全 文 ：本实验证实了西红花苷对过氧化氢所致内皮细
胞凋亡有保护作用, 但其对基因表达或调控的影响
还有待进一步研究。
参考文献:
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一种真菌菌丝体甲醇提取物—A7 的抗肿瘤活性研究
逯海燕1 ,郭顺星1
,林　晨2 ,张雪艳2,付　明2,梁　肖2,于能江1
( 1. 中国医学科学院 中国协和医科大学药用植物研究所, 北京　100094; 2. 中国医学科学院 中国协和医科大学肿瘤研究所,
北京　100021)
摘　要: 目的　研究一种真菌菌丝体甲醇提取物—A7 的抗肿瘤活性。方法　M TT 法观察 A7 对人 BEL-7402 肝癌
细胞、HCT -8 结肠癌细胞、SPC-A-1 肺腺癌细胞、GLC-82 肺腺癌细胞和 EC-109 食管癌细胞的生长抑制作用;以小
鼠移植性肿瘤 S180模型,观察 A7 的体内抗肿瘤作用。结果　A7 对前述癌细胞的半数抑制浓度 ( IC50 ) 分别为 0. 8,
1. 7, 4. 7, 5. 0, 7. 6
g/ mL , 均小于 10
g / mL ; 动物实验表明, 50 mg / kg A7 对 S180实体肉瘤的抑制率达 46. 8%
(P < 0. 001)。结论　A7 在体外和体内都具有一定的抗肿瘤活性。
关键词: 真菌菌丝体;抗肿瘤; MTT 分析; S180实体肉瘤
中图分类号: R286. 91　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 05 0442 03
Studies on antitumor activity of A7 extracted from one fungal mycelium
LU Hai-yan
1
, GUO Shun-x ing
1
, LIN Chen
2
, ZHANG Xue-yan
2
,
FU Ming2 , L IANG Xiao 2, YU Neng-jiang1
( 1. Institute o f Medicinal P lant Development, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking U nion Medical
Co llege, Beijing 100094, China; 2. Instit ut e of Cancer , Chinese Academy of M edical Sciences &
Peking Union Medical Co llege , Beijing 100021, China)
Key words : fungal mycelia; antitumor act ivity; MT T assay; S180 sarcoma
　　真菌发酵产物具有增强机体免疫力、抗辐射和
抗肿瘤等生物活性,日益受到人们的普遍关注。自然
界中真菌种类繁多,真菌发酵产物是研究、发现新化
合物和开发研制新药的重要天然宝库。Calcarisp ori-
um arbuscula Preuss是我室从四川野生灵芝子实体
中分离纯化获得的一种真菌, 我们对其发酵获得的
菌丝体甲醇提取物进行了体外和体内抗肿瘤活性实
验研究。
1　材料
1. 1　药品:菌丝体, 由本室发酵获得。菌丝体浸膏
A 7 的制备: 将菌丝体干燥后研成粉状,用 75% 甲
醇提取并浓缩得粘稠浸膏, 2. 6 kg 菌丝体得 410 g
·442· 中草药　Chinese T raditional and Herbal Drug s　2002 年第 33卷第 5期

收稿日期: 2001-10-07作者简介:逯海燕( 1975-) ,女,山东维坊人,博士研究生, 1997年毕业于山东医科大学药学系,同年考入协和医科大学攻读硕士研究生和博士研究生,研究方向为抗肿瘤药理。T el : 13681518997　E-mail: haiyan-lu@ hotmail. com
* 通讯作者　E-mail: shu nxing. guo@ bj . col. com . cn　　clin@ publ ic. bta. net . cn
浸膏。MT T 由 Sigma 公司生产。DMSO 由北京化
工厂生产。
1. 2　仪器: EL 312e 型酶标检测仪, 由 Bio-T EK 公
司生产。
1. 3　动物及瘤源: 健康昆明种小鼠, 雌性, 体重
18～22 g , 由中国医学科学院肿瘤研究所实验动物
室提供。S180腹水型肉瘤由中国医学科学院肿瘤研究
所传代保存。BEL-7402、GLC-82、SPC-A-1、EC-
