全 文 ：12槲皮素　22山柰酚　32异鼠李素
12quercetin　22kaempfero l　32iso rham netin
图 3　混合对照品 (A)和沙棘叶提取物
水解液 (B)的 HPLC 图谱
F ig1 3　HPLC chromatogram s of m ixed reference
substances (A) and TFH hydrolysate (B)
和非极性的黄酮母核, 使其总体显示弱极性, 但其又
具有酚羟基结构, 可以作为一个良好的氢键供体。而
FL 21 树脂是具有一定胺基和羰基含量的中极性高
比表面积吸附树脂, 酚羟基与羰基之间、与胺基均可
以形成专一性较高的氢键作用, 表面吸附的存在更
加强了这种作用, 正是由于这种多点协同吸附作用
导致了所得沙棘叶总黄酮的纯度大大提高。第二, 合
适洗脱剂的选择是其中另一个重要的原因, 树脂对
不同的物质的吸附作用力大小不同, 通过洗脱剂的
筛选将能够使吸附力不同的物质分开, 就 FL 21 树
脂对沙棘叶总黄酮的吸附而言, 具有弱碱性的吡啶
所得产物纯度最低, 产率最高, 说明吡啶对黄酮和杂
质均具有较高的洗脱率, 洗脱选择性较差; 醋酸乙酯
极性较小, 对黄酮和杂质成分的洗脱效果均较差; 甲
醇、乙醇和丙酮的极性较大, 在有效破坏氢键的同
时, 也能有效破坏黄酮苷元与树脂之间的物理吸附
力, 而对非极性的杂质洗脱效果较差, 从而起到选择
性洗脱的效果。考虑到经济和安全, 选择乙醇作为洗
脱剂最为理想。
　　从 FL 21 树脂对沙棘黄酮的吸附性能研究可以
看出, 每次处理沙棘叶质量与树脂的体积比为1∶2
较为理想, 70% 乙醇作为洗脱剂, 4 倍床体积则可以
基本完全洗脱。这也说明 FL 21 树脂对沙棘黄酮具
有良好的吸附洗脱性能。
References:
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补肾活血煎的絮凝工艺研究
沈　霞, 张文清, 夏　玮Ξ
(华东理工大学 化学系, 上海　200237)
摘　要: 目的　探讨壳聚糖絮凝法代替醇沉法用于补肾活血煎澄清工艺的可行性。方法　壳聚糖用于补肾活血煎
的澄清, 通过对总固形物、淫羊藿苷含量的测定, 对壳聚糖的用量、药液浓缩比进行了优选, 并与醇沉工艺进行了比
较。结果　壳聚糖絮凝法与醇沉法同样能使药液澄清, 在有效成分的保留上, 前者优于后者。结论　壳聚糖絮凝法
能代替醇沉法用于补肾活血煎的澄清工艺。
关键词: 补肾活血煎; 壳聚糖; 淫羊藿苷; 絮凝工艺
中图分类号: R 28412; R 286102　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 12 1351 04
Floccula tion procedure on Bushenhuoxue D ecoction
SH EN X ia, ZHAN G W en2qing, X IA W ei
(D epartm ent of Chem istry, East Ch ina U niversity of Science and T echno logy, Shanghai 200237, Ch ina)
Abstract: Object　To study the feasib ility of f loccu la t ion p rocedu re on Bu shenhuoxue D ecoct ion, u s2
ing ch ito san in stead of a lcoho l1M ethods　U sing ch ito san clarif ier to the floccu la t ion p rocedu re of Bu shen2
·1531·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 12 期 2004 年 12 月
Ξ 收稿日期: 2004202222
基金项目: 上海市教育基金会资助项目 (033)
作者简介: 沈　霞 (1980—) , 女, 上海人, 2002 年毕业于上海中医药大学中药学专业, 现就读于华东理工大学分析化学专业硕士研究生,
研究方向为中药制剂、中药质量标准的研究。T el: (021) 64253221　E2m ail: jo ice_ sx@ho tm ail1com
