全 文 ：2、第 3 次为 1 h, 加纯净水的量为 (以投料 1 次
1 000 g丹参计)第一次 16. 0 L ,第二、第三次各为
14. 4 L、12. 8 L。
表 3 方差分析表
方差来源 离均差平方和 自由度 均 方 F值
A 543. 26 2 271. 63 308. 67
B 8. 89 2 4. 45 5. 06
C 38. 88 2 19. 44 22. 09
误差 1. 75 2 0. 88
F0. 05( 2, 2) = 19. 00
3 讨论
3. 1 水提次数,亦为一试验因素,但根据一般中药
提取均采用 3次,故本品水提工艺为水提 3次。
3. 2 丹参提取的基本操作要点为水提之后, 再用不
同的乙醇浓度将杂质沉淀除去(即水提醇沉法) , 然
后精制, 即通过水沉进一步提高丹参提取精制液的
质量[ 2]。
参考文献:
[1] 中国药典[ S ] . 2000年版 . 一部 .
[2] 赵新先 . 中药注射剂[ M ] . 北京:人民卫生出版社, 1998.
金芪降糖片中小檗碱的含量测定
窦志英1 ,游强蓁2,牛瑞杰2
( 1. 天津中医学院 中药系,天津 300193; 2. 天津中药制药厂,天津 300232)
金芪降糖片是中药三类新药, 由黄连、黄芪、金
银花等组成, 以清热益气, 生津止渴为治疗原则,主
要针对气阴两虚兼有内热症候的消渴病患者。方中
黄连的主要成分为小檗碱,小檗碱既是清热又是降
血糖的主要活性成分。故而,本实验制定测定金芪降
糖片中小檗碱含量的方法,用于批量产品的定量分
析和质量监控。
1 仪器与试剂
SP-8810高效液相色谱仪, SP-4400积分仪(美
国光谱物理公司)。乙腈(色谱纯) ,盐酸小檗碱(中国
药品生物制品检定所提供) , 其它试剂为分析纯。金芪
降糖片(批号 9910086, 9910088, 9911097, 9911098,
9911099)及空白样品(天津中药制药厂提供)。
2 方法与结果[ 1～3]
2. 1 色谱条件: 色谱柱: YMC-C18柱( 4. 6 mm×150
mm , 10 m) ,柱温:室温, 流动相: 0. 05 mo l/ L 磷酸
二氢钠缓冲液(磷酸调 pH至 3±0. 5) -乙腈( 7∶3) ,
流速为 1 mL/ min, 检测波长: 270 nm, 进样量: 6
L, 色谱柱的理论板数按盐酸小檗碱计应大于
4 200。色谱图见图 1。
2. 2 线性关系考察:精密称取盐酸小檗碱对照品
10 mg 置 50 mL 量瓶中,加 50%乙醇溶解并稀释至
刻度, 摇匀。从上述溶液中依次精密吸取 2. 0, 4. 0,
6. 0, 8. 0, 10. 0 mL, 分别置于 50 mL 量瓶中, 加
50%乙醇稀释至刻度, 摇匀,各吸取 6 L 注入液相
色谱仪,测得峰面积积分值。以对照品溶液浓度( C)
对峰面积 ( A )绘制标准曲线, 计算得回归方程为:
A-盐酸小檗碱对照品 B-空白对照品 C-供试品
图 1 HPLC图谱
A = 2. 52×104+ 5. 27×106C, r= 0. 999 8。结果表明
本实验条件下, 盐酸小檗碱在 0. 052～0. 258 g 范
围内有良好的线性关系。
2. 3 空白实验:取除黄连以外的各原药材,按处方
量制得片剂,照供试品溶液方法制备空白对照液, 测
定。结果表明, 本试验条件下,在与盐酸小檗碱相对
应的保留时间下,其它成分对本测定方法没有干扰。
2. 4 精密度试验:对于同一盐酸小檗碱对照品溶液
( 0. 025 8 mol/ L ) , 进样 5 次, 测得峰面积积分值
RSD= 0. 26%( n= 5)。
·618· 中草药 Chinese T raditional and Herbal Drug s 2002 年第 33卷第 7期
收稿日期: 2001-10-31
2. 5 重现性试验:对于同一批供试品,分 5次取样,
每次精密称取 50 mg, 测定小檗碱含量, RSD =
2. 68% ( n= 5)。
2. 6 稳定性试验: 对于同一批供试品溶液, 按含量
测定方法,连续 5次进样,每次间隔 12 h,测定小檗
碱含量, RSD = 0. 35% ( n= 5)。
2. 7 回收率试验:采用加样回收法。对已知含量的
5批供试品, 分别取样并相应添加盐酸小檗碱对照
品测定, 计算回收率, 得其平均值为 99. 48%,
