糖的两个GPC峰的Mn分别为1．60×105和
4554。其功效有待进一步研究。
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万方数据
天花粉多糖的单糖组成和相对分子质量的测定
作者： 黄晓兰， 吴惠勤， 王蔚， 黄芳， 林晓珊
作者单位： 黄晓兰,吴惠勤,黄芳,林晓珊(中国广州分析测试中心,广东省化学危害应急检测技术重点实
验室,广东,广州,510070)， 王蔚(广州中一药业有限公司,广东,广州,510000)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(12)
被引用次数： 3次

参考文献(8条)
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2. 蔡皓.傅紫琴.李俊松.蔡宝昌.CAI Hao.FU Zi-qin.LI Jun-song.CAI Bao-chang 山药麸炒前后多糖成分的含量
及单糖组成研究[期刊论文]-南京中医药大学学报（自然科学版）2008,24(2)
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3.李爱峰.张永清 栝楼的化学成分研究进展[期刊论文]-安徽农业科学 2012(30)


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