全 文 ：·1724· 中草药ChiaeseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月
化)，1996(1)：20—23
[2]TheC ineseCrudeDrugsCompany．ResourceIntroductionof
ChineseMedicinalMaterialsnChina(中国中药资源志要)
[M]．Beijing：SciencePress，1994．
[3]HuangJM，Comparethed terminationme h dsfcoumarin
inMeliloCusfyici”alisextractionandxiaotuozhi[J]．Tradit
ChinDrugResClinPharmac“(中药新药与临床药理)t
1997，8(1)z36—38．
RP—HPLC法测定不同时期垂柳中木犀草素一7-0一p一口吡喃葡萄糖苷
刘可越1，高文远”，张铁军2，郑教男3，陈海霞1
j
(1，天津大学药学院，天津300072}2．天津药物研究院中药现代部，天津300193
3．吉林农业大学中药材学院，吉林长春130118)
垂柳SalixbabylonicaL．为杨柳科柳属植物，
《中药大辞典》将垂柳的叶、枝和柳絮收载为中药“3。
《本草纲目》中有记载：柳为本经下品，其性寒、味微
苦，具有祛风、利尿、止痛、消肿的功能，可用于治疗
风湿痹痛、淋病、白浊、水肿等症01。现代临床上用于
治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病、慢性气管炎、烧烫
伤“]。据报道，柳叶中含有丰富的黄酮类化合物o]，
其次是酚糖苷类化合物Ⅱ“]，还有多糖”’3]、有机
酸03等其他化合物，其中大多数柳树中均含有木犀
草素及其糖苷o]，其中木犀草素一7一O-O-D一吡喃葡萄
糖苷具有多种药理活性，如抗生物氧化“⋯、抗炎、止
痉、抗组胺的作用“”，以及抗癌、抗辐射等诸多生物
活性o“。鉴于此，笔者对垂柳中的木犀草素一7—0_p
D一毗喃葡萄糖苷进行定量分析，建立了RP—HPLC
法测定其量，并对比了其在不同采收期叶片、枝条及
柳絮中的量，以确定利用此化合物的最佳采收期及
采收部位，为进一步开发垂柳的药用资源提供理论
依据。
1仪器与材料
Agilent1100高效液相色谱仪；G1314A(VwD
检测器)；Agilent1100化学工作站。
木犀草素一7—0一pD一吡哺葡萄糖苷对照品(中国
药品生物制品检验所，质量分数99％)}经改造微波
炉(KJ25一BA)广州顺德美的微波炉制造；离心机
(LCl0—2．4A)jg京医用离心机厂；垂柳(由吉林农业
大学刘霞教授鉴定)叶片、枝条(从2003—5一12～
2003。10—12，每隔15d采样一次，5、10月分别为东
北地区垂柳刚发叶和落叶时期)、柳絮(2003—5—12)
采于吉林农业大学中草药苗圃2年生垂柳；甲醇、醋
酸均为色谱纯。
譬嚣景箨尹高矍嚣
2方法与结果
2．1 色谱条件：流动相：甲醇一水一醋酸(57．5；
42．5：0．5)}柱温：30℃；体积流量0．8mL／minI
AgilentC8高效液相色谱分析柱(150mitt×4．6
mm，5”m)；检测波长：254nm；进样量10pL。色谱
图见图1。
t
L沁
0 5 10 15 0 5 10 15
t／nfin
圈l术犀草素一7一D一}肛吡啊葡萄糖苷对照品(A)和
垂柳群提物(B)的HPLC圈谱
Fig．1HPLCchromatogramsfluteolin一7．D-B_D-
glucopyranoslde(A)andethanolextr ct
ofS．babylonica(B)
2．2供试品溶液的制备：精密称取粉碎过40目筛
的不同生长时期的垂柳叶片、枝条及柳絮各2g左
右，用滤纸包成小包，以70％乙醇为溶剂浸泡10
mln，在改造后的微波炉(设定功率2000w)中提取
40rain，减压回收溶液，挥干溶剂。用甲醇一水(1：1)
溶解残渣，离心，沉淀洗涤3次，合并上清液。取上清
液于50mL量瓶中，加甲醇一水(1t )至刻度，分别
取此液2mL于lOmL量瓶中，加甲醇一水(1：1)至
刻度，微孔滤膜滤过，备用分析。
2．3对照品溶液的制备：精密称定木犀草素一7一O—
pD一吡喃葡萄糖苷对照品约20mg，于100mL量瓶
中加甲醇一水(1t 1)适量，超声10rain使溶解，放
冷，加甲醇一水(1t 1)稀释至刻度，精密量取4mL
万方数据
中草药ChineseTraditionala／adHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月· 725·
至20mL量瓶中，用甲醇一水(1：1)稀释至刻度，摇
匀，即得。
2．4 线性关系考察：分别精密吸取对照品溶液