109、HCT -8 癌细胞系均由中国医学科学院肿瘤研
究所分子肿瘤学国家重点实验室提供。
2　方法与结果
2. 1　A7 对肿瘤细胞的生长抑制作用:采用 MT T
法[ 1～ 3] , 取处于对数生长期的 BEL-7402、HCT -8、
SPC-A-1、GLC-82、EC-109 癌细胞系, 用 RPM I
1640 培养基稀释为 3×104 / mL, 按每孔 100
L 种
入 96孔板。37℃、含 5% CO 2条件下培养 24 h 后加
样品 A 7,设 0. 5, 1. 0, 2. 0, 5. 0, 10. 0
g / mL 5 个浓
度,同时设空白对照组和对照组, 每组设 3 个平行
孔。37℃、含 5% CO 2条件下培养 96 h 后, 弃去孔中
培养液,每孔加用无血清 RPM I 1640稀释 10 倍的
MTT ( 0. 5 mg / mL) 150
L, 37℃、含 5% CO 2条件
下培养 4 h, 弃去 MT T 液, 每孔加 DMSO 150
L
溶解甲肷, 酶标仪检测 A 570, 按抑制率= (给药组平
均 A 值- 空白对照组平均 A 值) / (对照组平均 A
值- 空白对照组平均 A 值)×100% 计算 A7 对几
种癌细胞的生长抑制率, 并通过浓度-抑制率曲线求
IC50。结果显示, 当样品作用 96 h 时, A7 对 BEL-
740、HCT -8、SPC-A-1、GLC-82 和 EC-109 癌细胞
生长抑制作用的 IC50分别为 0. 8, 1. 7, 4. 7, 5. 0 和
7. 6
g / mL, 均低于 10
g/ mL, 可见 A7 对肿瘤细
胞具有明显的抑制作用,见图 1。
图 1　A7 对几种肿瘤细胞系生长
抑制作用的量效关系曲线
2. 2　A7 的体内抑瘤活性实验 [ 4] : 于每只小鼠的右
腋皮下常规接种 S180肉瘤细胞悬液 ( 2×107/ mL)
0. 2 mL, 接种后随机分为对照组和给药组, 每组 10
只, 接种 24 h 后, 给药组小鼠 ip A7 溶液 50 mg /
kg ,对照组小鼠 ip 等量生理盐水, 连续给药 8 d。末
次给药 24 h 后, 颈椎脱臼处死小鼠, 剥离出瘤块称
重, 计算抑瘤率,抑瘤率= (对照组平均瘤重- 给药
组平均瘤重) /对照组平均瘤重×100% ,采用 t 检验
比较组间差异。结果显示, ip 50 mg/ kg A7 可显著
抑制 S180实体肉瘤的生长, 抑瘤率为 46. 8% ( P <
0. 001)。给药组的平均体重在实验前后无明显改变,
说明 A7 无明显毒性,见表 1。
表 1　A7 水溶液对 S180实体肉瘤的生长抑制作用
组别 剂量
( mg/ kg )
动物数 平均体重( g)
始 末 始 末
平均瘤重
( g)
抑瘤率
( % )
对照组 - 10 10 19. 6 20. 1 2. 63±0. 832 -
给药组 50 10 10 19. 5 19. 6 1. 40±0. 457* 46. 8
　　与对照组比较: * P< 0. 001
3　讨论
肿瘤严重威胁着人类的生命健康, 世界各国都
投入大量人力物力开发研制新的高效抗肿瘤药。化
学治疗在肿瘤治疗中起着不可替代的作用,寻找高
效低毒的抗肿瘤化疗药是许多药学工作者的追求。
从动植物组织中可以提取获得结构独特而作用
机制新颖的抗肿瘤化合物,但受资源限制很大,且易
破坏自然植被, 破坏生态环境。利用发酵法从真菌中
获得原料药,具有大规模发酵生产和容易控制质量
等特点。过去从真菌发酵产物中开发的抗肿瘤药大
多是一些多糖类化合物, 通过提高人体免疫力来抗
肿瘤[ 5, 6]。自然界存在的真菌种类繁多,从这些真菌
的发酵产物中是否能寻找到作用机制新颖的抗肿瘤
成分, 是开发抗肿瘤新药的基础工作。我们利用
MT T 法对 43 种真菌的发酵产物——菌丝体和发
酵液共 86 个样品进行初筛, 从中找到 3 个对实验
所用癌细胞系敏感的样品, 并对效果最好的样品
A 7进行了深入研究。
采用 MTT 法对 A7 的体外抑瘤活性进行了研
究, 结果显示 A7 对上述肿瘤细胞系的 IC50均低于
10
g / mL, 其中 BEL-7402 肝癌细胞系对 A7 最敏
感,提示 A7 的抑瘤活性具有一定的选择性, 可选择
BEL-7402肝癌细胞系作为敏感细胞系,对 A7抑瘤
活性和作用机制作更深入的研究,有望从中找到对
肝癌有特效的抗癌新药。
A 7 的体内抑瘤活性实验结果显示, 当 ip 50
mg/ kg A7 水溶液时, 对 S180实体肉瘤的抑瘤率达
·443·中草药　Chinese T raditional and Herbal Drug s　2002 年第 33卷第 5期