RSD= 0. 81% ( n= 5)。结果表明, 本品有良好的回
收率。
2. 8 供试品溶液的制备及测定:取本品 20片, 除去
薄膜衣, 研细,精密称取细粉约 50 mg , 置于具塞锥
形瓶中, 精密加入 50%乙醇 25 mL, 超声处理 60
min,放冷,微孔滤膜过滤,即得供试品溶液。分别吸
取对照品及供试品液, 注入高效液相色谱仪,测定峰
面积积分值, 按外标法计算含量(见表 1)。
3 讨论
本实验采用高效液相色谱法, 对金芪降糖片中
有效成分小檗碱进行了成功的定量分析。该方法精
密度高、重现性好。提取方法以 50%乙醇超声提取
60 m in为最佳。分别以乙腈-0. 05 mol/ L 磷酸二氢
钠溶液( pH= 3. 0) ( 3∶7)和乙腈-0. 05 mo l/ L 磷酸
二氢钠( pH= 4. 0) -十二烷基磺酸钠溶液( 45∶55∶
0. 2, mL/ mL/ g )为流动相, 其分离效果无明显差
异, 但前者的出峰时间较短。溶液的 pH 值越低, 小
檗碱的出峰时间越短, 但 pH= 3. 0 左右, 小檗碱与
其它成分分离效果最佳。乙腈的质量对小檗碱出峰
时间有影响,但不影响小檗碱与其它成分的分离。
表 1 金芪降糖片中小檗碱的含量测定结果
批 号 含量( mg/ g )
9911097 13. 9
9911098 13. 6
9911099 13. 2
9910086 14. 3
9910088 15. 2
参考文献:
[1] 孟令杰,阎汝南,陈定一,等 . 反相高效液相色谱法测定黄连中
成药小檗碱、黄连碱和巴马汀的含量[ J] . 中成药, 1989, 11
( 12) : 11-12.
[2] 王俊秋 . 消渴愈糖胶囊含量测定方法研究[ J ] . 中国现代应用
药学杂志, 1998, 4( 15) : 48.
[3] 卢 萍,郑俊华,果德安,等 . 黄连愈伤组织的诱导及小檗碱和
药根碱的含量测定[ J] . 药物分析杂志, 1998, 18( 2) : 101-104.
薄层扫描法测定长安升白颗粒中小檗碱的含量
张旭香,张兴运, 许志红
(西安正大制药有限公司,陕西 西安 710043)
长安升白颗粒是由黄芪、黄连、鸡血藤等 14味
中药制成的复方制剂, 具有益气补血、健脾补肾、活
血通络之功效。其中黄连为本方中重要药材之一,因
此,本研究采用薄层扫描法对黄连中小檗碱(转换成
盐酸小檗碱)的含量进行了测定。
1 仪器与试药
日本岛津 CS-930薄层扫描仪, 盐酸小檗碱对
照品(中国药品生物制品检定所) ,长安升白颗粒(西
安正大制药有限公司) ,硅胶 G(青岛海洋化工厂) ,
其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 供试品溶液的制备:取样品 1 g, 精密称定,置
磨口三角瓶中,加盐酸-甲醇( 1∶100)溶液 20 mL,
超声提取 30 m in, 滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇溶解
并定容于 5 mL 容量瓶中,摇匀,即得。
2. 2 对照品溶液的制备:精密称取盐酸小檗碱对照
品适量,加甲醇制成 0. 5 mg/ mL 的溶液。
2. 3 薄层色谱条件及扫描条件[ 1] :吸附剂:硅剂 G
板( 105℃活化 30 min) ;展开剂:苯-醋酸乙酯-甲醇-
异丙醇-浓氨( 6∶3∶1. 5∶1. 5∶0. 5) ,且在展开槽
中加入等体积浓氨试液, 预平衡 15 min。展距 12
cm, 紫外线检出器下显色。采用双波长荧光线性扫
描法, S= 366 nm , R= 400 nm , SX= 3。
2. 4 标准曲线的制备: 精密吸取对照品溶液 0. 2,
1. 0, 2. 0, 3. 0, 4. 0 L,点于同一薄层板上,按上述条
件展开显色,扫描测定。以点样量对斑点荧光强度积
分值进行回归, 得回归方程 Y = 3 821. 02X +
838. 97, r= 0. 999 2,线性范围 0. 10～2. 00 g。
2. 5 稳定性试验:对展开后样品中的盐酸小檗碱每
隔一定时间测量一次斑点的荧光强度积分值, 结果
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收稿日期: 2001-12-11