全 文 ：解度也增大, 但当萃取至一定程度, 随着血竭中起协
同作用的非极性组份的萃出, 抑制活力也随之下降。同
时随着萃取时间的延长, 越来越多的物质被萃取出来,
萃余率也随之下降。因此选择最佳萃取时间为 2 h。
图 3　时间对萃余率 (A)和抑制活力提高率 (B)的影响
F ig. 3　Effect of time on surplus extraction rate (A)
and inh ibitory activ ities (B)
218　CO 2 流量的影响: 见图 4。超临界CO 2 流体流
量对提取率具有双重作用, 增加流体流量一方面因
减少超临界流体在物料中的传质接触时间而降低了
萃取率, 另一方面因增加了传质速率和浓度差而利
于物质的萃取。随着流量的增大, 浓度差也增大, 但
溶质在CO 2 中的溶解量减小, 当流量增大到一定值
时, 提取效率不再随流量增大而有明显变化, 再增加
CO 2 流量, 使血竭与 CO 2 的接触时间缩短, 血竭中
成分来不及充分扩散到CO 2中, 同时过大的CO 2流
图 4　CO 2 流量对萃余率 (A)和抑制
活力提高率 (B)的影响
F ig. 4　Effect of CO 2 f low on surplus extraction
rate (A) and inh ibitory activ ities (B)
量也会导致消耗增加, 因此, 流量存在一个最佳值。
从本实验结果来看, 流量取 30 kgöh 为宜。
219　SFE2CO 2 法和索氏抽提法提取结果的比较:
称取广西血竭细粉 (过 60～ 80 目筛) 100 g, 加入石
油醚 1 600 mL 进行索氏抽提, 温度为 85 ℃, 提取时
间为 30 h, 回收溶剂, 得血竭石油醚提取物。将血竭
的超临界流体萃取法与石油醚索氏提取法作比较,
各实验对比条件与结果见表 1。可见, 用 SFE2CO 2
法萃取血竭, 与传统的索氏抽提法相比较, 条件温
和, 生产工艺周期大大缩短, 得率和 Α2葡萄糖苷酶
抑制活力均有较大提高。
表 1　SFE-CO 2 法和索氏提取法萃取血竭中成分工艺比较
Table 1　Compar ison of technology for SFE-CO 2 and
solven t extraction of D ragon’s Blood con stituen ts
提取
方法
温度ö℃ 压力öM Pa 提取时间öh 得率ö% ID 50 抑制活力提高率ö%
SFE2CO 2 40 15 2 98. 2 3. 13 27. 9
索氏提取 85 30 95. 0 3. 85 11. 3
3　讨论
　　超临界流体萃取技术作为一种新型的绿色化工
技术, 在中药有效成分的分离提取领域中具有广阔
的应用前景。本实验采用超临界CO 2 流体萃取血竭
中降血糖有效成分具有明显的优势, 同时确立的工
艺路线可作为工业化大生产的参考, 具有较强的经
济效益和社会效益。
References:
[ 1 ]　H uang M H. T he fingerp rin ts estab lishm ent of D ragon’s
B lood and their inh ib it ive activity to Α2gluco sidase [A ]1 D is2
serta tion of M aster D eg ree of S hang ha i U n iversity (上海大学
硕 士学位论文 ) [D ]1 Shanghai: Schoo l of L ife Science,
ShanghaiU niversity, 20021
[ 2 ]　L ing A P, T u P F, Zheng J H. Study on pharm acopoeia of
D ragon’s B lood [J ]1 Ch ina J Ch in M ater M ed (中国中药杂
志) , 1994, 19 (11) : 64826491
GC-M S 法测定麻黄汤不同配伍对桂皮醛含量的影响
魏凤环, 罗佳波3 , 陈飞龙, 贺　丰Ξ
(第一军医大学 中药制剂重点实验室, 广东 广州　510515)
摘　要: 目的　建立气相色谱2质谱法 (GC2M S) 测定麻黄汤中桂皮醛含量的方法, 研究配伍对桂皮醛含量的影响。
方法　GC2M S 法测定桂皮醛的含量, 并用M S 鉴定其他色谱峰。采用 L 8 (27 ) 正交设计安排试验, 统计软件
·536·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 6 期 2004 年 6 月
Ξ 收稿日期: 2003206212
基金项目: 国家自然科学基金重点项目: 麻黄汤配伍规律的研究 (30030150)
作者简介: 魏凤环 (1976—) , 女, 山东人, 中药药剂专业博士研究生, 2001 年获山东中医药大学中药药剂专业硕士学位, 研究方向为中药
