全 文 ：·1704· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第1l期2005年11月
赤首乌和自首乌的HPLC指纹图谱鉴定研究
刘训红1，陈斌1，蔡宝昌1，王玉玺2
(1．南京中医药大学．江苏南京210029I2．南京生物工程与医药科技发展有限公司，祖苏南京210036)
摘要：目的建立赤、白首乌HPLC指纹图谱鉴定方法。方法用RP-HPLC(DAD)法，梯度洗脱，测定赤、白首
乌、加工炮制品及其何首乌粉的指纹匿谱，并作相似度比较分析。结果何首乌不同样品指纹图谱相似度较好，而
何首鸟与自首乌的指纹图谱具有明显区别，何酋乌炮制前后、自首乌加工前后也有差异。嫡论HPLC指纹图谱具
有重现性好、特征性强、方法简便等特点，可用于赤、白首乌药材的鉴别。
关麓词：何首乌；自首乌；指纹图谱{高散液相色谱法
中圈分类号：R282 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2005)11—1704—03
IdentificationonRadixPolygoniMultifloriandRadixonanchiAur culati
byHPLCfingerprint
LIUXun—hon91，CHENBinl。CAlBao—chan91，WANGYu—xi2
(1．NanjingUniversityofTraditionalChineseMedicine·Nanjing210029·Chinal2．NanjingBio—engineering
andMedicalTechnologyDevelopmentCo．，Ltd．，Nanjing210036，China)
Abstract：ObjectiveToestablishHPLCfingerprintfortheidentificationofRadixPolygoniMultL
flsriandRadixC>nanchiAuHculati．MethodsChromatographicfingerprintofRadixPolygoniMulti-
以oH，RadixCynanchiAuriculati，RadixPolygoniMultifloriPreparata，and“HEsHoUwUFEN”was
determinedbyRP—HPLC(DAD)andthegradientelu ionm deappliednchromatographicseparation，da—
tawereanalysedbyFingerprintSimilarityEvaluationSoftwaretOcomparethesimilarityofsamples．Re—
suitsRadixPolygoniMultiflorifromdifferentsamplesw reofhighsimilarity．butRadixPolygoniMnz—
tifloriandRadixCynanchiAur culatishowedevidentdifferenceinfingerprint，andtherewasifferencein
fingerprintthroughprocessingthem．ConclusionHPLCfi gerprintmethodisrepeatableandfeasibleand
canbeusedfortheidentificationofRadixPo妇goniMultifloriandRadixCynanchiAuriculatL
Keywords：RadixPolygoniMultiflori；RadixCyn nchiAuHculati；fingerprint；HPLC
何首乌自古分赤、白两种。赤首乌即为《中国药
典》收载的何首乌，系蓼科植物何首乌尸。妇gonum
multiflorumThunb．的块根[”；自首乌为萝蘼科植
物耳叶牛皮消CynanchumauHculatumRoyleex
Wight等牛皮消屑的块根，民间作何首乌用o。。具有
补肝肾、益精血、乌须发、延年益寿等功效，是常用的
补益中药，在国内外享有盛名。何首乌炮制后(制何
首乌)补益作用增强，自首乌加工成“精制何首乌粉”
(商品名应更名为自首乌粉)作营养滋补品销售。据
文献记载口]，何首乌主要含蒽醌类、二苯乙烯苷、卵
磷脂等成分，自首乌主要含c：。甾苷类、磷脂类成分。
本实验采用高效液相色谱法对赤、白首乌指纹图谱
鉴定进行了初步探讨，以期为何首乌质量控制和药
材鉴别提供一些依据。
1材料与仪器
1．1药材：何首乌采自安徽六安、全椒及南京老山
等地或市售品，共10份样品，除南京老山为野生品
外，其他均为栽培品，经笔者鉴定均为蓼科植物何首
乌P．multiflorumThunb．的块根；制何首乌购自
安徽六安，经鉴定为何首乌的炮制加工品；自首乌采
