全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第9期2005年9月·1371·
牛黄羚贝消炎片的抗病毒作用
韩杨1，李宜平铲
(1．长春中医学院药理学教研室，吉林长春130117；2．长春中医学院药剂学教研室，吉林长春130117)
牛黄羚贝消炎片系由牛黄、川贝、金银花、人参、
大青叶等民间方药研制而成的中药复方制剂，具有
清热、解毒、清肺祛痰、止咳平喘之功效，主要用于感
冒风热证。本实验对其动物体内及组织培养中的抗
病毒作用进行了研究，为其临床用药提供药理依据。
1材料与方法
1．1 药物：牛黄羚贝消炎片(每片含绿原酸不得少
于1。3rag)由长春中医学院药剂教研室提供，批号
0301050以片剂制成100％混悬液，用时以蒸馏水
配成30％质量浓度，以0．45肚m微孑L滤器滤过除
菌备用，贮于4‘C。病毒唑注射液(100mg／mL)由
河南焦作市第二制药厂生产，批号990728—2，实验
前配制成0．8％溶液，滤过除菌备用。
1．2细胞：Hep一2传代细胞，购于中国药品生物制
品检定所。FL细胞，由白求恩医科大学微生物教研
室保存。
1．3培养液：IMDM购于Sigma公司；胎牛血清，购
于长春生物制品研究所；胰蛋白酶，日本产上海分装。
1．4病毒株：流感病毒FM。株、肠道病毒CoxB。均由
吉林大学医学部微生物教研室保存；单纯疱疹病毒I
型(HSV一1)，购予中国药品生物制品检定所；腺病毒
Ⅲ型，来源于吉林大学第一临床医院儿科研究室。
1．5 动物：昆明种小鼠，(20±2)g，雌雄各半，购自
吉林大学实验动物中心。
1．6 牛黄羚贝消炎片对小鼠流感病毒性肺炎的作
用[】]：取健康小鼠，雌雄各半，随机分为5组；病毒唑
(0．07g／kg)组，牛黄羚贝消炎片高、低剂量(6．o、
3．og／kg)组，正常对照组与模型组(蒸馏水)，每组
10只，于感染(正常组除外)前一天开始ig给药，连
续5d。在乙醚浅度麻醉下滴鼻感染流感病毒FM。
株10LD。感染后96h解剖，取肺称质量，计算肺
指数和抑制率。
肺指数一肺质量／体重×100％
肺指数抑制率一(模型组平均肺指数一实验组平均肺指
数)／模型组平均肺指数×100％
1．7 牛黄羚贝消炎片对病毒致细胞病变的作
用n~4]：①细胞准备：分别将Hep一2传代细胞和FL
细胞培养5d，使之成片，用胰蛋白酶消化，待细胞
面出现针尖样小孔，吸尽消化液，取数毫升培养液吹
散细胞计数，至约5×104／mL后，接种于96孑L塑料
组织培养板内，待细胞长成单层。②药物的无毒界限
及病毒效价测定：将牛黄羚贝消炎片30％药液，病
毒唑注射液分别稀释至1：2、1：3、l：4、1：8、1：
16药液，并分别加入Hep一2、FL单层细胞上，每孔
0．2mL，置37℃、5％CO。孵箱培养，求出药物对细
胞的无毒界限。牛黄羚贝消炎片药液在1：8(37．5
mg／mL)以下稀释时对细胞无毒性作用，实验时选
用1：8(37．5mg／mL)稀释。病毒唑在1：2(10
mg／mL)以下稀释时对细胞无毒性作用，实验时选
用1：2(2mg／mL)稀释。将流感病毒FM。、肠道
病毒CoxB。、腺病毒Ⅲ型、HSV—I病毒进行10倍
稀释成10-1～10_6不同稀释度，并将各种稀释度的
病毒感染Hep一2和FL细胞，吸附0．5h后洗去病
毒液，每一病毒稀释度各加4孔，置37℃、5％CO。
培养箱内，每天在倒置显微镜下观察病变，连续3
d，记录各孔病变情况，用改进寇氏法(Karher法)
分别求出流感病毒FM，、肠道病毒CoxB。、腺病毒