基础研究及中药新药的研究开发。T el: (020) 61648265　E2m ail: aw ag8486@ sohu. com3 通讯作者　T el: (020) 61648266　E2m ail: ljb@fimm u. edu. cn
(SPSS1010)分析麻黄、杏仁、甘草及两两交互作用对桂皮醛含量的影响。pH 计测定各组合的 pH 值。结果　麻黄、
杏仁对方中桂皮醛的含量影响差异具有显著性 (P < 0105) , 甘草及两两交互作用对其影响不显著 (P > 0105)。各组
合pH 值变化不明显。结论　麻黄、杏仁显著降低桂皮醛的含量, 甘草及交互作用则对其含量的降低无统计学意义。
关键词: 麻黄汤; 配伍; 桂皮醛; GC2M S
中图分类号: R 28313; R 286102　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 06 0635 04
Inf luence of com pa tib il ity on c innama ldehyde in M ahuang D ecoction by GC-M S
W E I Feng2huan, LUO J ia2bo, CH EN Fei2long, H E Feng
(Key L abo rato ry of Pharm aceu tices of M ateria M edica, F irst M ilitary M edical U niversity, Guangzhou 510515, Ch ina)
Abstract: Object　To develop the quan t ita t ive m ethod of cinnam aldehyde in M ahuang D ecoct ion
(M HD ) by GC2M S and study the influence of variou s com b inat ion s ofM HD on the con ten ts of cinnam alde2
hyde in the decoct ion s. M ethods　By L 8 (27) o rthogonal design and sta t ist ic analysis (SPSS 1010) , eigh t
decoct ion s w ith R am u lus C innam om i w ere p repared and analyzed. Con ten ts of cinnam aldehyde w ere deter2
m ined by GC2M S. T he pH value of decoct ion s w as determ ined by pH m eter. Results　Fo r H erba Ep hed rae
and S em en A rm en iacae A m a rum , the influences on the con ten ts of cinnam aldehyde w ere sign if ican t (P <
0105). Bu t fo r R ad ix G ly cy rrh iz ae the in teract ion s w ere in sign if ican t (P > 0105). T he change of pH value
no t obviou s. Conclusion 　T he con ten t of cinnam aldehyde is on ly reduced sign if ican t ly by H erba Ep hed rae
and S em en A rm en iacae A m a rum. Bu t it is in sign if ican t fo r R ad ix G ly cy rrh iz ae and its com b inat ion s.
Key words: M ahuang D ecoct ion (M HD ) ; compat ib ility; cinnam aldehyde; GC2M S
　　“药有个性之特长, 方有合群之妙用”, 方剂配伍
的内涵与意义亟待用科学的实验数据进行阐明。本
课题以麻黄汤为工具方对其配伍进行研究。该方由
君药麻黄、臣药桂枝、佐药杏仁、使药炙甘草组成。本
实验从麻黄汤不同组合对桂皮醛含量的影响, 研究
了麻黄汤配伍的规律, 为深入研究该方提供参考。
1　仪器与试药
H P6980—M S5973 气相色谱2质谱仪 (美国安捷
伦) ,DB 217 弹性石英毛细管 (30 m ×015 mm ×0125
mm ) , 定量移液器 (德国 Eppendo rf, 200 ΛL , 1 000ΛL ) , 410A 型 pH 计 (美国O rion)。
麻黄为麻黄科植物草麻黄 Ep hed ra sin ica
Stap f. 的干燥草质茎, 桂枝为樟科植物肉桂 C in2
nam om um cassia P resl. 的干燥嫩枝, 杏仁为蔷薇科
植物山杏 P runus a rm en iaca L. var. ansu M ax im.