0．05、0．1、0．2、0．4、0．6、0．8、1．0mL，于5mI，量瓶
中加甲醇一水(1：1)稀释至刻度，各吸取lo止进
样，以质量浓度为横坐标，蜂面积为纵坐标，绘制标
准曲线，得回归方程：Y；12621X一14．557，r=
0．9997；结果表明：木犀草素一7一O一}D_-吡喃葡萄糖
苷在为2～40pg与峰面积成良好的线性关系。
2．5精密度试验：精密称取同批垂柳叶粉末约2g，
按样品测定方法操作，连续进样6次。每次进样20
“L，以木犀草素一7—0一争D一毗喃葡萄糖苷面积积分值
计算，RSD为0．88％。
2．6稳定性试验：精密吸取同一供试品液，分别放
置0、5、9、24、36、48h进样，测定木犀草素一7—0一p
D一吡哺葡萄糖苷，RSD为0．92％。
2．7重现性试验：取同一批垂柳叶6份，分别按供
试品溶液制备项下操作制备供试品溶液，测定本犀
草索，7一。-_B_D．毗哺葡萄糖苷，结果RSD为0．83％
“=6)。
2．8回收率试验：采用加样回收率法。精密称定已
知术犀草素一7一。一pD一吡哺葡萄糖苷量的垂柳叶粉
末约2g，精密加入1mg／mL的木犀草索一7—0-pD一
吡喃葡萄糖苷对照品，按供试品溶液制备法制备，并
按上述色谱条件测试，结果平均回收率为99．93％，
RSD为1．2％(”一6)。
2．9样品测定：每份供试品进样10止，按照上述
色谱条件测定木犀草索一7-0一争D一吡喃葡萄糖苷的
量，结果见表1。
裹1不同时期垂柳中本犀草素一7-0一p—D一毗哺葡萄糖苷
测定结果“=3)
Table1 Luteollnof7．D-p-D-glucopyranosideIns．
babylonieaatdifferenttimes(n=3)
采样日期
术犀草素一7一O一}D一毗喃葡萄糖苷／贿
叶片 枝条 柳絮
3讨论
3．1 试验中采用微波萃取技术对供试品进行前处
理，对该提取方法的乙醇体积分数及萃取时间进行
了正交考察，确定以70％乙醇为溶媒，萃取40min
时木犀草素一7一。一pD一吡喃葡萄糖苷测定值最高，此
法效率高，简便易行。
3．2检测波长的选择：取木犀草素一7一口}D一毗哺葡
萄糖苷对照品适量，用甲醇一水(1：1)制成含木犀草
素一7—0一}D一吡喃葡萄糖苷25,ug／mL的溶液，紫外
分光光度计于200～400nm扫描，在254am处有最
大吸收，以254nm作为检测波长，进行高效液相色
谱分析时，其他组分对木犀草素一7—0一肛D一吡哺葡萄
糖苷的测定无干扰，故选定检测波长为254am。
3．3流动相的选择：曾对不同配比的甲醇一水，乙
腈一水，甲醇一水一醋酸等流动相及体积流量进行考
察，结果表明使用甲醇一水，乙腈一水色谱峰未达基线
分离，加入0．5％醋酸后，体积流量0．8mL／min，效
果有很大改善，色谱峰基线分离较好。
3．4研究发现5月12日垂柳叶中木犀草素一7—0一
}D一毗喃葡萄糖苷量最高，单体量即可达到
0．7214％，鉴于木犀草素一7一o-pD一吡哺葡萄糖苷
的丰富的药理活性，可对垂柳叶进行药用开发，也可
考虑作为提取木犀草素一7一O—p—D一毗喃葡萄糖苷的
一种植物材料进行大量栽培，最佳采收期在嫩叶时
期。叶片中的木犀草素一7一。一pD一吡哺葡萄糖苷量均
高于柳枝和柳絮，所以利用木犀草素一7～o-pD一毗喃
葡萄糖苷的最佳药用部位为柳叶。
References：
[1]JmagsuNewMedicalCo lege．Dicti删aryofChineseMateria
Medica(中药大辞典)[M]Shanghai：ShanghaiScientific
andTechnicalPublishers，1986．
[2]LiSz．CompendiumofHerbal(本草纲目)[M]．Beijing：
People’sMedicalPuhlishitagHouse，1982-
[3]ThapiiyalRP．IsmalliH．FattyacidsandflavonoidsofSalix
linleyana[J]．Phamacol，1993，91(2)：165—166．
E4]SumioS，WagnerH．HarhorneJB，etal·Studiesofsalire—
poride[J]．BulllnstP母5CheraRes，1993tZ8{867—871．
[s]FukujiroF，CastledineRM．StructureofsalireporideEJ]．
PharmSoc，1947，67：121—128．
Es]KhatoonF，ChoppinJ．Phenolicg y osidesfromSatixbaby-
lonicaL．EJ]．Phytochemistry．1988，27(9)：3010—3011．
[7]TomanR，WilliamsCA，NesamelyiA．Polysaehafidesfrom
theharko{thewhitewillow(SatixatbaL．)structureofa
