全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月· 621·
四物汤中多糖部位的分离和相对分子质量分布测定
王玉华1，王伟2，容蓉3，袁火荣”
(1．内蒙古医学院药学院．内蒙古呼和浩特010059；2．内蒙古药品检验所，内蒙古呼和浩特010020
3．山东中医药大学天然药物省重点实验室，山东济南250014)
四物汤(SWT)是补血调血的基本方荆，由熟地
黄、当归、白芍、川芎4味药组成，方中熟地滋阴补血
为主药，辅以当归补血养肝、和血调经，白芍和营养
肝，川芎活血行滞。四物汤中多糖所占比例较大，是
主要有效成分之一。四物汤中多糖主要来自熟地黄
和当归叶“。近年来的研究发现，热地和当归中的多
糖具有抗肿瘤、补血活血、增强免疫和抗放射性损伤
等作用，预示良好的应用前景。本实验对四物汤中的
多糖进行了分离纯化和分析鉴定，并采用凝胶
HPLC法对不同多糖部位的相对分子质量分布进行
了测定，为四物汤有效部位的确定奠定理论基础。
1仪器和试药
760CRT双光束紫外可见分光光度计(上海分
析仪器总厂)}MettlerAE240电子天平(瑞士)；电
热恒温水浴锅(上海医疗器械三厂)；真空减压干燥
器(上海分析仪器总厂)；IR一440型红外分光光度
计(日本岛津)；RID一2A示差折光检测器(日本岛
津)、LC一6A液相色谱仪(日本岛津)、CBLModel
100恒温柱箱(菲罗门)、ALLChromplusClient／
ServerSEC专用软件。
右旋糖背(中国药品生物制品检定所)、Do
M180(批号：140637—2000—01)；D．M2500(批号：
140638—2000—01)；D2M4600(批号：140639—2000-
01)；D。M7100(批号：140640—2000—01)；D4M 140
(批号；140642—2000—01)ID5M130000(批号：
140645—2000—01)。
地黄RehmanniaglutinosaLiboseh．、当归An—
gelicasinens打(oliv．)Diels、白芍Paeonialacti3口o-
raPall．、川芎LigusticumchuanxiongHort．均购自
济南建联中药店，经姚庭芝主任药师鉴定。
2方法与结果
2．1粗多糖的提取：按四物汤处方(熟地黄15g、当
归10g、白芍10g、川1芎6g)称取药材205g，加水浸
泡，加热提取两次，时间分别为lh和0．5h。合并提
取液，离心，上清液滤过，滤液浓缩至相对密度为
收幡日期{2005一01—1I
1．05～1．10(60℃)，加入乙醇使体积分数达80％，
搅匀，冷处静置24h。沉淀于60℃减压干燥。
2．2粗多糖的净化和部位分离：取以上的粗多糖以
水溶解(每毫升相当于2g药材)转入锥形瓶中，用
Sevag法去蛋白处理5次，分取水层，调至相对密度
为1．05～1．10(60℃)，加入乙醇使体积分数达到
30％，搅匀，密闭，冷处静置24h，分取沉淀，依次用
无水乙醇、丙酮洗涤，于60℃减压干燥，获T30部
位；分取T30部位上清液，加入乙醇使体积分数达
50％，其他操作同T30的制备，获T50部位；分取
T50部位上清液，加入乙醇使体积分数达75％，其
他操作同T30的制备，获T75部位。
2．3多糖部位的IR测定：T30、T50和T75部位的
红外光谱图显示，在3200～3500cm_1有较强的宽
峰，证明有羟基且形成了氢键缔合，在900～1200
em-1有较强的口c—o峰，在约2900cm_1处显示弱的
讹一。峰。各个多糖部位的红外光谱图均显示较强的
糖类特征。
2．4相对分子质量分布测定
2．4．1色谱条件：SHODEXHPAKSB--804HQ
凝胶高效液相色谱柱(8mmX300ram)，相对分子
质量排阻范围3x105；流动相：0．7％硫酸钠水溶
液；体积流量：0．5mL／min；柱温：35℃；进样量：20
pL；灵敏度：0．5AUFS。
2．4．2标准曲线的制备：取已知相对分子质量的标
准多糖Dextran各50rag。置5mL量瓶中，分别加
流动相稀释至刻度。分别精密吸取各溶液20止，注
入高效液相色谱仪。以相对分子质量(y)的对数为
纵坐标，保留时间(x)为横坐标，进行回归分析，绘
制两条标准曲线。测定低相对分子质最多糖标准曲
线的回归方程：lgY=10．531—0．390X，r一
0．9997，相对分子质量在180～7100}测定高相对
分子质量多糖标准曲线的伺归方程：lgY=8．105—
0．252X，r一0．9910，相对分子质量在4600～
13000。
万方数据