的干燥成熟种子, 甘草为豆科植物甘草G ly cy rrh iz a
u ra lensis F isch. 的干燥根及根茎。饮片购自广东省
药材公司中药饮片厂, 经本校中药鉴定学教研室鉴
定。桂皮醛 (中国药品生物制品检定所, 批号: 7102
200011) , 试剂均为分析纯。
2　方法与结果
211　麻黄汤中桂皮醛定量方法的建立
21111　色谱ö质谱条件: 色谱柱: H P25 弹性石英毛
细管 (30 mm ×015 mm ×0125 mm ) , 进样量: 1 ΛL ,
无分流进样, 进样口温度: 220 ℃, 载气: H e, 载气为
恒流模式, 柱流量: 110 mL öm in。柱初温: 120 ℃, 以
8 ℃öm in 升至 250 ℃, 接口温度: 280 ℃, 离子源:
E I, 电离能量: 70 eV , 倍增电压: 1 675 V。
21112　对照品溶液的制备: 精密吸取桂皮醛对照品
60 ΛL , 置 5 mL 量瓶中, 加醋酸乙酯至刻度, 即得。
21113　供试品溶液的制备: 准确称取麻黄 9 g、桂枝
6 g、杏仁 6 g、甘草 3 g, 加 240 mL 水, 浸泡 30 m in,
加热回流 30 m in, 脱脂棉滤过, 用 90 ℃水洗涤药渣
3 次, 10 mL ö次, 加水至 250 mL。取 10 mL 全方煎
液加 20 mL 醋酸乙酯, 振摇萃取 30 m in, 取醋酸乙
酯层即得麻黄汤供试品溶液。准确称取麻黄 9 g、杏
仁 6 g、甘草 3 g, 按照全方供试品溶液制备的方法操
作, 得缺桂枝的阴性对照溶液。
21114　标准曲线的制备: 取桂皮醛对照品溶液 100ΛL 置 10 mL 量瓶中, 加醋酸乙酯至刻度。取 015,
110, 115, 215, 315 mL 分别置 5 mL 量瓶中, 加醋酸
乙酯至刻度, 按照上述色谱ö质 谱条件分析。以桂皮
醛浓度 (C )为横坐标, 总离子丰度 (A ) 为纵坐标进行
线性回归, 得桂皮醛回归方程 A = 510×108 C -
3141×105, r= 01999 9。表明桂皮醛在 01012～ 0112ΛL ömL 与总离子丰度有良好的线性关系。
21115　干扰性考察: 取缺桂枝的阴性对照溶液测
定, 结果 tR = (4191±0101) m in 处无色谱峰, 表明
其他 3 味药对桂皮醛的定量无干扰。色谱图见图 1。
21116　精密度试验: 取桂皮醛对照品溶液连续进样
6 次, 结果丰度的R SD = 1102%。
21117　稳定性试验: 取对照品溶液分别在 0, 4, 8,
·636· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 6 期 2004 年 6 月
a2桂皮醛　b2r2苯基丙烯醇　c2香豆素　d2p 2甲氧基肉桂醛
a2cinnam aldehyde　b2r2phenylallyl alcoho l　c2coum arin
d2p 2m ethoxy cinnam icaldehyde
图 1　桂皮醛对照品 (A)、阴性对照 (B)和
麻黄汤 (C)的 GC-M S 色谱图
F ig. 1　GC-M S of c innamaldehyde reference sub-
stance (A) , sample without Ram ulus
C innam om i (B) , and M HD (C)
12, 16, 24 h 测定, 结果所得丰度的R SD 为 2157%。
表明桂皮醛溶液在 24 h 内稳定。
21118　重现性试验: 取麻黄汤供试品溶液 10 mL 5
份, 进样测定, 结果所得桂皮醛含量的均值为
101448 ΛL ö剂, R SD 为 2126%。
21119　回收率试验: 取缺桂枝阴性供试品溶液 5
mL 12 份, 分为 3 组, 分别加入桂皮醛对照品 0112,
0136, 0190 ΛL , 各加 10 mL 醋酸乙酯, 振摇萃取 30
m in, 取醋酸乙酯层, 进样分析, 结果平均回收率为
101130% , R SD 为 1156%。
212　麻黄汤不同配伍对桂皮醛溶出量的影响
21211　正交设计: 选麻黄 (因素A )、杏仁 (因素B )、
甘草 (因素 C) 作为 3 个因素, 选“有”和“无”为 2 个
水平, 因素水平见表 1。
表 1　因素水平表
Table 1　Factors and levels
水平
因　素
A 麻黄 B 杏仁 C 甘草
1 有 有 有
2 无 无 无