galactan[J]．BiolChem，1972，25(2)；371—378．
[8]TomanR，ChariVM，MarkhamKRtetat．Polysacharides
fromthebarkofthewhitewillow(SatixalbaL．)stracture
ofaxylaI Celiul口]ChemTechnol，1973，7(4)：351—
357．
[9]BeckerH，ChoppinmJ，BouillantM·etat．Comparative
studiesofflavonoldsanphenylcarboxylicacidofmistletoes
fromdifferenthos reeB[J]．Phyt叫hemistry，1980，97(5)：
417—428．
r10]LuYR，WangQL，LiuXY，etat．Antioxidantact vit esof
万方数据
·1726· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第1i期2005午11月
polyphenolstromsage[J]．FoodChemt2001，75(2)ll 97—
202．
E11]KhimiyaR，KafukuKtI-lataC．Investigationofchemica[
compositionofAlcheatillavulg ris[J]-B埘Chem，2000t66
(2)f79—85．
Ea23RichardF，CollinsFW，NagaseM-Studiesonoharmologb
calactivitiesofluteolinglucoside[J]．JNatProd，1992，59
(7)t970—973．
反相离子对色谱法测定黄杨木中环维黄杨星D
谢昀1，于治国”，徐新盛2，文艳秋2
(1．沈阳药科大学药学院，辽宁沈阳110016；2．北京中丰天恒医药技术开发有限公司，北京100012)
黄杨木是黄杨科植物小叶黄杨Buxusmicro-
phfllaSieb．etZucc．var．sinicaRehd．etWils．的
茎枝，明代《本草纲目》中已有记载。黄杨木粉是治疗
心血管病的有效药物，其主要活性成分为甾体生物
碱环维黄杨星D(cyclovirobuxiumD)，具有行气活
血、通络止痛之功效。目前，环维黄杨星D已从黄杨
木及其同属植物中提取分离“]，并与其制剂黄杨宁
片一起收载于《中国药典／(2005年版)。黄杨木中环
维黄杨星D的测定，目前尚无文献报道。本实验建
立了一种反相离子对液相色谱法，测定了黄杨木中
环维黄杨星D的量。
1仪器、试剂与材料
岛津LC一10ATvp液相色谱仪，岛津SPD一
10Avp紫外检测器，Anastar色谱工作站，DT一100
光电天平。环维黄杨星D对照品(质量分数99．o％，
HPLC—MS归一化法标定，北京中丰天恒医药技术
开发有限公司提供)；黄杨木(购自浙江，经沈阳药科
大学生药鉴定教研室孙启时教授鉴定){十二烷基硫
酸钠(AerosOrganics，Belgium公司)；磷酸、三乙
胺、氨水、氯仿均为分析纯(北京化工厂)；甲醇、乙腈
均为色谱纯(Merk公司)，水(为二次蒸溜水)。
2方法与结果
2．1色谱条件：色谱柱：ApolloC18柱(250mm×
4．6mm，5pm，美国奥泰公司)；流动相：0．005mol／
L十二烷基硫酸钠溶液(内含0．15％三乙胺，磷酸
调节pH值至3．10)一乙腈(54：46)；体积流量：1．0
mI。／min；检测波长：203nm；柱温：45℃；进样量：
20儿。在此色谱条件下，对照品与样品的色谱图
见图1。
2．2对照品溶液的制备：取环维黄杨星D对照品
约60mg，精密称定，置50mL量瓶中，用流动相溶
收稿日期{2005—02一ll
*通讯作者于治国
f／rain
*环维黄扬星D
*一eyclovirobuxiumD
圈1环维黄杨墨D对照品(A)和黄杨木(B)的HPLC图谱
Fig．1HPLCchromatogramsfcyclovlrobuxhm
D(A)andbranchofB．microphflla
解并稀释至刻度，摇匀，得1．2mg／mL的对照品储
备液。精密吸取对照品储备液2．0ml，，于10mL量
瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得0．24rag／
mL对照品溶液。
2．3供试品溶液的制备：取黄杨木粗粉约5．0g，精
密称定，置250mL圆底烧瓶中，加浓氨水5mL，拌
匀，静置30min。精密加入氯仿i00mL，精密称定，
水浴加热回流3h，放冷，精密称定，用氯仿补足质
量。滤过，精密吸取续滤液50mL，水浴蒸干，残渣用
0．5％醋酸溶液i0mL溶解后，稀氨水调节pH值至