·1622· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月
2．4．3 四物汤各多糖部位的相对分子质量分布测
定：称取供试品约50mg，置5mL量瓶中，加流动相
溶解并稀释至刻度，作为供试品溶液。吸取供试品溶
液20止，注入高效液相色谱仪，在与标准曲线制备
完全相同的条件下测定，根据保留时间从曲线上查
出多糖相对分子质量的对数值，再求出相对分子质
量(Mr)。结果见表1。
裹1四物汤中多糖部位的相对分子质量分布(月一4)
Table1 Dlstlbutionofrelativemolecularweightabout
SWTpolysaccharidespos tion(月一4)
3讨论
3．1 四物汤的多糖部位分成3个部分，分别为
T30、T50和T75。本实验的目的是确定多糖的有效
部位，因而不需要特别强调分离出分布均一的多糖
组分。结果可见，3个部位均为不同相对分子质量的
混合体。
3．2 相对分子质量为近1000(保留时间约为19
min)的低相对分子质量多糖在3个部位中均有分布，
但分布随乙醇沉淀的体积分数的增加而趋于集中。
3．3 T50和T75部位均在约23min时有-d,峰，
该成分的相对分子质量约为27，是非糖类的杂质产
生的峰。
3．4 (2．5～12)×104高分子多糖分布在T30部
位，2．5×104以下的高分子多糖分布在T50部位，
各部位的活性及四物汤多糖有效部位的确定有待于
药效学试验做出结论。
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迷迭香化学成分研究
程伟贤1，陈鸿雁2。张义平2，高树鹏1，陶云海1，古昆”
(1．云南大学应用化学系生物{6I药创新人才培养基地．云南昆明650091；2．云南警官学院，云南昆明650223)
迷迭香RosmarinusofficinalisL．系唇形科迷
迭香属植物，是目前公认的具有较高抗氧化作用的
一种植物。20世纪60年代末和70年代初先后由德
国和日本科学家从迷迭香中分离出具有高效抗氧化
能力的成分“]。中国科学院植物研究所于1981年成
功地引种了迷迭香，通过cO：超临界萃取法从迷迭
香的茎叶中萃取出了芳香油，提取出了食用抗氧化
剂(rosemaryantioxidant．简称Rao)口]。迷迭香中的
抗氧化成分主要为迷迭香酚、表迷迭香酚，异迷迭香
酚、迷迭香酸及黄酮、黄酮苷等成分。
对于迷迭香的研究，国外已有大量文献报道和
专利，但国内对迷迭香化学成分及相关报道较少，迄
今未见系统研究迷迭香化学成分的报道。本课题组
从云南玉溪地区引种栽培的植物迷迭香中分离得到
了15个化合物，运用现代波谱技术分析，确定其结
构为：迷迭香酚(I)、7一甲氧基迷迭香酚(Ⅱ)、鼠尾
草酸(Ⅲ)、鼠尾草酚(IV)、对甲氧基没食子酸(V)、
丹皮酚(VI)、乌索酸(Ⅶ)、黄荚苷(Ⅷ)、槲皮素(IX[)、
山柰酚一3一O一葡萄糖苷(x)、6，7-二甲氧基一5，40二
羟基黄酮醇一3一O一葡萄糖苷(Ⅺ)、木樨草素(XI)、芹
菜素～7一o～葡萄糖苷(XIII)、3’一甲氧基一5，40二羟基
黄酮一7一。一葡萄糖营(XIV)、木樨草素一7一。一葡萄糖苷
(XV)。
I实验原材料及仪器
鉴鍪是眢：罢蓄署名瓷省校合作项日(。。。。Y。。。)
尊翥桀荏雾警‘昆197”Tehh乳(087葫1)50黼3462九3舭Em研ai麓揣糯始铆究
万方数据
四物汤中多糖部位的分离和相对分子质量分布测定
作者： 王玉华， 王伟， 容蓉， 袁久荣
作者单位： 王玉华(内蒙古医学院药学院,内蒙古,呼和浩特,010059)， 王伟(内蒙古药品检验所,内蒙古
,呼和浩特,010020)， 容蓉,袁久荣(山东中医药大学,天然药物省重点实验室,山东,济南
,250014)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(11)
参考文献(3条)
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6. 贾晓斌.陈彦.蔡宝昌.施亚芳 HPLC法测定川芎配方颗粒中阿魏酸的含量[期刊论文]-南京中医药大学学报(自然
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9. 邓翠娥.邓莉.陈国唤 邓来送教授运用四物汤的经验[期刊论文]-时珍国医国药2006,17(12)
10. 黄霞.刘杰.刘惠霞 熟地黄多糖对血虚模型小鼠的影响[期刊论文]-中国中药杂志2004,29(12)
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