全 文 ：References:
[1 ]　 Li Y F, Li J, Zhang J M . Th e m edicinal v alue s tud y of the
xylem part of Paeonia suf f rut ion Andr.— quali tative and
quanti tativ e analysis of paeoni florin [ J] . Chin Tradi t Herb
Drugs (中草药 ) , 1994, 25 ( 11): 580-581.
[2 ]　 Gao L X, Liang S Q, Wang L, et al . Th e reversed phase
TLC analysis of paeonol and paeoni florin in Paeonia suf f ru-
t ion Andr. [ J] . J Shandong Col l Tradi t Ch in Med (山东中医
学院学报 ) , 1995, 19 ( 4): 266.
[3 ]　 Shan W H, Zhang L, Shi Y Z, et al . Th e influence of precipi-
tation at dif ferent ethanol concen tration on paeoni florin con-
tent in Paeonia suf f r ution And r. [ J ]. Lishizhen Med Mater
Med Res (时珍国医国药 ) , 1998, 9( 4): 320-321.
三花龙胆不同部位龙胆苦苷的含量测定
江蔚新 ,沈志滨 ,王雪莲 ,李镜飞 ,江　淼
(哈尔滨商业大学 制药工程系 ,黑龙江 哈尔滨　 150076)
　　三花龙胆为龙胆科植物三花龙胆 Gentiana tri-
f lora Pall. 的干燥根及根茎。为常用药用龙胆的主
流之一。龙胆味苦 ,性寒 ,入肝胃经 ,有泻肝火 ,除下
焦湿热的功效。龙胆中均含有链环烯醚萜苷类苦味
成分龙胆苦苷 ,药理研究表明 ,龙胆提取物有保肝、
健胃、利胆、利尿及降压、抗炎、抗菌作用。 近年由于
大量采挖使得野生资源减少 ,为满足用药 ,进行了大
量的人工栽培 [1 ]。龙胆在传统用药中一般只是用根 ,
而大量的地上部分资源未被利用。为了更好地综合
利用龙胆全草药材资源 ,我们对其地上部分有效成
分龙胆苦苷的含量进行了研究。 关于龙胆苦苷含量
测定的方法 ,有薄层层析-紫外分光光度法、薄层色
谱 -光密度法、高效液相色谱法等 [2～ 4 ]。 本研究利用
高效液相法对三花龙胆不同部位龙胆苦苷的含量进
行了测定。
1　材料
1. 1　仪器: Waters高效液相色谱仪 (美国 ) ; Waters
SPD-10A紫外检测器 ; 色谱柱 ( 4. 6 mm× 200
mm) ; 10μL进样器 ( Sw itzerland)。
1. 2　试药:龙胆苦苷对照品 (中国药品生物制品检
定所 ) ;三花龙胆 (哈尔滨市郊区 )经哈尔滨商业大学
沈志滨副教授鉴定。甲醇 (色谱纯 ) ,无水乙醇、三氯
甲烷、乙酸乙酯、蒸馏水、石油醚。
2　含量测定
2. 1　色谱条件: 色谱柱: Hypersil C18柱 ;流动相:甲
醇 -水 ( 35∶ 65) ;柱温:室温 ;流速: 0. 7 mL /min;检
测波长: 274 nm。
2. 2　线性考察: 精密称取龙胆苦苷对照品 10. 00,
5. 00, 4. 00, 0. 40 mg ,加甲醇溶解 ,分别定容于 25,
25, 250 mL容量瓶中 ,摇匀 ,用微孔滤膜过滤 ,取 10
μL进样 ,以峰面积对浓度回归 ,回归方程为 Y= 5.
