免费文献传递   相关文献

HPLC法对不同地区商品牛蒡子中牛蒡苷元的定量分析



全 文 :表 1 绞股蓝和乌蔹莓茎 、叶解剖结构的区别
Table 1 Differences of stem and leaf anotomical structures
between G.pentaphyllum and C.japonica
序号 绞股蓝 乌蔹莓
1 幼茎横切面呈五角形 幼茎横切面呈 7~ 8角形
2 茎中有 10个双韧维管束 茎中 12~ 15个外韧维管束
3 皮层厚壁组织位于维管束
的外侧
皮层厚壁组织紧邻维管束
4 维管束宽大 ,后生木质部的
导管沿切向线排
维管束较狭窄 ,后生木质部
的导管沿径向线排列
5 叶中脉有 1个维管束 叶中脉有 4~ 5个维管束
6 在茎上卷须与叶对生 卷须生在近叶腋内
References:
[ 1]  Kang J N , Ding P L , Xu H Q , e t al.Clinical observation on 54
cases of def icient syndrome t reated w ith Gynostemma penta-
phyl lum oral liquid [ J] .Ch in Tradi t Herb Dr ugs (中草药),
1993 , 24(2):86.
[ 2]  Editorial Board of China Herbal, S tate Administ ration of T radi-
tional C hinese Medicine , China.China Herbal.(中华本草)
[ M] .Shanghai:Shanghai Science and Tech nology Publisher ,
1999.
[ 3]  Chen J G.Herbal textual research on “Wulianmei” [ J] .J Chin
Med Ma ter (中药材), 1993 , 16(3):39.
[ 4]  Ding B Z , Wang S Y.F lora of Henanica(河南植物志)[M ] .
Zhengzhou:Henan Science and Technology Publishing House ,
1998.
[ 5]  Zhou Z J , Tan D H.A study on ident ifica tion of 4 species of
Gynostemma in Guangxi [ J] .China J Chin Mate r Med(中国
中药杂志), 1989 , 14(4):10-14.
HPLC法对不同地区商品牛蒡子中牛蒡苷元的定量分析
王 劲1 ,沙 明1 ,杨洪武2 ,康廷国1 ,杨松松1
(1.辽宁中医学院 中药系 ,辽宁 沈阳 110032; 2.辽宁北方生物药业集团有限公司 ,辽宁 沈阳 110003)
  牛蒡子为菊科植物牛蒡 Arct ium lappa L.的
干燥成熟果实 ,是常用中药。始载于《名医别录》 ,名
曰恶实 ,列为中品。《本草图经》始称牛蒡子 ,别名大
力子 。现代历版《中华人民共和国药典》均收载。具
有疏散风热 、宣肺透疹 、解毒利咽的功能 ,用于风热
感冒 、咳嗽痰多 、麻疹 、风疹 、咽喉肿痛等[ 1] 。牛蒡
子含有木脂素类化合物 ,主要是牛蒡苷 、牛蒡苷元
等[ 2] 。药理研究表明 ,牛蒡子粗提物具抗肿瘤[ 3] 、
抗 Epstein-Barr(EB)病毒[ 4] 的作用;牛蒡苷元对免
疫性肾炎呈现抑制作用[ 5] , 并具有抗肾病变作
用[ 6] ,拮抗血小板活化因子(PAF)受体结合活性[ 7]
以及钙拮抗作用 , 是牛蒡子解表功能的有效成
分[ 8] 。
本实验采用 HPLC 法分别对辽宁 、黑龙江 、江
苏 、福建 、贵州等地区商品牛蒡子生品 、制品中牛蒡
苷元的含量进行了测定。以前曾报道过不同地区商
品牛蒡子中牛蒡苷的含量情况[ 9] ,因牛蒡苷与牛蒡
苷元均为牛蒡子中的活性成分 ,本研究将为多指标
控制牛蒡子药材的质量及其应用提供依据。
1 仪器与试药
LC-6A高效液相色谱仪(日本):包括 LC-6A 输
送泵;SPD-6A 可见-紫外检测器;C-R3A 数据处理
机;S IL-6A 自动进样器。CQ-250 超声波清洗器。
牛蒡苷元为自制 ,经光谱鉴定并经 HPLC 分析为单
一峰 ,纯度为 99.564 8%,5个地区的牛蒡子包括生
品和制品 ,经辽宁中医学院康廷国教授鉴定为 A .
lappa L.的干燥成熟果实 。
2 方法与结果
2.1 色谱条件:色谱柱为日本岛津Shim-pack CLC-
ODS 柱(6.0 mm ×150 mm , 5 μm);流动相:甲醇-
乙腈-0.025 mol/ L磷酸(40∶20∶40);流速:1.0 mL/
min;检测波长:270 nm;柱温:25 ℃;灵敏度:0.
