全 文 ：溶液 ,最终选用甲醇-水 -磷酸 ( 87∶ 13∶ 0. 2)为流动
相 ,结果 20( S ) -人参皂苷 Rh2峰与其它峰完全达到
基线分离 ,使定量结果准确。
RP-HPLC法测定翳障消胶囊中黄芩苷的含量
彭　勋 1 ,韩晓燕1 ,温　敏2 ,单国存 2 ,刘静洁 2
( 1. 秦皇岛市第三医院 ,河北 秦皇岛　 066000; 2. 秦皇岛市药品检验所 ,河北 秦皇岛　 066000)
中图分类号: R286. 02　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 03 0230 02
　　翳障消胶囊由柴胡、黄芩、菊花等中药制成 ,具
有疏散风寒、退赤消翳之功效 ,用于治疗角膜炎、角
膜溃疡等 ,疗效较好。 针对处方中的黄芩 ,本实验采
用高效液相色谱法进行了黄芩苷的含量测定 [ 1～ 3]。
1　仪器与试药
SP-8810高效液相色谱仪 , Spect ra 100型 UV-
Vis检测器 , TL9900色谱工作站。黄芩苷对照品 (含
量测定用 ,中国药品生物制品检定所 ,批号 715-
200010)。翳障消胶囊为秦皇岛市中医院生产。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件: 色谱柱: Kromasi l C18 ( 200 mm×
4. 6 mm, 5μm);流动相: 甲醇 -水 -磷酸 ( 50∶ 50∶
0. 3) ,流速为 1. 0 mL /min,检测波长为 280 nm,柱
温: 30℃ ,理论板数按黄芩苷峰计算应不低于 3
500。
2. 2　对照品溶液的制备:精密称取在 60℃减压干
燥 4 h的黄芩苷对照品适量 ,加甲醇制成每 1 mL含
60μg的溶液 ,作为对照品溶液。
2. 3　供试品溶液的制备: 取本品 10粒内容物 ,混
匀 ,精密称取 0. 75 g ,置 100 mL量瓶中 ,加 50%甲
醇适量 ,超声处理 30 min,放冷 ,加 50%甲醇稀释至
刻度 ,摇匀 ,滤过 ,弃取初滤液 ,取续滤液作为供试品
溶液。
2. 4　阴性对照液的制备:制不含黄芩的阴性制剂样
品 ,按供试品制备的方法制备阴性对照液。
2. 5　线性关系考察: 精密称取在 60℃减压干燥 4 h
的黄芩苷对照品 11. 30 mg ,置 100 mL量瓶中 ,加甲
醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,精密吸取此溶液用甲醇
稀释并配制成每 1 m L含黄芩苷 2. 26, 11. 3, 33. 9,
56. 5, 90. 4μg的对照品溶液。分别吸取 10μL,按上
述色谱条件测定 ,以峰面积积分值为纵坐标 ,黄芩苷
量为横坐标 ,绘制标准曲线 ,回归方程为: Y= 482
062. 8+ 592 681. 8X , r= 0. 999 8,线性范围 2. 26～
90. 4μg。 见图 1。
A-对照品　 B-样品　 C-阴性对照　* -黄芩苷
图 1　翳障消胶囊的 HPLC图谱
2. 6　精密度试验: 吸取对照品溶液 ( 56. 5μg /mL)
10μL,重复进样 5次 ,测定峰面积积分值 ,结果
RSD为 1. 48% 。
2. 7　稳定性试验:取供试品溶液 ,分别于制备后 0,
1, 2, 4, 6, 8, 12 h依法测定 ,结果 RSD为 1. 71%。
2. 8　加样回收试验:精密称取已知含量的供试品粉
末约 0. 1 g。精密称定 ,置 100 mL锥形瓶中 ,精密加
入对照品溶液 2 mL,在水浴中加热至对照品的溶剂
(甲醇 )挥尽 ,按供试品溶液制备方法制备 ,测定 ,计
算回收率 ,结果平均回收率为 99. 79% , RSD 为
1. 1% (n= 6)。
2. 9　空白对照液的制备与测定: 除黄芩外 ,按处方
比例称取其他各味药材 ,制成不含黄芩的制剂 ,与供
试品同法制成阴性对照液 ,测定 ,见图 1。 说明其他
药材及辅料均不干扰黄芩苷的测定。
2. 10　样品的测定:分别精密吸取供试品溶液各 10
μL,依上述色谱条件测定 ,结果见表 1。
·230· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 3期
收稿日期: 2001-08-07
表 1　样品中黄芩苷的含量 (n= 4)
批　号 黄芩苷的含量 ( mg /粒 ) R SD (% )　　　
000608 　　 2. 630 0 1. 89　　　
000702 2. 568 0 1. 01　　　
000805 2. 690 0 1. 46　　　
000903 2. 602 5 1. 20　　　
001006 2. 628 0 1. 34　　　
001105 2. 686 5 1. 30　　　
3　讨论
翳障消胶囊由于处方药味较多 ,成分复杂 ,生产
单位一直未建立产品的质量标准 ,我们建立了操作
简便的黄芩苷的含量测定方法 ,使其质量标准更趋
向科学化、规范化。
考虑到原药材的产地不同 ,投料时的药用部位
不同 ,以及储藏条件、仪器和操作误差等因素 ,将 6
批样品测得的含量进行换算 ,得该药的最低含量限
量 ,即每粒含黄芩苷应不少于 2. 327 9 mg。
参考文献:
[1 ]　中国药典 [ S] . 2000年版 .一部 .