45× 105+ 6. 39× 106X , r= 0. 999 8,表明在 0. 16～ 4
μg呈良好的线形关系。
2. 3　精密度实验:取同一样品液 ,按前面所进行的
含量测定法来进行操作 ,反复进样 5次 ,其峰面积的
RSD为 0. 36%。
2. 4　稳定性实验: 取同一样品液 ,在相同的色谱条
件 ,取 10μL,每隔 20 min进一次样 ,峰面积的 RSD=
0. 64% ,考察结果表明 ,样品液在 100 min内稳定性
良好 ,可在 100 min内进行测定。
2. 5　重复性测定: 取龙胆地上粉末约 0. 5 g共 5
份 ,按拟定的提取方法进行含量测定 ,计算龙胆苦苷
含量的平均值为 0. 3917% , RSD= 1. 31% (n= 5)
2. 6　加样回收率实验:称取龙胆地上部分粉末药材
约 0. 5 g共 5份 ,依次分别加入对照后 ,依照前述提
取方法提取、测定 ,平均回收率为 98. 14% , RSD为
1. 11% (n= 5)
2. 7　样品的含量测定
2. 7. 1　样品的制备:分根、茎、花、地上部分 ,在 40
℃～ 50℃干燥至恒重 ,粉碎 ,过 40目筛。 分别称取
根、茎、花、地上粉末药材 5. 00 g ,用石油醚脱脂 3
次 ,药材晾干 ,分别加入药材的 8倍量的甲醇 ,于 50
℃水浴锅中恒温加热 1～ 2 h,过滤 ,再重复 2次 ,过
滤 ,合并 3次滤液 ,离心取上清液 ,减压回收甲醇 ,转
移到 10 m L容量瓶中用甲醇进行定容 ,摇匀。
2. 7. 2　含量测定: 各吸取根、茎、花、地上 0. 5 mL
的样品溶液 ,茎、花、地上样品液分别定容于 10 mL
容量瓶中 ,根样品液定容于 100 m L容量瓶中 ,微孔
·272· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 3期 2003年 3月
收稿日期: 2002-07-22基金项目:黑龙江省自然基金资助项目 ( C00-28) ;黑龙江省教委骨干教师项目作者简介:江蔚新 ( 1957- ) ,男 ,辽宁省辽中县人 ,硕士 ,哈尔滨商业大学制药工程系副教授 ,主要研究方向为天然药物化学。
滤膜过滤 ,分别吸取 10μL进样 ,结果如表 1。
3　讨论
　　采用高效液相色谱法测定龙胆不同部位中龙胆
表 1　龙胆苦苷的含量
Table 1　Content of gent iopicroside
部位 含量 /%
根 6. 992
地上 0. 398
茎 0. 160
花 0. 132
苦苷含量方法样品处理简单、快捷、方便、精确、稳
定。首次对龙胆不同部位含量进行了测定 ,为龙胆地
上部分的应用提供了理论基础 ,在试验中发现 ,某一
时期地上部分有效成分有向地下输送的趋势 ,此现
象正在研究中。
References:
[1 ]　 Xu J, Peng H, Yang W L. Quanti tative determination of ge-
n tiopicroside in Long dan Xiegan Pill ( a preparation mode
f rom Chinese materia medica) by HPLC-pho toelect ric-diole
mat rix detector [ J] . Chin Tradi t Herb Drugs (中草药 ) ,
1999, 30( 5) , 348-349.
[2 ]　 Sakamamoto I. Application of high performance liquid ch ro-
matog rapgy and field d eso rp tion mass spect roscopy to s erra-
tiv e analysis of bi t ter secoiridoid glucosid es of Swertia Her-
ba. [ J] . Chem Pharm Bul l , 1983, 31: 25.
[ 3 ]　 Takion Y. Quanti tative determination of bi t ter com ponen ts in
Gent ianaceous plants [ J] . Plan ta Med , 1980, 38: 334.
[ 4]　Van der s luis W G. Secoi rid oid s and xan thones in the g enus
Gentaurium . [ J] . Plan ta Med , 1981, 41: 225.
