全 文 ：解 ,超声震荡。各药物临用前用对应的溶剂稀释到所
需浓度 ,煮沸 30min消毒。处理细胞时 , DM SO的终
浓度小于或等于 0. 1%。 实验表明该浓度对细胞生
长无影响。
取对数生长期的 HL-60细胞 1. 0× 105 /mL,加
入 24孔板中 ,每孔 1 mL,用药组分别在每孔中加入
相当于槲皮素或 QAC 3. 125, 6. 25, 12. 5, 25, 50μg /
m L的各溶液 1μL,对照组只加入 1μL相应溶剂 ,
每组均设 3个平行孔 ,设好空白对照孔 ,加药的细胞
于 37℃、 5% CO2的饱和湿度孵箱中培养 24和 48
h后 ,用台盼蓝拒染法并在倒置显微镜下进行活细
胞计数 ,计算药物对细胞的抑制率 ,并按改良 Kar-
ber公式计算得 IC50值分别为 11. 9和 7. 84μg /mL;
QAC在 24和 48 h对 HL-60细胞生长抑制的 IC50
值分别为 13. 1和 9. 13μg /m L。
3　讨论
3. 1　我们曾对多种槲皮素和 L-精氨酸的物料比进
行了研究 ,通过对产品含量检测和生物活性的比较 ,
筛选出当槲皮素和精氨酸的物质的量比为 1∶ 1时 ,
制备的 QAC能得到较大的水溶性和对 HL-60细胞
生长仍具有较强的抑制活性。
3. 2　 QAC的结构初步鉴定是通过胶束纸色谱、紫
外吸收光谱、红外吸收光谱和 X射线衍射图谱来进
行的。在 0. 01 mol /L SDS胶束溶液中 ,纸色谱显示
QAC迁移值为 Rf= 0. 652,远大于苷元槲皮素的迁
移值 ,具有与苷类相似的迁移速度 [7 ] ,预示槲皮素分
子中的羟基被精氨酸结合后 ,极性增大。紫外吸收光
谱显示 , Q AC只出现的带Ⅰ 吸收峰 ,波长为 327
nm ,与槲皮素的最大吸收波长 373. 5 nm相比 ,
QAC的带Ⅰ吸收峰向短波方向移动 ,并且是肩峰 ,
表明槲皮素分子上的羟基已被结合。 而 QAC的带
Ⅱ吸收峰不明显 ,这与槲皮素结构中的 C环上的
3′, 4′-双羟基系统丧失有关 [8 ]。此外 ,红外吸收光谱
也显示 ,槲皮素表现多羟基的宽峰到 QAC中变化
成尖锐的单峰 ,表明羟基缔合强度的减弱和数目的
减少。而且 X射线衍射图谱表明槲皮素与 L-精氨酸
形成 QAC。因此 ,可初步确定槲皮素的 3′, 4′-双羟
基位上结合了精氨酸。进一步的结构鉴定有待继续
进行。
3. 3　制备的 QAC较易氧化和潮解。回流反应结束
时 ,反应混合物呈杏黄色 ,但当在除去未反应的槲皮
素和精氨酸后 ,产品很快转变成橙红色 ,显示产品在
空气中极易氧化。 在反应中 ,我们采用 N2气流保
护 ,反应后加入少量 NaHSO3作抗氧剂 ,有效地提
高了产品的抗氧化能力。 QAC易潮解 ,当真空干燥
后的产品一旦暴露在空气中 ,立即潮解成粘稠的胶
状体 ,因此 ,产品的 QAC含量测定选择通过标准曲
线法获得。
参考文献:
[ 1]　刘诗平 ,陈尚猛 ,朱卫东 .槲皮素衍生物的生物活性研究进展
[ J ]. 中草药 , 1991, 22( 4): 182-184.
[2 ]　 Kim J H, Kim S H, Al fieri A A, et al . Quercetin— an in-
hibitor of lactate t ransport and a h yperthermic s ensi ti zer of
HeLa cel ls [ J ]. Cancer Res, 1984, 44: 102-106.