自江苏滨海五汛、振东等地，为栽培品，经鉴定为萝
蘼科植物耳叶牛皮消C．auriculatumRoyleex
Wight的块根}“精制何首乌粉”为市售商品，购自江
参加了。江苏地产
谱与GAP的基础
撰工作。获科技进
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月· 705·
苏盐城，经鉴定为自首乌粉。
1．2仪器与试药：Agilent1100液相色谱仪(自动
进样品)，二极管阵列检测器(DAD)；METTLER
AE240电子天平fHH一6数显恒温水浴锅(常州国华
电器有限公司)。对照品大黄素为实验室自制，质量
分数为97．72％。乙腈(美国Tedia公司，色谱纯)，
重蒸去离子水(实验室制备)，乙醇(上海化学试剂有
限公司，分析纯；Tedia公司，色谱纯)，氯仿(上海化
学试剂有限公司，分析纯)，异丙醇(上海化学试剂有
限公司，分析纯)。
2方法与结果
2．1色谱条件：色谱柱：AgilentZORBAX80AEx—
tend-C18分析柱(250mm×4．6mm，5pm)；流动相：
水(A)与乙腈(B)梯度洗脱，梯度条件。一60rain，A
(“)98～0，B(％)2～100，60---．．80min，A(％)O～0，
B(％)100—100；体积流量：1．0mL／min；柱温：25
℃}检测波长：210nul；参比波长：360o_m；分析时
间：80min；进样量：20pL。
2．2供试品的制备：精密称取药材粗粉5．0g，置圆
底烧瓶中，加乙醇100mL，水浴加热回流提取3次，
合并滤液，将滤液浓缩至小体积，用氯仿40mL萃
取2次，合并萃取液，用无水Na。SO。脱水，滤过，滤
液浓缩至适当体积，蒸干，残渣加异丙醇溶解，定容
至25mL量瓶中。用微孔滤膜(孔径为0．45“m)滤
过，滤液作为供试品。
2．3对照品的制备：精密称定大黄亲对照品适量，
加甲醇制成20pg／mL的溶液，作为对照品液。
2．4方法学考察：以南京老山产何首乌药材为样
品，对其稳定性、仪器精密度、实验方法重现性作了
相应考察，结果证明稳定性及重现性良好。
2．4．1稳定性试验t取同一份供试品溶液，分别在
0、2、4、7、11、16、22、29、36h进行检测，考察色谱峰
相对保留时间的一致性，各主要色谱峰相对保留时
间的RSD为0．2％～2．9％。
2．4．2精密度试验t取同一份供试品溶液，连续进
样5次，考察色谱峰相对保留时间的一致性，各色谱
峰相对保留时间的RSD均低于3％。
2．4．3重现性试验：取同一批号的供试品5份，同
法检测，考察色谱峰相对保留时间的一致性，以tn
为36．3rain的大黄素峰为对照，各色谱峰相对保留
时间的RSD均低于3％。直观观察叠加的色谱图，
也可判断峰位有良好的重合。
2．5指纹图谱建立：精密吸取对照品与供试品溶液
各20止，注入高效液相色谱仪，按选定的色谱条件，
进行检测。同一实验条件下，测定所有供试品HPLC
色谱图。根据不同批次供试品测定结果所给出的峰
数，峰值(积分值)和峰位(相对保留时间)等相关参
数，进行分析、比较，制定优化的指纹图谱(图1)。
L¨虬互j姒．～L．：z
扩—1矿—面——而—1矿—1矿—1矿—葡_一扩—1矿—1矿—面——布—1_『—1矿—1矿一
0 10 20 30 40 50 60 70 0 10 20 30 40 50 60 70
tlmin
A一大黄索B-何首乌(栽培品)C坤Ⅲ首乌(野生品)D制何首乌E一自首乌F一白首乌粉
A-emodinB-RadixPolygonumMultiyTorum(culture)C—RadixPolygoniMultiflori(wild)D—RadixPolygoni
Multij7咿iPreparataE-RadixCynam-hiAuriculatiF一“HESHoUWUFEN”
圈f赤首乌和白首乌的HPLC指纹圈谱
Fig．1HPLCfingerprintofRad／xPolygoniMultifloriandRadixCynanehiAur&ulati
万方数据
·1706· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月
2．6指纹图谱分析
2．6．1共有指纹峰标定；经与对照品对照以及比较
所有测定和记录的色谱图，何首乌标定9个共有峰
作为指纹图谱的特征峰，制何首乌标定5个共有指
纹特征峰。与大黄素对照品峰(5号峰)相比，何首鸟
其他8个共有指纹峰相对保留时间依次为：栽培品
0．119、0．647、0．734、0．929、1．153、1．485、1．510、
2．081，野生品0．104、0．717、0．855、0．907、1．127、
1．474、1．514、2．030,制何首乌其他4个共有指纹峰
相对保留时间依次为：0．853、1．138，1．485、2．041。