huoxue D ecoct ion; select ing the op t im um con ten t of ch ito san and the den sity of decoct ion acco rd ing to the
to ta l ex tract, and the con ten t of icariin, comparing w ith the floccu la t ion p rocedu re by alcoho l sedim en ta-
t ion1 Results　Ch ito san clarif ier cou ld m ake the decoct ion clarify as a lcoho l does1 O n the reta in ing of ac2
t ive compounds, the fo rm er w as bet ter than the la ter1 Conclusion 　Ch ito san can be u sed to the floccu la2
t ion p rocedu re of Bu shenhuoxue D ecoct ion in stead of a lcoho l1
Key words: Bu shenhuoxue D ecoct ion; ch ito san; icariin; f loccu la t ion p rocedu re
　　补肾活血煎系中国福利会国际和平妇幼保健院
的医院制剂, 是由淫羊藿、巴戟天、菟丝子、山茱萸等
9 味药组成的中药复方制剂, 具有温肾壮阳、补肝益
精、滋阴降火、活血化瘀、延缓衰老等功效, 临床上主
要用于男性更年期综合征。淫羊藿是本方的君药, 其
主要成分是黄酮类化合物 (淫羊藿苷、淫羊藿次苷)
和淫羊藿多糖, 其中总黄酮具有增加脑血流量和冠
脉流量、抗肿瘤、抗氧化和增强机体免疫力等功
能[1 ]。
　　前处理的过程是保留药材中有效成分并去除杂
质的过程, 是改变传统中药“粗、大、黑”的关键。原工
艺采用水提醇沉法, 但药材中的有效成分损失较多。
絮凝澄清法是在中药提取液中加入一种澄清剂, 以
吸附架桥和电中和方式除去溶液中的粗粒子, 以达
到分离纯化目的的一种方法。甲壳素类澄清剂是近
年来出现的新型絮凝剂, 用于中药制剂的除杂已有
报道[2 ] , 因其资源丰富、成本低、应用方便, 越来越受
到人们的重视。为了临床服用方便, 减少服用量, 根
据本方特点, 可改汤剂为颗粒剂, 本实验将壳聚糖作
为澄清剂对除杂工艺进行研究, 并从有效成分入手,
选择总固形物、淫羊藿苷含量为指标进行全面考察。
1　仪器和材料
A gilen t 1100 高效液相色谱仪,M et t ler A E240
电子天平, R—201 旋转蒸发器 (上海申科机械研究
所) , D K—S24 电热恒温水浴锅 (上海精宏实验设备
有限公司) , TL —500 台式离心机 (上海市离心机械
研究所)。壳聚糖 (上海伟康生物制品有限公司) , 淫
羊藿苷对照品 (批号: 07372200111, 中国药品生物制
品检定所) ; 所用药材均购自上海虹桥药业有限公司
中药饮片厂, 经上海市药品检验所吴赵云副研究员
鉴定, 均符合《中华人民共和国药典》2000 年版规
定; 乙腈为色谱纯, 其他试剂均为分析纯。
2　方法和结果
211　絮凝剂溶液的配制: 取壳聚糖 2 g, 加 1% 醋酸
液至 200 mL , 配成 1% 壳聚糖溶液。
212　水提液的制备: 按处方量称取淫羊藿、巴戟天、
菟丝子、山茱萸等 9 味药 (110 g) , 加 1 200 mL 水浸
泡 015 h, 加热至沸开始计时, 共提取 3 次, 其余 2 次
加水 1 000 mL , 每次煎 1 h。用 4 层纱布滤过, 合并
滤液。于 55 ℃真空浓缩至 2 倍总生药量 220 mL。按
《中华人民共和国药典》2000 年版一部附录测定相
对密度为 1107, 测得 pH 约为 415。
213　絮凝药液浓度的选择: 由文献[3 ]可知, 絮凝温
度在 60 ℃以上, pH 在 4～ 6 效果较好。取相同生药
量的药液 4 份, 各 25 mL , 分别浓缩至药材∶药液
(生药比 gömL ) 为 1∶1、1∶2、1∶4、1∶6, 预热至
60 ℃, 按表 1 加入 1% 壳聚糖溶液, 中速搅拌至出现
絮状沉淀, 倒入量筒静置 4 h。可见, 壳聚糖澄清剂
在药液中的加入量与药液所含的药材量有关, 且随
着药液的密度减少, 需加入的壳聚糖量有增大的趋