[3 ]　 Kang T B, Liang N C. Studies on th e inhibi tory ef fects of
quercetin on the grow th of HL-60 Leukemia cells [ J ] .
Biochem Ph armacol, 1997, 54: 1013-1018.
[4 ]　郑惠珍 ,唐朝枢 . L -精氨酸的跨膜转运及临床意义 [ J ]. 国外医
学—生理、病理科学与临床分册 , 1999, 19( 6): 475-478.
[ 5 ]　赵维中 ,戴利明 ,方　明 ,等 . 槲皮素在兔体内的药代动力学
[ J ]. 中国药理学通报 , 1992, 8( 6): 452-455.
[ 6 ]　顾学裘 ,李焕秋 ,乔博路 .鹤草酚精氨酸盐注射剂的研究 [ J ].
中草药 , 1980, 11( 8): 346-349.
[7 ]　佘　戟 ,陈　杰 ,莫丽儿 ,等 . 胶束纸色谱法分离和鉴别黄酮类
化合物 [ J] .广东医学院学报 , 1999, 17( 2): 102-104.
[8 ]　 K R马卡姆 . 黄酮类化合物结构鉴定技术 [M ]. 北京:科学出
版社 , 1990.
不同提取工艺的龙血竭差异
胡迎庆 ,张静泽 ,刘成航* ,邓昌沪* *
(武警医学院 药学教研室 ,天津　 300162)
摘　要: 目的　鉴别不同工艺提取的龙血竭中化学成分的差异。方法　采用薄层色谱法、紫外分光光度法和高效液
相色谱法对不同工艺提取的龙血竭进行分析。结果　新工艺提取的血竭中二氢查尔酮类化合物的含量较传统工艺
提取的血竭高 ,二氢查尔酮类化合物含量高 ,但黄酮类和 类成分含量低。 结论　免加热工艺为一种独创的 、提取
率高的新技术 ,具有推广价值 ,将推动中药现代化研究的步伐。
·697·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 8期
收稿日期: 2001-12-27基金项目:国家自然科学基金资助项目 ( 30070088)作者简介:胡迎庆 ( 1964-) ,女 ,江西上饶人 ,理学硕士 ,从事天然药物的研究与开发。 Tel: 022-60578198
* 吉林通化东宝药业股份有限公司威海东宝制药厂
* * 厦门今润丰华医药科学有限公司
关键词: 工艺 ;龙血竭 ;化学成分
中图分类号: R286. 02　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 08 0697 03
Difference of Dragon s Blood from different extract processing
HU Ying-qing , ZHANG Jing-ze, LIU Cheng-hang , DEN G Chang-lu
( Depar tment of Pha rmacy , Medical Co lleg e of Chinese People s A rmed Po lice For ces, Tianjin 300162, China)
Abstract: Object　 To identify the di fferences of chemical consti tuents of Dragon s Blo od obtained by
di fferent ex t ract processing. Methods　 The mentioned Dragon s Blood w as analy zed by TLC, UV spectro-
photometry, and HPLC. Results　 The contents o f dihydrochalcone in Dragon s Blood by the new ex tract
processing w ere higher than that by t radi tional one s, w hi le the contents of f lav onoid and stibene w ere
low er. Conclusion　 The heating-free tech nolog y is a new technique that is an original wi th higher ex t ract
ra te, and i t is w orth of spreading. It w ill promote the modernization of TCM.
