全 文 ：HPLC 法研究配伍对麻黄汤中苦杏仁苷含量的影响
吴昭晖, 罗佳波, 胡晓添Ξ
(第一军医大学 中药新药研究重点实验室, 广东 广州　510515)
摘　要: 目的　建立H PL C 法测定麻黄汤各配伍煎液中苦杏仁苷含量的分析方法, 研究配伍对汤剂中苦杏仁苷含
量的影响。方法　采用L 8 (27)正交设计和统计方法 (统计软件 SPSS 10100) , 以H PL C 法测定苦杏仁苷的含量。结
果　该法简便、准确、灵敏, 复方中其他成分对测定无干扰, 可用于麻黄汤中苦杏仁苷的含量测定, 麻黄、桂枝、甘草
对方中苦杏仁苷含量的影响差异不存在显著性, 两两交互作用差异不具有显著性。结论　麻黄、桂枝、甘草对麻黄
汤中苦杏仁苷含量影响没有显著性。
关键词: 麻黄汤; 配伍; 苦杏仁苷; 高效液相色谱
中图分类号: R 28312; R 2861022　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 03 0269 03
Study on inf luence of com pa tib il ity on am ygda l in in M ahuang D ecoction 3 by HPLC
W U Zhao2hu i, LUO J ia2bo , HU X iao2t ian
(Key L abo rato ry of R esearch of T radit ional Ch inese M edicine and N ew D rug,
F irst M ilitary M edical U niversity, Guangzhou 510515, Ch ina)
Abstract: Object　To set up the quan t ita t ive m ethod of am ygdalin in decoct ion s p repared from variou s
com b inat ion s of the recipe nam ed M ahuang D ecoct ion by H PL C and to determ ine the change of am ygdalin
con ten ts in differen t decoct ion s and study the influence of compat ib ility on the con ten ts of am ygdalin in de-
coct ion s. M ethods　By L 8 (27) o rthogonal design and sta t ist ic analysis (SPSS 1010) , eigh t decoct ion s w ith
S em en A rm en iacae A m a rum w ere p repared and analyzed, their am ygdalin con ten ts w ere determ ined by
H PL C. Results　T he m ethod w as simp le, accu ra te, and sen sit ive and w as no t in terfered by o ther con2
st ituen ts in the p rescrip t ion, it can be u sed to determ ine the con ten ts of am ygdalin in M ahuang D ecoct ion.
Influence of H erba Ep hed rae, R am u lus C innam om in , and R ad ix G ly cy rrh iz ae on the con ten ts of am ygdalin
in decoct ion s w ere in sign if ican t. In teract ion s betw een tw o of th ree separa tely w ere in sign if ican t too. Con2
clusion 　T he con ten t of am ygdalin in M ahuang D ecoct ion is no t m arkedly influenced by H erba Ep hed rae,
R am u lus C innam om in , and R ad ix G ly cy rrh iz ae.
