全 文 :中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第8期2007年8月·1195·
荨麻根提取物中多糖的测定
朱永宁,杨爱岗,刘菁琰,李 帆,冯宝民,王永奇“
(大连大学药物研究所,辽宁大连 116622)
在德国、瑞士和美国等欧美国家,异株荨麻被广
泛用来治疗良性前列腺增生,而荨麻科植物在我国
也是常用的民间药和民族药口]。本课题组在对荨麻
科植物资源分布进行调查的基础上,采集了7种荨
麻科植物,以丙酸睾丸素引发的前列腺增生大鼠为
药理模型进行了体内活性筛选,结果发现裂叶荨麻
和滇藏荨麻根的稀醇提取物对去势大鼠前列腺腹侧
叶和背侧叶的增生具有显著的抑制作用瞳]。其多糖
成分是治疗前列腺肥大的主要活性成分之一[3“],基
于此,本实验对荨麻和滇藏荨麻根提取物中多糖进
行了测定。
1仪器、试剂和材料
UV--7230G型可见光分光光度仪,5%重蒸苯
酚溶液(使用前配制),其他试剂均为国产分析纯。荨
麻采自四川省金川县,滇藏荨麻采自四川I省盐源县,
由辽宁师范大学陈辰教授鉴定分别为荨麻科荨麻属
裂叶荨麻UrticafissaE.Pritz和滇藏荨麻U.
maireiLfvl。
2方法和结果
2.1提取物的制备:将样品粉碎成0.5ClTI的小段,
先用石油醚冷浸3次,每次24h,将用95%乙醇加
热回流提取3次,每次2h,再将剩余残渣用稀醇溶
液加热回流提取3次,每次2h,将提取液合并减压
浓缩得到提取物。提取物为多糖,经药理实验证明具
有抑制前列腺增生的作用。
2.2对照品溶液的制备:将葡萄糖对照品在105℃
下干燥至恒重,精密称取50.0mg,置于250mL量
瓶中,加蒸馏水至刻度。吸取5mL于25mL量瓶
中,加蒸馏水至刻度,得0.04mg/mL溶液,贮藏
备用。
2.3反应条件的选择[5]:取5份葡萄糖对照品溶
液,每份1.0mL,分别加入苯酚溶液2.0mL和浓
硫酸5.0mL,在20~100℃水浴反应30min,于
200~600nm波长扫描,结果最大吸收波长为490
nm,且在60℃水浴以上,吸光度值趋于稳定。取葡
萄糖对照品溶液1.0mL,加入苯酚溶液0.5~4.0
mL,加入浓硫酸5.0mI。,于490nm测定吸光度值,
当苯酚溶液的用量在2.0mL以上时,吸光度值趋于
稳定。精密移取葡萄糖对照品溶液1.0mL,加入苯
酚溶液2.0mI,,加入浓硫酸2.5~6.5mL,当浓硫
酸用量在4.0mL以上时,吸光度值趋于稳定。因此
显色反应的最佳条件为:1.0mL葡萄糖对照品溶液,
加入5%苯酚溶液2.0mL,浓硫酸4.0mL,60、C
水浴中反应30min,在490nm处测定吸光度值。
2.4标准曲线的绘制:分别取0.04mg/mL葡萄糖
对照品溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL于10mL
试管中,不足1.0mL的用蒸馏水补齐,向试管中分
别加入苯酚溶液2mL和浓硫酸4mL,静置5min,
然后于60_C水浴上放置30min,于490nm波长处
测定吸光度。以吸光度为纵坐标,质量浓度为横坐
标,绘制标准曲线,得回归方程A一0.0028C+
0.009,r一0.9997,线性范围:8.O~40.0ttg/mL。
2.5 回收率试验:于10mL试管中加入0.2mL待
测溶液(含多糖0.0234 mg)和0.2mL0.04
mg/mL葡萄糖对照品溶液,然后用水补足1.0mL,
以最佳反应条件处理,于490nm波长处测定吸光
度,代入回归方程计算,结果平均回收率为
101.80%,RSD为1.83%(,z一6)。
2.6样品的测定:精确称取适量荨麻根提取物冻干
粉各3份,蒸馏水溶解,4000r/min离心5min,上
清液定容于250mL量瓶,每份样品平行做6组,在
490nm处测定吸光度,代入回归方程计算多糖的质
量分数,结果见表1。
3讨论
硫酸一苯酚法测定多糖的重现性好,灵敏度高,
是一种简便,准确测定荨麻多糖的方法。结果显示荨
麻根提取物中多糖量大于20%。对于荨麻多糖的结
构测定以及其抑制前列腺增生的作用机制正在进一
收稿Et期:2006—11—17
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30572317)
*通讯作者王永奇Tel:(0411)87403834Fax:(0411)87403834E—mail:dalianwyq@163.corn
万方数据
·1196· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第8期2007年8月
表1荨麻根提取物中多糖的测定结果@一3)
Table1 Determinationofp0Iysaccharidesinextracts
ofRadixUrticaeroots(一一3)
步的研究中。