46. 8% ( P< 0. 001)。说明 A7具有显著的体内抑瘤
活性。
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精血归颗粒对初老雌性大鼠生殖器官抗氧化作用的实验研究
陈　红1 ,张庆文1,唐　怡1,武权生2

( 1. 成都中医药大学,四川 成都　610075; 2. 甘肃中医学院,甘肃 兰州　730000)
摘　要: 目的　研究精血归颗粒改善围绝经期生殖器官衰萎状况的作用机制。方法　将初老雌性大鼠随机分为 5
组, 设精血归颗粒高、中、低剂量组, 尼尔雌醇阳性对照组, 初老空白组; 另设青年空白组。检测生殖器官 MDA 含
量, SOD 活力。结果　精血归颗粒能降低生殖器官 MDA 含量,提高 SOD 活力, 与初老空白组相比具有极显著性差
异 (P < 0. 01) , 作用类于尼尔雌醇,并达到青年空白组水平。结论　“填补精血, 濡润阴器”之精血归颗粒能提高初
老雌性大鼠生殖器官的 SOD 活力, 减少 M DA 的堆积,增强其抗氧化作用,从而改善生殖器官的衰萎状况。
关键词: 围绝经期;生殖器官; 精血归颗粒;初老雌性大鼠; SOD ; MDA ; 抗氧化作用
中图分类号: R286. 75　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 05 0444 02
Experimental study on improving antioxidation of reproductive organs of
praesenilis female rats with JINGXUEGUI GRANULE
CHEN Hong
1 , ZHANG Qing-w en
1 , T ANG Yi
1, WU Quan-sheng
2
　　 ( 1. Chengdu Univ ersity o f TCM , Chengdu Sichuan 610075, China ; 2. Gansu Colleg e of T CM ,
Lanzhou Gansu 730000, China)
Key words : perimenopause; reproduct ive org ans; JINGXUEGUI GRANU LE; pr aesenilis female rat ;
supero xide dismutase ( SOD) ; malonyl dialdehyde ( MDA) ; antiox idat ion
　　围绝经期由于卵巢功能逐渐减退,雌激素水平
低下,由雌激素支配的靶器官出现萎缩性退化, 生殖
器官逐渐衰萎,正常的性生活能力下降,严重影响其
生活质量。现代医学多采用雌激素替代疗法,但其有
一定的副作用和禁忌症[ 1]。本课题组从实践中提出
绝经前后“肝肾不足,精血双亏, 阴器失于濡养”这一
病理机制, 并提出“填补精血, 濡润阴器”的治疗方
法,拟方精血归以改善围绝经期妇女生殖器官的衰
萎状况,为绝经期后妇女健康的性生活提供良好的
内环境。本研究通过检测精血归颗粒对初老雌性大
鼠生殖器官超氧化物歧化酶 ( SOD ) 和丙二醛
( MDA) 的影响,探讨中医药改善围绝经期妇女生
殖器官衰萎状况的多途径作用机制。
1　材料和方法
1. 1　动物: Wistar 雌性大鼠 60 只, 其中 50 只为
15月龄, 体重 ( 332. 19±30. 78) g, 另 10只,约 3月
龄,体重 ( 206± 20. 11) g, 由重庆第三军医大学大
坪医院实验动物中心提供,实验动物合格证号:川实
动管质第 050 号。大鼠全价颗粒饲料由成都中医药
大学实验动物中心提供。实验中保持室温: 16 ℃～
20 ℃, 相对湿度 65%～75% ,动物购回后驯养 1 周
进行实验。
1. 2　药物:精血归颗粒药物组成: 熟地、当归、白芍、
山茱萸等。精血归颗粒浸膏:成都中医药大学附属医
院制剂室提供,批号: 990526。每毫升含生药 5 g, 用
蒸馏水稀释为不同的浓度备用。尼尔雌醇:上海华联
·444· 中草药　Chinese T raditional and Herbal Drug s　2002 年第 33卷第 5期

收稿日期: 2001-12-24基金项目:四川省教育厅科研基金资助项目( 1995026)作者简介:陈　红( 1969-) ,女,四川泸州人,主治医师。1991年毕业于泸州医学院获学士学位,同年工作于泸州医学院附属医院, 2000年毕业于成都中医药大学临床医学院,获医学硕士学位,同年于广州中医药大学攻读博士学位,专业:中西结合临床。