Key words: M ahuang D ecoct ion; compat ib ility; am ygdalin; H PL C
　　3 M ahuang D ecoct ion is a Ch inese herbal p rescrip t ion. It is compo sed of H erba Ep hed rae, R am u lus
C innam om in , S em en A rm en iacae A m a rum , and R ad ix G ly cy rrh iz ae
　　麻黄汤出自《伤寒论》, 由麻黄 9 g、桂枝 6 g、苦
杏仁 6 g、甘草 3 g 组成, 具有发汗解表、宣肺平喘之
功效。麻黄汤药味不多, 组方简明, 麻黄为君药, 桂枝
为臣药, 杏仁为佐药, 甘草为使药。苦杏仁苷是苦杏
仁的主要效应成分, 但苦杏仁苷在方中的地位作用
如何? 麻黄汤中君药、臣药、使药对佐药的主要效应
成分苦杏仁苷有何影响? 这方面的研究尚未见文献
报道。本实验以苦杏仁苷为指标成分, 采用H PL C
法测定麻黄汤各配伍水煎液中苦杏仁苷含量的变
化, 从佐药苦杏仁的主要效应成分苦杏仁苷的变化
层面上阐述麻黄汤配伍的意义, 为深入研究麻黄汤
配伍规律提供依据, 并为以麻黄汤为基础的中药新
制剂和新剂型研究提供参考。
1　仪器与试药
美国惠普 H P1100 高效液相色谱仪2UV 可变
波长检测器; 甲醇 (色谱纯和分析纯) ; 苦杏仁苷对照
品 (中国药品生物制品检定所, 批号 8202200002) ;
麻黄为麻黄科植物草麻黄 Ep hed ra sin ica Stap f 的
干燥草质茎, 桂枝为樟科植物肉桂 C innam om um
cassia P resl. 的干燥嫩枝, 苦杏仁为蔷薇科植物山杏
P runus a rm en iaca L. var. ansu M ax im. 的干燥成
熟种子, 甘草为豆科植物甘草G ly cy rrh iz a u ra lensis
·962·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 3 期 2004 年 3 月
Ξ 收稿日期: 2003209205
基金项目: 国家自然科学基金重点资助项目 (30030150) : 麻黄汤配伍规律的研究
作者简介: 吴昭晖 (1964—) , 女, 福建省漳州市人, 1985 年厦门大学化学系毕业, 现为第一军医大学中药新药研究重点实验室高级工程
师, 研究方向为中药现代分析。T el: (020) 61648265
F isch. 的干燥根及根茎; 饮片购自广东省药材公司
中药饮片厂、广州市执信药业有限公司, 经第一军医
大学中医系刘传明讲师鉴定。
2　方法与结果
211　麻黄汤中苦杏仁苷含量的测定
21111　色谱条件: 色谱柱: H ypersil OD S 柱 (410
mm ×250 mm , 5 Λm ) ; 流动相: 甲醇2水 (15∶85) ; 流
速: 015 mL öm in; 柱温: 35 ℃; 检测波长: 210 nm ; 进
样体积: 10 ΛL。
　　按上述色谱条件, 取苦杏仁苷对照品溶液、麻黄
汤全方与缺苦杏仁阴性对照溶液各进样 10 ΛL , 结
果见图 1。苦杏仁苷与杂质峰达到基线分离, 麻黄、
桂枝、甘草对苦杏仁苷测定无干扰。3 2苦杏仁苷3 2am ygdalin
图 1　苦杏仁苷对照品 (A)、麻黄汤全方 (B)和
缺苦杏仁阴性对照 (C)的 HPLC 图谱
F ig. 1　HPLC chromatogram s of amygdal in reference
substance (A) , M ahuang D ecoction (B) , and
negatine sample without H erba Ep hed rae (C)
21112　对照品溶液的制备: 精密称取苦杏仁苷对照
品适量, 用 80% 甲醇配制得 01503 m gömL 的苦杏仁
苷对照品贮备液。精密移取对照品贮备液适量, 用流
动相稀释, 得 10016 ΛgömL 的苦杏仁苷对照品溶液。
21113　供试品溶液的制备: 按正交设计取组成含苦
杏仁的 8 个配伍组方, 分别称取 3 付汤剂剂量各组
方配伍的药材 (苦杏仁除外) 置于三颈烧瓶中, 加水
1 000 mL , 浸泡 30 m in, 加热回流 30 m in 时, 迅速加