21212　试验安排: 采用L 8 (27) 正交设计安排试验,
结果见表 2。
21213　统计分析: 采用 SPSS 1010 分析软件进行处
理, 结果表明麻黄、杏仁对桂皮醛的含量降低的影响
差异具有显著性 (P < 0105) , 甘草及两两交互作用
的影响差异不具有显著性 (P > 0105)。结果见表 3。
2 13　pH 值的变化: 单味药麻黄9g、杏仁6g、甘草
表 2　L 8 (27)正交设计及结果
Table 2　L 8 (27) orthogonal design and result
编号 A B A ×B C A ×C B×C
空
白
桂皮醛ö(ΛL·剂- 1)
1 1 1 1 1 1 1 1 10. 212
2 1 1 1 2 2 2 2 11. 788
3 1 2 2 1 1 2 2 15. 268
4 1 2 2 2 2 1 1 16. 290
5 2 1 2 1 2 1 2 18. 494
6 2 1 2 2 1 2 1 23. 556
7 2 2 1 1 2 2 1 29. 112
8 2 2 1 2 1 1 2 32. 098
表 3　方差分析结果
Table 3　Results of var iance analysis
方差来源 立均差平方和 F 值 P 值 显著性
　A 0. 494 00 1 066. 205 0. 019 P < 0. 05
　B 0. 165 00 　355. 971 0. 034 P < 0. 05
　A ×B 0. 018 43 　 39. 782 0. 100
　C 0. 022 67 　 48. 919 0. 090
　A ×C 0. 059 45 　 12. 829 0. 173
　B×C 0. 013 83 　　2. 985 0. 334
　误差 (空白) 0. 046 34
3 g 按 21113 项下“加 240 mL 水⋯⋯至 250 mL ”操
作, 30 ℃下测定pH 值, 结果见表 4。可见各组合pH
值变化不明显, 尤其是显著降低桂皮醛溶出量的麻
黄、杏仁对桂枝水煎液 pH 值的影响不明显。
表 4　各组合的 pH 值测定结果
Table 4　Results of pH value of decoction s
　　　　　　组　合 pH 值
　　麻黄+ 桂枝+ 杏仁+ 甘草 5. 23
　　麻黄+ 桂枝+ 杏仁 5. 23
　　麻黄+ 桂枝+ 甘草 5. 16
　　麻黄+ 杏仁+ 甘草 5. 31
　　麻黄+ 桂枝 5. 16
　　桂枝+ 杏仁 5. 23
　　桂枝+ 甘草 5. 17
　　桂枝 5. 08
　　麻黄 5. 39
　　杏仁 5. 04
　　甘草 5. 44
3　讨论
311　麻黄能显著降低桂皮醛的溶出量, 究其原因:
从 pH 值变化的角度分析, 30 ℃下麻黄与桂枝合煎
与桂枝单煎相比 pH 值的改变不明显, 提示麻黄对
桂皮醛溶出量的影响可能与 pH 值无关。从产生新
化合物的角度分析, 有报道麻黄汤中麻黄碱与桂皮
醛反应生成新化合物, 该新化合物在热水中不稳定。
但在本实验条件下未检测出该成分, 可能因为新化合
物挥发性差, 不适于用 GC2M S 分析检测; 或在醋酸
乙酯中不稳定或溶解度甚微。原因有待进一步研究。
312　杏仁显著降低桂皮醛溶出量。在 30 ℃下杏仁对
桂枝汤液pH 值影响不大, 提示杏仁对桂皮醛溶出量
·736·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 6 期 2004 年 6 月
的影响可能与pH 值无关。原因有待进一步研究。
313　本实验条件下, 检测出桂枝中的另 3 个成分, 均
达到较好的分离, 经M S 鉴定分别是 r2苯基丙烯醇
( tR = 5121 m in)、香豆素 ( tR = 7150 m in)、p 2甲氧基
肉桂醛 ( tR = 7192 m in)。以丰度值对 3 种化合物定
量, 进行统计学分析, 结果表明麻黄、杏仁、甘草及两
两交互作用对三者含量的影响差异均不具有显著性。
314　本实验对麻黄汤进行拆方组合后, 从臣药桂枝 主要效应成分桂皮醛含量的变化层面上阐述麻黄汤配伍的意义。麻黄降低桂皮醛的含量, 相应桂枝亦降低麻黄碱、伪麻黄碱的含量[1 ] , 提示桂枝可能通过自身效应成分与麻黄中成分反应降低麻黄的毒副作用。Reference:[ 1 ]　L i J L , Chen F L , L iu C M , et a l. D eterm ination of ephedrineand p seudoephedrine in M A HUAN G TAN G by GC2M S andeffect of compatib le m edicinal herbs on concen tration of com 2ponen ts in decoction [J ]1 Ch in T rad it H erb D rug s (中草药) ,2002, 33 (4) : 30723091