不同贮藏条件对地黄中梓醇含量的影响
李俊萍 1 ,周福军 2 ,贾建伟 1 ,袁桂玉 1
( 1. 天津传染病医院 ,天津　 300192;　 2. 天津药物研究院 ,天津　 300193)
　　地黄为玄参科植物地黄 Rehmania glutinosa
( Gaertn. ) Libosch. ex Fisch. et M ey. 的块根。临
床上用药分鲜地黄、干地黄及熟地黄 3种 ,鲜地黄偏
于寒 ,具有清热生津之功效 ,干地黄凉血止血 ,熟地
黄则滋阴补血。鲜地黄与干、熟地黄功效不同 ,临床
应用也各异 ,临床上经常应用鲜地黄 ,但贮藏很困
难 ,对此我们采用几种方法进行比较 ,以地黄中所含
有效成分之一梓醇作为指标 ,应用 HPLC法对不同
贮藏条件后的地黄中梓醇含量进行了测定 ,结果砂
埋方法优于其他几种贮藏方法 [ 1, 2 ]。
1　实验材料
1. 1　药材:鲜地黄 ,天津传染病医院提供 ,经鉴定为
玄参科植物地黄 R. glutinosa ( Gaerth. ) Libosch.
ex Fisch. et M ey. 的块根。
1. 2　仪器: HP1100液相色谱仪 , HP1100色谱工作
站 , G1310泵 , G1313A自动进样器 , G1316A柱温箱 ,
G1314A紫外检测器。 色谱柱: 4. 6 mm× 250 mm不
锈钢柱 ,填料为十八烷基硅烷键合硅胶 ( 5μm)。
1. 3　试剂:乙腈为色谱纯 ,水为超纯净水。
1. 4　梓醇对照品: 购自中国药品生物制品检定所 ,
归一化法测定含量> 98%。
2　贮藏方法
( 1)砂埋:新采挖的地黄摊晾 3 d,表皮稍干 ,用
较湿润的河砂埋藏 ,一层砂一层鲜地黄排放四层 ,堆
高度 35 cm。 ( 2)冷藏:鲜地黄洗净 ,理齐 ,每袋 1 kg
用聚乙烯薄膜袋封袋 ,放入冷藏柜内冷藏保存 ,冷藏
温度 4℃～ 8℃。 ( 3)冷冻:鲜地黄洗净 ,理齐 ,每袋
1 kg用聚乙烯薄膜袋封装 ,放入冷冻柜内冷冻保
存 ,冷冻温度- 8℃～ - 2℃。
3　测定方法和结果 [3 ]
3. 1　对照品的制备: 精密称取梓醇对照品 6 mg,
置 20 m L量瓶中 ,加 1%乙腈水溶解并稀释至刻度 ,
摇匀 ,作为对照品溶液 ( 0. 3 mg /m L)。
3. 2　供试品的制备:将砂埋鲜地黄、冷藏鲜地黄和冷
冻鲜地黄进行冷冻干燥 ,得到干品。再将各种地黄分
别粉碎成细粉 ,过 80目筛。精密称各样品 0. 5 mg ,分
别置 150 mL三角瓶中 ,加甲醇 100 mL,精密称定重
要 ,超声提取 0. 5 h后 ,补足重量 ,滤过 ,取续滤液适
量 ,以 0. 45μm微孔膜滤过 ,作为供试品溶液。
3. 3　色谱条件:色谱柱: 4. 6 mm× 250 mm不锈钢柱;
填料为十八烷基硅烷键合硅胶 ( 5μm);流动相: 2%乙腈
(下转附 5页 )
·273·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 3期 2003年 3月
收稿日期: 2002-08-12作者简介:李俊萍 ( 1953— ) ,女 ,天津市人 ,副主任药师 ,大专毕业 , 1969-03— 1987-12在中国人民解放军第 285医院工作 , 1988-01至今在天津传染病医院药剂科工作 ,研究方向为传染病临床用药。