入 3 付汤剂剂量的苦杏仁, 继续回流 20 m in。停止
加热, 取出烧瓶, 摇匀, 即得各配伍水煎液。精密移取
各配伍水煎液 5 mL 于 25 mL 量瓶中, 加甲醇至刻
度, 摇匀。放置 2 h 后离心, 精密移取上清液 510 mL
于 10 mL 量瓶中, 加水至刻度, 摇匀。用 0145 Λm 微
孔滤膜滤过, 即得各配伍供试品溶液。
　　按上述方法制备不含苦杏仁的阴性对照溶液。
21114　标准曲线的制作: 取苦杏仁苷对照品贮备液
适 量, 分 别 配 制 成 10106, 5013, 10016, 20112,
40214, 50310 ΛgömL 系列溶液, 分别进样 10 ΛL , 测
定峰面积。以峰面积 Y 对进样量X 进行线性回归,
得回归方程: Y = 21003 445X - 181072 588, r =
01999 99。结果表明苦杏仁苷在 01101～ 51030 Λg
与峰面积线性关系良好。
21115　精密度试验: 精密吸取对照品溶液 10 ΛL ,
重复进样 6 次, 结果苦杏仁苷峰面积 R SD 为
0125%。
21116　重现性试验: 取麻黄汤全方水煎液 1 份, 按
21113 项下“精密移取⋯⋯用 0145 Λm 微孔滤膜滤
过”平行制备 5 份麻黄汤全方供试品溶液, 依法测
定, 结果苦杏仁苷峰面积R SD 为 1126%。
21117　稳定性考察: 取麻黄汤全方供试品溶液, 分
别在制备后 0, 2, 4, 8, 12, 24 h 测定, 结果苦杏仁苷
峰面积R SD 为 1188% , 表明 24 h 内溶液稳定。
21118　回收率试验: 平行移取已知含量的麻黄汤全
方水煎液 5 份, 分别加入苦杏仁苷对照品贮备液
117 mL , 依法操作, 测定, 结果平均回收率为
9815% , R SD 为 1117%。
21119　样品测定: 按上述色谱条件分别对各配伍供
试品溶液进行测定, 采用外标法计算。
212　配伍对麻黄汤中苦杏仁苷含量的影响
21211　正交设计: 选麻黄 (因素A )、桂枝 (因素B )、
甘草 (因素 C) 作为 3 个因素, 选用药和不用药为 2
个水平, 因素水平见表 1。
表 1　因素水平表
Table 1　Factors and levels
水平
因　　素
A B C
1 用药　 用药　 用药　
2 不用药 不用药 不用药
21212　实验安排: 考虑两两交互作用的L 8 (27)进行
实验安排, 测定, 结果见表 2。
表 2　L 8 (27)正交设计及结果 (n= 3)
Table 2　L 8 (27) orthogonal design and result (n= 3)
　配　　伍 A B A ×B C A ×C B×C 空白
苦杏仁苷ö(m g·剂- 1)
麻黄汤全方 1 1 1 1 1 1 1 222. 5
杏仁+ 麻黄+ 桂枝 1 1 1 2 2 2 2 222. 1
杏仁+ 麻黄+ 甘草 1 2 2 1 1 2 2 222. 2
杏仁+ 麻黄 1 2 2 2 2 1 1 241. 4
杏仁+ 桂枝+ 甘草 2 1 2 1 2 1 2 228. 4
杏仁+ 桂枝 2 1 2 2 1 2 1 227. 4
杏仁+ 甘草 2 2 1 1 2 2 1 215. 5
杏仁 2 2 1 2 1 1 2 228. 8
21213　统计分析: 采用 SPSS 1010 统计分析软件,
结果表明麻黄、桂枝、甘草对苦杏仁苷含量的影响差
·072· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 3 期 2004 年 3 月
异无显著性, 且两两交互作用影响差异也不显著。
21214　配伍规律: 麻黄汤各组方配伍, 对佐药苦杏
仁的主要效应成分苦杏仁苷的影响具有一定的规律
性。从表 2 可以看出: 当麻黄与苦杏仁配伍时, 麻黄
可增加汤剂中苦杏仁苷的含量, 但影响不显著, 相应
苦杏仁亦增加麻黄碱的含量[1 ] , 提示麻黄与苦杏仁
的配伍可增强药效, 佐药苦杏仁与君药麻黄配伍是
合理的, 与中医组方理论的相须、相使配伍一致; 当
甘草与苦杏仁配伍时, 甘草可降低汤剂中苦杏仁苷
的含量, 但影响差异不显著, 提示甘草可通过降低苦
杏仁苷的含量而降低苦杏仁的毒性, 从而起到调和
药性, 降低毒性的作用; 而桂枝与苦杏仁配伍, 对苦