势。所以在 60 ℃下, 取药材∶药液为 1∶2 较为合
适。当药液温度、浓度和 pH 值固定后, 絮凝剂的加
入量则成为影响澄清的最主要因素。
表 1　药液澄清预试验结果
Table 1　Result of prel im inary test of clar if ica tion
药材∶药液
加入壳聚糖溶液的量ömL
3 6 12 18 24 30
1∶1 Ε ± < < Ε Ε
1∶2 Ε < < < ± Ε
1∶4 Ε Ε < < < ±
1∶6 Ε Ε ± ± < <
　　“< ”表示澄清, 　“Ε ”表示混浊, 　“±”表示介于两者之间
　　“< ”m eans clarification, 　“Ε ”indicates tu rb idity, and“±”is
betw een fo rm er two
214　淫羊藿苷的测定
21411　色谱条件: 色谱柱: H ypersil OD S 色谱柱
( 100 mm ×416 mm , 5 Λm ) ; 流动相: 乙腈2水 (25∶
75) ; 检测波长: 270 nm ; 柱温: 室温; 体积流量: 110
mL öm in。理论塔板数按淫羊藿苷计为5 597。数据处
理定量方法为外标峰面积测定法。采用上述色谱条
件, 与淫羊藿缺味空白样品对照, 方中的其他药物不
干扰淫羊藿苷的测定。淫羊藿苷保留时间约 8 m in。
21412　标准曲线的制备: 精密称取 105 ℃干燥至恒
重的淫羊藿苷对照品 412 m g, 置 25 mL 量瓶中, 加
甲醇溶解并稀释至刻度, 摇匀, 即得。分别精密吸取
110、210、310、410 mL 置 10 mL 量瓶, 用甲醇稀释
·2531· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 12 期 2004 年 12 月
至刻度, 摇匀, 分别精密吸取 5 ΛL , 按上述色谱条件
进行测定。以峰面积为纵坐标 Y , 淫羊藿苷质量浓度
为横坐标X (m gömL ) , 绘制标准曲线, 得回归方程:
Y = 4 9891550 5 X + 21028 5, r= 01999 98。表明淫
羊藿苷在 01016 8～ 01168 m gömL 与峰面积线性关
系良好。
21413　测定: 将 216 项 5 000 röm in 离心 10 m in,
取上清液置 50 mL 量瓶, 加蒸馏水至刻度, 摇匀。取
5 mL 药液置 10 mL 量瓶, 加蒸馏水至刻度, 进样 5ΛL 测定。
215　固形物得率测定: 取定容后的药液 25 mL , 置
干燥至恒重的蒸发皿中, 水浴蒸干, 烘箱 105 ℃干燥
至恒重, 称质量, 按下式计算固形物得率。
　　固形物得率= 固体物质量×煎液体积供试液体积×药材质量×100%
216　絮凝剂用量考察: 取浓缩至 1∶2 的药液 25
mL 9 份, 预热至 60 ℃, 中速搅拌下按表 2 加入 1%
壳聚糖絮凝液, 搅拌 10 m in, 转移至 50 mL 量筒, 静
置 4 h 后观察。结果见表 2。可见, 从上层液澄清度
来看, 加入量从 8～ 12 mL 都在澄清范围内, 其中 7
号加入量为 12 mL 时淫羊藿苷含量最高。而从固形
物得率来看, 6 号加入量为 10 mL 时最低, 但其含量
较低。比较两者的得率相差不大, 故综合考虑, 壳聚
糖絮凝剂的加入量为 12 mL 为宜, 即每 100 mL 药
液, 壳聚糖的用量为 0148 g。
表 2　壳聚糖絮凝结果
Table 2　Result of ch itosan f locculation
N o1 加入量ömL 上层液 絮体描述 药液颜色 淫羊藿苷ö% 固形物得率ö%
1 0 混　浊 无 棕　黑 01423 37103
2 2 混　浊 细颗粒 棕　黑 01367 26173
3 4 较混浊 细颗粒 棕　黑 01346 28114
4 6 澄　清 松絮状 棕　黑 01359 26170
5 8 澄　清 紧絮状 浅棕黑 01330 25198
6 10 澄　清 絮　状 浅棕黑 01306 23110
7 12 澄　清 松絮状 棕　色 01334 24102
8 14 较澄清 松絮状 棕　色 01281 28177
9 16 较澄清 松絮状 棕　色 01265 32152
217　醇沉与絮凝工艺比较: 取药液 25 mL 加无水
乙醇 58 mL 使含醇量达 70% , 快加慢搅, 静置过夜,
滤过。按此法处理 2 份, 一份将滤液浓缩至 25 mL ,