[ 2]　郭绪林 ,王铁军 ,刘燕萍 ,等 .反相高效液相色谱法测定耳聋胶囊
和其丸剂中黄芩苷的含量 [ J] .中国中药杂志 , 2000, 25( 2): 93.
[3 ]　刘令勉 ,郭贵强 . 用聚酰胺薄膜分离复方制剂中黄芩苷及其定
量方法 [ J] .中草药 , 1986, 17( 9): 13.
HPLC法测定妇科十味片中芍药苷的含量
汤子孝1 ,王旭东2 ,王利宾 2
( 1. 玉溪市人民医院 ,云南 玉溪　 653100; 2. 成都康弘制药有限公司 ,四川 成都　 610041)
中图分类号: R286. 02　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 03 0231 02
　　妇科十味片收载于部颁标准中药成方制剂中 ,
由香附、当归、赤芍、白芍及元胡等 10味中药制成 ,
具有舒肝理气 ,养血调经的功能。 本文采用 HPLC
法测定其中赤芍、白芍中芍药苷的总量 ,以控制产品
质量。
1　仪器与试剂
惠普 HP1100高效液相色谱仪 , HP1100紫外检
测器 ;芍药苷对照品 (中国药品生物制品检定所提
供 ,批号: 0736-200014,供含量测定用 ) ;乙腈为色谱
纯 ,其它试剂均为分析纯 ;妇科十味片由成都康弘制
药有限公司提供。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件: 色谱柱: Inertsi l ODS-3 C18柱 ( 150
mm× 4. 6 mm , 5μm );流动相: 乙腈 -水 -冰醋酸
( 14∶ 85. 2∶ 0. 8) ;流速: 1. 0 m L /min;检测波长:
230 nm;柱温: 30℃ ;进样量: 10μL。
2. 2　对照品溶液的制备: 精密称取芍药苷对照品
19. 33 mg ,用甲醇溶解定容至 100 mL,作为贮备
液 ,分别精密吸取此贮备液 ,加甲醇稀释配制成浓度
为 4. 83, 9. 96, 19. 33, 48. 32, 96. 65μg /mL的溶液。
2. 3　供试品溶液及阴性对照品溶液的制备: 取本
品 ,除去膜衣后 ,研细 ,精密称取 1. 5 g ,置 50 mL具
塞锥形瓶中 ,精密加入甲醇 25 mL,密塞 ,称定重量 ,
浸泡 1 h,超声处理 40 min,放冷 ,用甲醇补足减失
的重量 ,摇匀 ,离心 ( 10 000 r /min) ,取上清液 ,用微
孔滤膜 ( 0. 45μm)滤过 ,取续滤液作为供试品溶液。
按妇科十味片处方和制法 ,制成缺赤芍和白芍的阴
性溶液。 按上述色谱条件测定 ,绘制芍药苷对照品、
供试品和阴性对照品的色谱图 ,在供试品色谱图中 ,
与对照品色谱相应位置上有一相同保留时间的色谱
峰 ,而阴性对照溶液在此保留时间无干扰 (见图 1)。
2. 4　标准曲线与线性范围: 取上述各对照品溶液
10μL依次进样 ,记录色谱图 ,以峰面积值为纵坐
标 ,进样量为横坐标 ,绘制标准曲线 ,回归方程为:
Y= 1 249. 37X+ 0. 878 26, r= 0. 999 99。
2. 5　精密度试验: 精密吸取同一对照品溶液 10
μL,重复进样 6次 ,测定芍药苷的含量 ,结果 RSD
为 1. 04%。
2. 6　重复性试验:取同一批样品 6份 ,分别按供试
品溶液制备方法制备 ,测定其芍药苷的峰面积 ,
RSD为 1. 00% 。
2. 7　加样回收率试验: 精密称定供试品 (含量为
0. 100 4% ) 0. 75 g ,加入芍药苷对照品适量 ,按供试
品溶液制备方法制备 ,并按上述色谱条件测定 ,计算
加样回收率。 平均回收率为 99. 18% , RSD 为
1. 38% (n= 9)。
·231·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 3期
收稿日期: 2001-08-09