杏仁苷几乎没有影响。统计分析结果表明: 麻黄、桂
枝、甘草对麻黄汤中苦杏仁苷含量影响差异没有显
著性, 且两两交互作用不显著。
21215　关于新物质: 在本实验条件下, 各组合配伍
没有发现新物质色谱峰。
3　讨论
311　测定方法选择:《中华人民共和国药典》2000
年版一部采用滴定方法间接测定苦杏仁中苦杏仁苷
含量, 操作烦琐, 灵敏度低。针对中药复方汤剂中成
分复杂的情况, 本实验采用反相高效液相色谱法有
效地分离了复方中的各成分, 复方中其他成分对苦
杏仁苷测定无干扰, 该法简便、准确、灵敏, 可作为苦
杏仁药材及其制剂的质量监控方法。
312　流动相选择: 曾以不同比例的甲醇2水、乙腈2
水、甲醇2乙腈2水作为流动相, 结果发现流动相中加
入乙腈峰形变差, 而甲醇2水体系中苦杏仁苷的峰形
好, 故选择甲醇2水为流动相。
313　柱温选择: 曾将柱温设置为 25 ℃, 30 ℃, 35
℃, 发现柱温在 25 ℃时, 缺苦杏仁阴性对照溶液干
扰严重, 提高柱温, 可改变苦杏仁苷和干扰成分的选
择性, 当柱温为 35 ℃, 苦杏仁苷和干扰成分可达到
基线分离, 复方中其他成分对苦杏仁苷测定无干扰。
314　药材与取样: 针对中药材粗细大小不一、组份
在药材中含量不均的情况, 本实验除了对药材进行
剪切、捣碎等必要的处理, 鉴于单付处方剂量小, 引
入误差大, 还采用了每次煎煮 3 付药, 增加了取样
量, 降低了药材不匀的误差, 使取样更具代表性, 水
煎液制备的平行性更高, 使测定结果更准确地反映
出配伍因素引起的化学变化。
References:
[ 1 ]　L i J L , Chen F L , L iu C M , et a l. D eterm ination of ephedrine
and p seudoepherdrine in M A HUAN G TAN G by GC2M S and
effect of compatib le m edicinal herbs on concen tration of com 2
ponen ts in decoction [J ]1 Ch in T rad it H erb D rug s (中草药) ,
2002, 33 (4) : 30723091
阿克苏黄芪中多糖成分的分析
赵　文1, 黄亚东1, 任永凤2, 许　华1, 郑　青1Ξ
(11 暨南大学 医药生物技术研究开发中心, 广东 广州　510632;
21 新疆维吾尔自治区药物研究所, 新疆 乌鲁木齐　830002)
摘　要: 目的　分析阿克苏黄芪中多糖的组份及含量。方法　利用纸色谱分析了多糖组份并采用分光光度法测定
了多糖含量。结果　阿克苏黄芪多糖的组成为葡萄糖, 生药中多糖含量为 2110%。结论　阿克苏黄芪中所含多糖为
葡聚糖。同时测得其相对分子质量为 517×104。
关键词: 阿克苏黄芪; 多糖; 分光光度法
中图分类号: R 28411; R 286102　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 03 0271 03
Ana lysis of polysacchar ide in A straga lus aksuens is
ZHAO W en1, HUAN G Ya2dong1, R EN Yong2feng2, XU H ua1, ZH EN G Q ing1
(1. B iopharm aceu tical R esearch and D evelopm ent Cen ter of J inan U niversity, Guangzhou 510632, Ch ina;
2. X in jiang Inst itu te of M ateria M edica, U rum qi 830002, Ch ina)
Key words: A strag a lus aksuensis Bunge; po lysaccharide; spectropho tography
·172·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 3 期 2004 年 3 月
收稿日期: 2003206220
基金项目: 国家自然科学基金资助项目 (39660082)
作者简介: 赵　文 (1962—) , 女, 副研究员, 主要从事植物化学、天然药物和药物化妆品的研究。