取 5 mL 于 10 mL 量瓶中, 加蒸馏水至刻度, 滤过,
取续滤液采用H PL C 测定淫羊藿苷, 另一份测定固
形物得率。结果见表 3。
　　各取相同药液 25 mL 12 份, 加 110% 的絮凝剂
12 mL , 中速搅拌 10 m in, 转移至量筒, 静置过夜,
5 000 röm in 离心 10 m in。取上清液转移至 50 mL
量瓶, 加蒸馏水至刻度, 取一份测定固形物得率, 另
一份同上法处理进行含量测定。结果见表 3。
　　醇沉造成了较多有效成分的损失, 并且醇沉的
沉降时间较长, 增加了生产周期, 不利于生产效率的
提高, 而且工业生产中还存在着乙醇回收等问题导
致成本较高。而采用壳聚糖的吸附澄清技术, 不但除
杂效果好, 沉降速度快, 而且处理后的药液有效成分
的含量也较高, 而且壳聚糖为天然有机高分子化合
物, 无毒无味。另外采用壳聚糖精制中药提取液不需
要任何特殊设备, 只须加入壳聚糖处理即可, 所以成
本上也较醇沉法低。
表 3　醇沉与壳聚糖絮凝的比较
Table 3　Compar ison of a lcohol sed imen tation
and ch itosan f locculation procedure
项　目 醇　沉 絮　凝
　絮体出现　 立即出现 立即出现
　絮体状态　 棉絮状　 絮状　　
　澄清度　　 澄清　　 澄清　　
　滤过速度　 快　　　 快　　　
　淫羊藿苷ö% 2193 3118
　得膏率ö% 　 26132 22170
3　讨论
311　进行淫羊藿苷H PL C 含量测定时采用乙腈2水
(25∶75) 为流动相, 无论从峰的理论塔板数和分离
度来看均较为理想。
312　影响絮凝澄清工艺的因素有很多, 其中药液浓
缩比例、壳聚糖加入量、温度、药液 pH 是主要影响
因素。本实验主要考察了药液浓缩比和壳聚糖加入
量, 并以淫羊藿苷的含量与固形物得率为指标进行
工艺优选。
313　由实验可见, 随着絮凝剂加入量增大, 药液由
浑浊变澄清, 当加入量为 8～ 12 mL 时药液的澄清
效果最好。而在加入量为 8～ 12 mL 时药液中有效
成分的含量较高, 得膏率较低, 但当絮凝剂加入量过
大时, 体系的浊度上升, 药液中有效成分含量降低,
得膏率上升, 造成絮凝恶化。选择絮凝剂加入量为
12 mL 时, 药液不但澄明情况好, 而且沉淀呈松絮
状, 易滤过。在工业生产中有利于缩短生产周期, 提
高生产效率。因此选择絮凝剂加入量为 12 mL 作为
精制药液的最佳絮凝剂加入量, 即每 100 mL 药液,
壳聚糖的用量为 0148 g。
314　经优选的壳聚糖澄清工艺处理样品含量比醇
沉法高, 但两者都低于未处理样品。絮凝工艺的转移
率比醇沉法高, 且壳聚糖絮凝工艺方便, 生产周期
短, 成本低, 有效成分保留率高, 稳定性好, 故壳聚糖
絮凝法可代替醇沉法制备补肾活血颗粒剂。
·3531·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 12 期 2004 年 12 月
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五虎散质量标准的研究
毛彦杰1, 岳　敏1, 谷学新13 , 范国强2, 段豫萍2, 秦　晨2Ξ
(11 首都师范大学 化学系, 北京　100037; 21 北京同仁堂股份有限公司 科学研究所, 北京　100011)
摘　要: 目的　建立五虎散的质量标准。方法　采用 TL C 法对处方中当归、白芷、红花进行定性鉴别; 采用 H PL C
法测定升麻苷和 52O 2甲基维斯阿米醇苷的含量。结果　升麻苷在 01370 0～ 11850 0 Λg, 52O 2甲基维斯阿米醇苷在
01191 0～ 01955 0 Λg 与峰面积具有良好的线性关系; 平均回收率分别为 100174% 和 98133% , R SD 分别为 0167%
和 1191% (n= 5)。结论　建立的方法简便、准确、可靠, 可作为控制该药品的质量标准。
关键词: 五虎散; 升麻苷; 52O 2甲基维斯阿米醇苷; 质量标准; 高效液相色谱
中图分类号: R 286102　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 12 1354 03
Qua l ity standard of W uhu Powder