7．0，分别用氯仿10mL、醋酸乙酯8mL萃取，分离
收集水相，水浴蒸干，残渣用流动相溶解并转移至
10mL量瓶中，流动相稀释至刻度，摇匀，0．45pm
微孔滤膜滤过，即得。
2．4线性范围考察：分别精密吸取对照品储备液
(1．2mg／mL)0．5、1．0、2．0、3．0、4．0和5．0mL置
10mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀；进样20
止，以峰面积为纵坐标(y)，质量浓度(mg／mL)为
横坐标(x)，用最小二乘法计算，得线性方程为：】，一
9．09×10sX+8．29×103b一0．9993)，环维黄杨星
D在0．062～0．62mg／mL与峰面积呈良好的线性
关系。
一
万方数据
RP-HPLC法测定不同时期垂柳中木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄
糖苷
作者： 刘可越， 高文远， 张铁军， 郑毅男， 陈海霞
作者单位： 刘可越,高文远,陈海霞(天津大学药学院,天津,300072)， 张铁军(天津药物研究院,中药现
代部,天津,300193)， 郑毅男(吉林农业大学中药材学院,吉林,长春,130118)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(11)

参考文献(12条)
1.Jiangsu New Medical College 中药大辞典 1986
2.Li S Z 本草纲目 1982
3.Thapliyal R P;Ismalli H Fatty acids and flavonoids of Salix linleyana 1993(02)
4.Sumio S;Wagner H;Harborne J B Studies of salireporide 1993
5.Fukujiro F;Castledine R M Structure of salireporide 1947
6.Khatoon F;Choppin J Phenolic glycosides from Salix babylonica L[外文期刊] 1988(09)
7.Toman R;Williams C A;Nesamelyi A Polysacharides from the bark of the white willow (Salix alba L.)
structure of a galactan 1972(02)
8.Toman R;Chari V M;Markham K R Polysacharides from the bark of the white willow (Salix alba L.)
structure of a xyla Ⅱ Cellul 1973(04)
9.Becker H;Choppinm J;Bouillant M Comparative studies of flavonoids and phenylcarboxylic acid of
mistletoes from different host trees 1980(05)
10.Lu Y R;Wang Q L;Liu X Y Antioxidant activities of polyphenols from sage[外文期刊] 2001(02)
11.Khimiya R;Kafuku K;Hata C Investigation of chemical composition of Alchemilla vulgaris 2000(02)
12.Richard F;Collins F W;Nagase M Studies on pharmological activities of luteolin glucoside[外文期刊
] 1992(07)

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1. 刘文.梁念慈.黄仁彬.LIU Wen.LIANG Nian-ci.HUANG Ren-bin 三种黄酮类化合物对重组人肌醇磷脂3-激酶
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2. 齐荔红.康鲁平.张俊平.刘福堂.周俭平.周斌 染料木素和槲皮素对成纤维细胞增殖和胶原合成的抑制作用[期刊
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3. 王正文.朱明才.汤为学.龚军.范维珂.魏锦来.崔海宁.WANG Zheng-wen.ZHU Ming-cai.TANG Wei-xue.GONG Jun.
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