RP-HPLC 法测定鹤草芽栓中鹤草酚的含量
陈晓辉1, 毕开顺1, 郭金华2Ξ
(11 沈阳药科大学药学院, 辽宁 沈阳　110016; 21 辽宁省疾病预防控制中心, 辽宁 沈阳　110005)
摘　要: 目的　建立鹤草芽栓中鹤草酚的含量测定方法。方法　采用R P2H PL C 法。使用N ova2Pak C18 (250 mm ×
416 mm , 5 Λm )分析柱, 甲醇2水2三乙胺 (80∶20∶012)为流动相, 检测波长 292 nm , 流速为 018 mL öm in, 进样量为
20 ΛL。结果　鹤草酚在 1215～ 125 m göL 与峰面积呈良好的线性关系, 平均回收率为 9812% , R SD 为 115% (n=
9)。结论　该方法简便、快速、重现性好, 适用于鹤草芽栓中鹤草酚的定量分析。
关键词: 鹤草芽栓; 鹤草酚; 反相高效液相色谱
中图分类号: R 286102　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 06 0638 02
Quan tita tive determ ina tion of agr im ophol in Hecaoya Suppository by RP-HPLC
CH EN X iao2hu i1, B I Kai2shun1, GUO J in2hua2
(1. Schoo l of Pharm acy, Shenyang Pharm aceu tical U niversity, Shenyang 110016, Ch ina;
2. L iaon ing Centre fo r D isease Contro l and P reven tion, Shenyang 110005, Ch ina)
Key words: H ecaoya Suppo sito ry; agrimopho l; R P2H PL C
　　鹤草芽栓是由鹤草芽提取物制成的栓剂, 具有
消炎止痒、杀滴虫等作用, 为妇科外用药。其有效成
分为鹤草酚[1, 2 ]。目前采用薄层色谱法、比色法和重
量法对鹤草芽所含酚类物质总量进行测定, 以控制
产品质量[3～ 5 ]。因操作烦琐、费时、专属性差等缺点,
使产品质量不能得到有效的控制。为完善和提高鹤
草芽栓的质量标准, 使之达到科学化、标准化, 本实
验探讨了采用R P2H PL C 法测定鹤草芽栓中鹤草酚
的含量, 并且收到了满意的效果。该方法快速、准确、
简便、灵敏度高、重现性好。
1　仪器与试剂
　　T SP 高效液相色谱仪, W aters 515 输液泵,
W aters 486 型紫外检测器, PC800 色谱数据工作
站。甲醇 (色谱纯) , 三乙胺 (优级纯) , 氯仿 (分析纯) ;
鹤草酚对照品由沈阳药科大学提供, 经归一化法测
定纯度为 9912% ; 鹤草芽栓由抚顺制药厂生产。
2　方法与结果
211　色谱条件: 色谱柱: N ova2Pak C 18 (250 mm ×
416 mm , 5 Λm ) ; 流动相: 甲醇2水2三乙胺 (80∶20∶
012) ; 检测波长: 292 nm ; 流速: 018 mL öm in; 进样
量: 20 ΛL。
212　系统适用性试验: 取供试品溶液, 在上述色谱
条件下进样, 以鹤草酚色谱峰计算, 理论塔板数为
3 500, 拖尾因子 0196, 分离度大于 115, 且鹤草酚的
峰与其他成分可获得基线分离。本法测得最低检测
浓度 (SöN > 3)按鹤草酚计为 6 ΛgömL , 最低定量浓
度 (SöN > 10)按鹤草酚计为 15 ΛgömL。
213　标准曲线的绘制: 称取鹤草酚对照品约 25
m g, 精密称定, 置于 100 mL 量瓶中, 用少量氯仿溶
解后, 用甲醇稀释至刻度, 摇匀作为对照品储备液。
·836· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 6 期 2004 年 6 月
Ξ 收稿日期: 2003208205
作者简介: 陈晓辉, 女, 2001 年毕业于日本爱媛大学生物资源科学专业, 获理学博士学位, 主要从事天然植物药及药物分析研究。