Key words: ex t ract processing; Dragon s Blood; chemical consti tuents
　　一类新药材龙血竭收载于 1999年国家药品监
督管理局颁布的国家标准 [ 1]中 ,为百合科龙血树属
植物剑叶龙血树 Dracaena cochinchinensis ( Lour. )
S. C. Chen的 95%乙醇提取物 ,具有活血散瘀、消
炎止痛、收敛止血、生肌敛疮、补血益气等功效。龙血
竭的生产工艺多为传统醇提取工艺 ,必须依靠热源
提取 ,市场上主要有芒果牌血竭、柬龙牌血竭和大观
牌血竭等。本实验用一种新型免加热提取工艺提取
剑叶龙血树的树脂 ,并将其与传统工艺提取的龙血
竭进行比较。
1　仪器与试药
日本岛津 1601紫外分光光度仪 ;日本岛津 LC-
10AT高效液相色谱仪 (双泵 ) , SPD-10A紫外检测
仪 , C-R8A记录仪 , C TO-10AS柱箱 ;柬龙牌血竭
(中国医学科学院版纳华胜制药厂生产 ,批号
960515) ,芒果牌血竭 (广西中医学院药厂生产 ,批号
990505) ,新工艺提取的龙血竭 (厦门今润丰华医药
科学公司提供 ,批号 010601) ;龙血素 A、龙血素 B、
紫檀 对照品 (自制 ,归一化法含量> 98% );硅胶
GF254薄层层析 (青岛海洋化工厂 ) ;甲醇、乙腈为色
谱纯 ,其他试剂均为分析纯。
2　实验方法
2. 1　新工艺龙血竭的制备: 免加热提取工艺 ,即运
用压力交变法 ,给浸泡药材的溶媒施加压强 ,强制植
物细胞几何形状改变 ,改善细胞壁两侧的渗透压 ,溶
出细胞内各成分 ,分离除去固相杂质 ,再利用低温干
燥空气热平衡法干燥 ,得到龙血竭提取物。
2. 2　性状比较: 芒果牌血竭为不规则颗粒 ,表面红
棕色或红褐色 ,有光泽 ,质硬而脆 ;柬龙牌类圆球形 ,
表面红棕色 ,破碎面红褐色至黑色 ,有光泽 ,有沟纹
及用包裹遗留下的布纹 ,顶端有包扎成型时聚成的
簇状凹凸 ,底部圆平 ,质硬而脆 ;新工艺提取的血竭
为红褐色薄片状 ,质地疏松 ,有光泽 ,手捻之易碎。 3
种血竭气味均有特异微清香 ,嚼之有砂粒感 ,微粘牙。
2. 3　薄层色谱: 精密称取各样品 20 mg ,甲醇定容
于 1 mL量瓶中作为供试品溶液 ;精密称取 10 mg
龙血素 A、 B和紫檀 对照品 10 mg ,甲醇定容于 10
mL量瓶中作为对照品溶液。分别将供试品溶液和
对照品溶液各 2μL,点样于同一以羧甲基纤维素钠
为粘合剂的硅胶 GF254薄层板上 ,以石油醚 -乙酸乙
酯 ( 3∶ 1)为展开剂 ,展开 ,展距 10 cm,取出 ,晾干 ,
置紫外灯 ( 254 nm )下检视 ,见图 1。结果新工艺中可
见到传统工艺中未见的斑点 ,各斑点的大小也不同。
A-芒果牌血竭
B-新工艺血竭
C-柬龙牌血竭
1-紫檀 2-龙血素 A
3-龙血素 B
图 1　不同工艺提
取血竭的薄
层色谱图
2. 4　紫外光谱: 精密称取样品各
15. 0 mg ,置 25 mL量瓶中 ,加甲
醇溶解并稀释至刻度 ,作为备用
液。吸取备用液过滤 ,精密吸取滤
液 1 mL,置 25 mL量瓶中 ,加甲
醇稀释至刻度 ,置紫外分光光度
仪中 ,在 220～ 450 nm范围内进
行扫描 ,记录紫外吸收光谱 ,结果
见图 2。
　　紫外光谱图显示: 新工艺提
取的血竭在 285 nm时的 A值比
两种传统工艺方法提取血竭的
高。 270～ 285 nm内主要是血竭
中二氢查尔酮类 (龙血素 A、 B
等 )成分 ,推测新工艺中龙血素类
成分高于传统工艺中的含量 ,与
薄层色谱的结果一致。但在 330 nm时新工艺提取
的血竭的 A值小于两种传统工艺方法提取血竭。
300～ 330 nm内主要为血竭中黄酮类和 类成分 ,