M AO Yan2jie1, YU E M in1, GU Xue2x in1, FAN Guo2qiang2, DUAN Yu2p ing2, Q IN Chen2
(11 D epartm ent of Chem istry, Cap ita l N o rm al U niversity, Beijing 100037, Ch ina; 21 Scien tific R esearch
Inst itu te of Beijing Tong R en T ang Co. , L td. , Beijing 100011, Ch ina)
Abstract: Object　To estab lish the quality standard fo r W uhu Pow der. M ethods　R ad ix A ng elicae
S inensis (RA S) , R ad ix A ng elicae D ahu ricae (RAD ) , and F los Ca rtham i (FC ) w ere determ ined qualita2
t ively by TL C. T he con ten t of cim icifugo side and 52O 2m ethylvisamm io side w ere determ ined by H PL C. Re2
sults　T he linear ranges of cim icifugo side and 52O 2m ethylvisamm io side w ere 01370 0—11850 0 Λg and
01191 0—01955 0 Λg1 T he recoveries w ere 100174% and 98133% , R SD w ere 0167% and 1191% (n= 5) ,
respect ively. Conclusion 　T he m ethod is simp le, accu ra te, cred ib ility, w h ich can be u sed as the quality
con tro l standard of W uhu Pow der.
Key words: W uhu Pow der (a Ch inese p rescrip t ion compo sed of FC, RA S, and RAD , etc. ) ; cim icifu2
go side; 52O 2m ethylvisamm io side; quality standard; H PL C
　　由红花、当归、白芷等药材配伍而成的五虎散是
一种具有活血散瘀、消肿止痛等功效的中药, 用于跌
打损伤, 瘀血肿痛的治疗[1 ]。防风中的升麻苷和 52
O 2甲基维斯阿米醇苷具有较好的解热、镇痛、抗炎
消肿等生理活性[2 ]。为了有效地控制五虎散的质量,
本实验采用高效液相色谱法对处方中的升麻苷和
52O 2甲基维斯阿米醇苷进行测定, 并对当归、白芷、
红花进行了薄层鉴别, 结果令人满意。
1　仪器与材料
W aters 高效液相色谱仪 (W aters515 高压泵,
W aters515 柱温箱, W aters717 自动进样器, W a2
ters2996 检测器)。
　　当归对照药材 (批号: 9272200110)、白芷对照药
材 (批号: 94529903)、红花对照药材 (批号: 9072
200006)、欧前胡素对照品 (批号: 08262200206)、异
欧前胡素对照品 (批号: 08272200105)、升麻苷对照
品 (批号: 15222200001, 含量测定用) 和 52O 2甲基维
斯阿米醇苷对照品 (批号: 15232200001, 含量测定
用)购于中国药品生物制品检定所。五虎散由北京同
仁堂股份有限公司制药厂生产, 批号为 3100024、
3100025。甲醇为色谱级试剂, 其他试剂均为分析纯。
2　实验方法
211　薄层色谱鉴别
21111　当归、白芷的鉴别: 取五虎散 3 g, 加无水乙
·4531· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 12 期 2004 年 12 月
Ξ 收稿日期: 2004202215
作者简介: 毛彦杰 (1977—) , 男, 河北省张家口市人, 首都师范大学分析化学专业研究生, 从事中草药分析。3 通讯作者　E2m ail: Guxuex in@ 263. net