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HPLC法测定心可舒胶囊和心可舒片中丹酚酸B
魏惠珍1,黄周华1,崔金国2,黎
(1.中药固体制剂制造技术国家工程研究中心,江西南昌
心可舒制剂处方由山楂、丹参、葛根、三七、木香
组成,具有活血化瘀、行气止痛的功效,用于气滞血
瘀型冠心病引起的胸闷、心绞痛、高血压、头晕、头
痛、颈项疼痛及心律失常、高血脂等症。心可舒胶囊
和片剂分别被收载于《中华人民共和国卫生部药品
标准》中药成方制剂第15、16册,但在其质量标准中
均无定量测定项目。丹参是本处方中主药,其活性成
分丹酚酸B为主要的治疗心血管疾病的活性成分,
因此本实验参考《中国药典}2005年版一部丹参药
材项下丹酚酸B的测定方法对心可舒胶囊和片剂
中的丹酚酸B进行测定,结果准确,方法专属性强,
精密度高,重现性好,能更好地控制其质量。
1仪器、试剂和药品
日本岛津LC一10ATVP高效液相色谱仪,
SPD—M10AVP检测器,CLASS—VP色谱工作站。
■
莉2,饶毅1’,杨世林1
330006;2.江西中医学院,江西南昌330006)
乙腈为色谱纯,甲醇、磷酸为分析纯,水为超纯水,丹
酚酸B对照品(批号111562—200302,供定量测定
用)由中国药品生物制品检定所提供,心可舒胶囊由
山西德元堂药业有限公司提供,心可舒片由山东沃
华医药科技股份有限公司提供。
2方法和结果
2.1 色谱条件:色谱柱为ShimadzuShim—pack
Vp—ODS(250mm×4.6mm,5p-m);流动相:乙腈一
0.1%磷酸(24:76);体积流量:1.0mL/min;进样
量:10弘L;检测波长:286nm。色谱图见图1。
2.2 对照品溶液的制备:精密称取丹酚酸B对照品
适量,加75%甲醇制成0.154mg/mL的溶液,即得。
2.3供试品溶液的制备:取心可舒胶囊、心可舒片
各20粒或片,研细,取约1g,精密称定,分别置具塞
锥形瓶中,精密加入75%甲醇50mL,密塞,称定质
㈣c
Jo k~~I~
10 20 30 0 10 20 30 0 10 20 30 0 10 20
t/min
*一丹酚酸B
*一salvianolicacid
图1丹酚酸B对照品(A)、心可舒片(B)、心可舒胶囊(C)和阴性对照(D)的HPLC图谱
Fig.1HPLCChromatogramsofsalvianolicacidBreferencesubstance(A),XinkeshuTablets(B),
XinkeshuCapsula(C),andnegativesample(D)
收稿日期:2006—10—15
作者简介:魏惠珍(1965一),女,江西南昌人,副教授,主要从事中药质量控制研究工作。
Tel:(0791)7119651E—mail:weihuizhen101@126.corn
*通讯作者饶毅Tel:(0791)7119609E—mainraoyi99@126.eom
万方数据
荨麻根提取物中多糖的测定
作者: 朱永宁, 杨爱岗, 刘菁琰, 李帆, 冯宝民, 王永奇
作者单位: 大连大学药物研究所,辽宁,大连,116622
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2007,38(8)
被引用次数: 3次
参考文献(5条)
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-West China Journal of Pharmaceutical Science 2001(06)
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4. 潘明珠.周定国.PAN Ming-zhu.ZHOU Ding-guo 蓖麻秆化学组成及纤维形态研究[期刊论文]-纤维素科学与技术
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8. 张嫚丽.李作平.贾湘曼.ZHANG Man-li.LI Zuo-ping.JIA Xiang-man 麻叶荨麻化学成分研究[期刊论文]-天然产
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引证文献(3条)
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2.王坚.杨红杏.滕永真.袁佩.田睿.廖碧春 荨麻科植物化学成分研究中文文献概况[期刊论文]-中国民族民间医药
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3.吕晓超.冯宝民.于大永.史丽颖.王永奇 荨麻属植物研究最新进展[期刊论文]-大连大学学报 2012(3)
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