·698· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 8期
推测新工艺提取的血竭中含黄酮或 类成分低于传
统工艺中的含量 ,与薄层色谱中看到的紫檀 含量
较低结果一致。
1-新工艺血竭　 2-芒果牌血竭　 3-柬龙牌血竭
图 2　 3种血竭的紫外光谱图
2. 5　高效液相色谱 [ 2]:色谱条件: 用十八烷基硅烷
键合硅胶为填充剂 ,乙腈 -1%冰醋酸溶液 ( 33∶ 67)
为流动相 ,室温 ,流速为 1 mL /min,检测波长为 280
nm。 测定方法:分别吸取芒果牌血竭和新工艺提取
的血竭备用液 ,微孔滤膜 ( 0. 45μm)过滤 ,取续滤液
各 20μL,注入高效液相色谱仪 ,记录 HPLC色谱
图。结果见图 3。
　　图 3中进一步证实:新工艺提取的血竭中所含
化合物较传统工艺提取的化合物多 ,且含量高 ,大多
数峰的峰面积大于芒果牌血竭 ,如第 5号峰的峰面
积新工艺提取的血竭比传统工艺的高出 28倍。另外
还含有芒果牌血竭中未检出的微量成分 ,如第 18和
25号峰 ;但第 26号峰的峰面积却小于传统工艺提
取的芒果牌血竭 ,该峰为紫檀 。
A-芒果牌血竭　 B-新工艺血竭
图 3　HPLC色谱图
3　讨论
　　厦门今润丰华医药科学公司采用免加热提取工
艺 ,使药物的提取率大大提高 (约为 23% ～ 25% ) ,
这样有利于节约药物资源 ,降低生产成本 ;所提取的
化学成分及含量明显提高 ,尤其适用于遇热易发生
变化的化学成分的提取与分离。新工艺提取物为疏
松的薄片状 ,在甲醇、丙酮、 95%乙醇和 75%乙醇中
的溶解度、澄明度均优于现在市场上各种品牌的血
竭 ,用其为原料进行制剂 ,分散度高 ,表面积大 ,有利
于吸收。 其化学成分的含量与现在上市的传统工艺
提取的血竭存在差异 ,其药效上是否也存在差异 ,还
有待于进一步研究。
参考文献:
[1 ]　 WS3-082( Z-016)-99( Z) ,国家药品监督管理局标准 [S ].
[2 ]　胡迎庆 ,张静泽 ,刘岱琳 ,等 . 两种 “柬龙牌”血竭的真伪鉴别
[ J] .中草药 , 2002, 33( 4): 358-360.
参附汤方药 4种方法提取液的成分比较
修彦凤1 ,孙秀梅2 ,张兆旺 2
( 1. 上海中医药大学中药学院 药剂教研室 ,上海　 200032; 2. 山东中医药大学中药学院 药剂教研室 ,山东 济南　 250014)
摘　要:目的　选择参附汤方药成分的提取工艺。 方法　以人参二醇、人参三醇、总生物碱、酯型生物碱、丹参酮
Ⅱ A、原儿茶醛、总糖、干浸膏为指标 ,在药材粒度、溶剂量、煎提温度、滤过、浓缩等条件相同的前提下 ,采用半仿生
提取 ( SBE)法、水提取 ( W E)法、半仿生提取醇沉 ( SBAE)法、水提醇沉 ( WAE)法进行比较研究。 结果　 8个指标综
合评价 Y值为: SBE法 > W E法> SBAE法> W AE法。 结论　参附汤方药成分的提取以 SBE法提取为佳。
关键词: 参附汤 ;指标成分 ;提取方法
中图分类号: R284. 2; R286. 02　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 08 0699 04
·699·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 8期
收稿日期: 2001-11-12作者简介:修彦凤 ( 1974-) ,女 ,山东栖霞人 ,助教 ,在读博士研究生 , 2000年毕业于山东中医药大学中药学专业 ,研究方向为中药质量控制。 Tel:
021-54231526　 E-mail: xiuyf@ sohu. com