自首乌经比较所有测定和记录的色谱图，标定8个
共有指纹特征峰，以供试品中保留时间约为38rain
的共有指纹峰为参照，与参照峰(3号峰)相比．其他
7个共有指纹峰相对保留时间依次为：0．100、
0．339、1．064、1．232、1．284、1．387、1．782。
2．6．2何首乌指纹图谱相似度评价：将lo个批次
何首乌样品测试数据导人中药指纹图谱相似度计算
软件，经选峰，设定匹配模板，将谱峰自动匹配；然后
设定标准模板，进行谱峰差异性评价和整体相似性
评价。通过中药指纹图谱相似度计算软件得出何首
乌HP[。C指纹谱共有模式，与共有模式比较，lo个
批次何首乌的相似度：安徽六安(1)0．93，六安(2)
0．90，安徽全椒0．94，安徽滁州商品0．91，南京老山
(野生)0．82，江苏省中医院药房0．89，南京同仁堂
药店0．88，南中医药大国医堂0．92，河南商品
0．96，扬州商品0．95。
2．6．3赤首乌和自首乌的指纹图谱比较：从各自的
指纹图谱中，可以直观地看出，何首乌和自首乌的指
纹图谱明显不同，其特征峰数目、位置(相对保留时
问)、积分值都有显著差异，何酋乌含有大黄素，自首
乌则投有。何首乌与制何首乌，自首乌与自首乌粉，
它们的指纹图谱也有差异。
3讨论
3．1通过对不同提取溶剂、提取方法进行实验比
较，对赤何首乌和自首乌的色谱图同时进行考察，并
作综合分析，拟定上述供试品的制备方法。
3．2在色谱条件优化过程中，主要考察何首乌的色
谱图，适当兼顾自首乌的色谱蜂分离情况。经实验比
较，以水与乙腈为流动相，按上述条件迸行梯度洗
脱，能较好地使何首乌样品中各色谱峰分离且出峰
较多；采用二极管阵列检测器对检测波长进行考察，
记录并比较不同波长的色谱图，结果在230nm检
测渡长下，何首乌色谱图中色谱峰较多，信息丰富，
故选择Z30am为检测波长。
3．3相似度分析结果表明，何首乌不同样品指纹图
谱相似度较好，而何首乌与自首乌的指纹图谱具有
明显区别，何首乌炮制前后、自首乌加工前后的指纹
图谱也有差异。
3．4赤首乌和白首鸟加工炮制前后指纹图谱显示
出的差异，主要是由于何首乌通过炮制后，结合型蒽
醌量降低而游离型蒽醌增加；白首乌在加工制成“白
首乌耪”的过程中，c：。甾苷类成分大量流失所致。
3．5本实验对何首乌HPLC指纹图谱的构建进行
了初步探讨，可为首鸟类药材的品种鉴定和质量评
价提供依据。
Referetlee$；
EtJc^P(中国药典)Es]Vol1．2000
E2]XiaoPG．删一ChineseMateriaMedica(新编中药志)
EM]．VolI，Beijing：ChemicalIndustryPress，2002．
广州相思子GAP栽培技术研究
岑丽华1，徐 良”，郑雪花一，周路山2
(1．广州中医药大学，广东广州 510405f2．广药集团广州市药材公司．广东广州 510130)
摘要：目的对广州相思子(鸡骨草)实施规范化栽培(GAP)研究，探索优质丰产栽培技术。方法以国家食品药
品监督管理局颁布的《中药材生产质量管理规范》为指导原则，开展鸡骨草GAP栽培。结果实施GAP栽培管理
鸡骨草的浸出物和黄酮量比非GAP栽培管理的高，农残和重金属的量较低。鲭论开展鸡骨草GAP种植t通过严
格选地、选种、选施无污染无公害肥料与农药．可有效地控制药材中有害重金属与农药残留量，提高鸡骨草的质量
和产量。
警鐾是留：产紫墨：≠2州市中药理代化科技攻关资助项目(2003c604031200323一E5051。112K4030008穗科条[2003]4l号)
：警霸蔫辜匿霎院良2002T级el硬：(0士2研0)8究6生235281Bm“kcg疆1@163‘c。m
万方数据
赤首乌和白首乌的HPLC指纹图谱鉴定研究
作者： 刘训红， 陈斌， 蔡宝昌， 王玉玺， LIU Xun-hong， CHEN Bin， CAI Bao-chang，
WANG Yu-xi
作者单位： 刘训红,陈斌,蔡宝昌,LIU Xun-hong,CHEN Bin,CAI Bao-chang(南京中医药大学,江苏,南京
,210029)， 王玉玺,WANG Yu-xi(南京生物工程与医药科技发展有限公司,江苏,南京
,210036)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(11)
被引用次数： 7次
参考文献(2条)
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2.Xiao P G 新编中药志 2002
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本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200511043.aspx