02AUFS 。
2.2 标准曲线的制作:精密称定干燥至恒重的牛蒡
苷元对照品 1.26 mg 置 100 mL 量瓶中 ,加甲醇溶
解并定容至刻度 ,使对照品浓度为0.012 6 mg/mL。
精密吸取对照品溶液 5 , 10 , 15 ,20 ,25 μL 分别注入
高效液相色谱仪 ,测定牛蒡苷元的色谱峰面积 ,以进
样量为横坐标 ,峰面积为纵坐标 ,得回归方程为 Y
=493 968.31X -7 235.83 , r =0.996 。牛蒡苷元
在 0.06 ~ 0.3 μg 线性关系良好。
2.3 样品的测定:将牛蒡子干燥并粉碎 ,过 60目
筛 ,取粉末 0.5 g ,精密称定 ,置 50 mL 具塞三角瓶
中 ,加甲醇约 40 mL , 在超声波发生器内提取 25
·467·中草药 Chinese T raditional and Herbal Drugs 第 34 卷第 5 期 2003年 5月
收稿日期:2002-07-20基金项目:“九五”国家科技攻关项目(96-903-02-01)作者简介:王 劲(1969-),女 ,河北霸州人 ,辽宁中医学院中药系讲师, 在读博士研究生 ,研究方向为中草药活性成分的分离及其新药开发。
min ,取出放冷 ,滤至 50 mL 量瓶中 ,残渣经甲醇洗
涤 ,并入量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 。经微孔滤膜
过滤(0.5 μm),精密吸取样品液 2 μL ,注入高效液
相色谱仪中 ,测定牛蒡苷元色谱峰面积 ,用外标法计
算样品中牛蒡苷元的含量 。结果见表 1 ,图 1 。
表 1 5个地区商品牛蒡子中牛蒡苷元的含量
   Table 1 Arctigenin content in commercial
Fructus Arctii from five habitates
地区 生品 制品平均含量/ % RSD/ % 平均含量/ % RSD/ %
辽宁凤城 1.01 1.1 0.64 2.4
黑龙江木兰 0.90 0.6 0.44 2.3
江苏南京 0.93 1.6 0.72 1.5
福建泉州 1.42 1.6 0.47 2.4
贵州贵阳 0.89 2.8 0.69 1.3
A-标准品 B-牛蒡子样品 C-牛蒡苷元
A-standard B-sample C-arct ingenin
图 1 牛蒡苷元和牛蒡子样品的 HPLC图
  Fig.1 HPLC chromatogram of arctigenin
and commercial Fructus Arctii sample
2.4 加样回收率试验:精称已知牛蒡苷元含量的样
品 ,分别加入牛蒡苷元对照品 ,按样品测定项下方法
处理 , 计算回收率 , 结果平均回收率为 97.5%,
RSD =1.0%(n=5)。
2.5 精密度试验:上述色谱条件下 ,对同一浓度的
对照品溶液连续进样 6 次 ,得峰面积为 83 206 ,
RSD =0.7%。
2.6 重现性试验:按样品测定方法 ,对牛蒡子生品
进行 5次平行实验 ,牛蒡苷元的含量为 1.03%,
RSD=1.5%。
2.7 稳定性试验:在室温条件下 ,精密吸取同一样
品溶液 ,按样品测定方法在 0 , 2 ,4 ,6 , 8 ,10 h 时间间
隔内分别测定峰面积 , RSD =1.6%,说明牛蒡苷元
在 10 h内稳定 。
3 讨论
从 5个地区的商品牛蒡子中牛蒡苷元的测定结
果可见 ,牛蒡苷元在生品中的含量高于制品 ,这可能
与炮制过程有关。在生品中以福建泉州的牛蒡苷元
含量为最高 1.42%,在制品中以江苏南京的含量为
最高 0.72%。牛蒡苷在生 、制品中含量差异最大的
为福建泉州的商品 ,二者相差 0.95%,含量差异最
小的为贵州贵阳的商品 ,二者相差 0.20%。由此可
见 ,福建泉州的牛蒡子较好 。
References:
[ 1]  Ch P(中国药典)[ S] .1995 ed.
[ 2]  Jiangsu New Medical College.Dic tionary of Ch inese Mater ia
Med ica(中药大辞典)[ M] . Shanghai:Shanghai People s
Press , 1977.
[ 3]  Akihiko S.S tudies on ant i-cancer propert ies of crude drugs—an-
ti-cancer property of Fruc tusarct ii [ J] . Fore ign Med Sc i —
Trad it Chin Med He rb (国外医学·中医中药分册), 1987 , 9
(2):111.
[ 4]  Chen T H , Huang D.Virustatic action of Fructus Arc tii on Ep-
stein-Barr antigen [ J] .Chin J E xp C lin Virol (中华实验和临
床病毒学杂志), 1994 , 8(4):323.
[ 5]  Hasegaw a M.Pharmacological studies on lignans(Ⅲ)— Inhibi-
tion on immune neph rit is of Fr uctus Ar cti i and gormici A [ J] .
Fore ign Med S ci-Trad it Chin He rb (国外医学·中医中药分
册), 1991 , 13(2):117.
[ 6]  Hasegaw a M.Pharmacological studies on lignans (Ⅰ)Ant i-
neph ropathy-change action of Fructus S chisandrae , Fr uc tus
Arct ii and Herba Asari [ J] .Foreign Med Sc i — Tradi t Chin
Med Herb (国外医学·中医中药分册), 1990 , 12(6):367.
[ 7]  Han G Q , BAI G Q , Wang X H. Isolation and st ructu re
identif icat ion of an tagonist of PAF receptor(platelet activate fac-
t or)in Fr uctus Arc ti i [ J] . Ch in Trad it Herb Drugs (中草
药), 1992 , 23(11):563.
[ 8]  Gao Y , Kang T G , Zhang X Y.Studies on the calcium antago-
nist action of arctigenin [ J] .Chin Tr ad it Herb Dr ugs (中草
药), 2000 , 31(10):758-762.
[ 9]  Kang T G , Sha M , Kawamura T , et a l.Pharmacognostical
evaluat ion of Fruc tus Arct ii (Ⅰ):Arctiin content in Chinese
commercial Fr uctus Ar cti i [ J] .Nat Med (天然药物), 1998 ,
52(4):339-342.
欢 迎 投 稿   欢 迎 订 阅
·468· 中草药 Chinese T raditional and Herbal Drugs 第 34 卷第 5 期 2003年 5月