Ⅲ型、HSV—I病毒滴度(TCID。。)。③抗病毒作用：
在96孔塑料组织培养板上已培养成的单层Hep一2
传代细胞和FL细胞内分别加入1：8稀释度的药
液(37．5mg／mL)、2mg／mL的病毒唑药液及30
TCID。。的病毒，37℃孵育培养后于显微镜下观察
细胞病变，病变程度可分为无病变、有病变，于孵育
的不同时间(第1、2、3天)观察细胞病变，以判断药
物能否延迟病毒的致细胞病变作用。
TCID50=lg一1(X。+1／2i--EPi／100)
x。：最大病毒浓度病毒量的对数值；i：相邻两组病毒浓度病毒
量的对数值；EP：各组病毒稀释度病毒致细胞病变的总和
1．8统计学处理：各组数据以z±S表示，用t检验
进行显著性分析。
收稿日期：2005—02—15
基金项目：吉林省科技厅资助课题(吉科合字第962903号)
作者简介：韩杨(1959～)，女，吉林长春人，副教授，主要从事药理学研究。Tel：(0431)6172352Email：hanyan9369@yahoo．tom．cn
万方数据
·1372· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第9期2005年9月
2 结果
2．1 流感病毒性肺炎小鼠肺指数值和抑制率：牛黄
羚贝消炎片高、低剂量组肺指数值明显低于模型组
(P
展，使其炎症减轻的作用。结果见表1。
表1 牛黄羚贝消炎片对流感病毒性肺炎
小鼠肺脂数的影响(；±s，n一10)
Table1 EffectofNiuhuangLin beiXiaoyanpian
onlungindexofmicewithinfluenza
viruspneumonia(j±s，聆一10)
与正常组比较：660P<0．001
与模型组比较：⋯P
⋯P
TCID。。剂量下，牛黄羚贝消炎片(37．5mg／mL)对
流感病毒FM．株，腺病毒m型的致细胞病变有抑制
作用，于第2天出现抑制作用；牛黄羚贝消炎片
(37．5mg／mI，)对HSV一1病毒有一定的延缓作用。
结果见表2。
3讨论
小鼠流感病毒性肺炎是用流感病毒小鼠适应株
所致的出血性肺炎的模型，是最常用的病毒致整体
动物感染模型。小鼠感染病毒后引起肺炎，导致肺组
织内炎症细胞渗出增多，形成肝样实变，使全部肺质
量增加，肺质量增加和肺炎的严重程度相关。该模型
用于观察药物对流感病毒所致肺炎的预防和治疗作
用。本实验于感染流感病毒96h解剖称取肺质量，
表2牛黄羚贝消炎片对病毒致细胞病变活性的影响(万一4)
Table2 EffectofNiuhuangLin beiXiaoyanpianoncyto～
pathogenicact vitynducedbyvirus(咒一4)
药物
P／
流感病毒肠道病毒腺病毒HSV-I物
(mg．mL一1)FMl coXB3Ⅲ型
I
病毒唑 2 + + + +
牛黄羚贝消炎片37．5 + 一 + 士
“+”：抑制作用；“一”：无抑制作用；“土”：有延缓作用
“+”：inhibition；“一”：non—inhibition；“±”：delay—action
计算肺指数值及肺指数抑制率，牛黄羚贝消炎片高、
低剂量组肺指数值明显低于模型组，表明该药物对
小鼠流感病毒所致肺炎具有抑制发生、发展，使其炎
症减轻的作用。
细胞培养抗病毒试验常用抑制病毒致细胞病变
(CPE)法，是因为许多病毒对感染细胞可产生明显
的病变，在光学显微镜下可见细胞变圆，折光增加，
空泡形成，细胞融合和细胞溶解。这些变化很容易与
药物毒性所造成的细胞损害相区别，所以CPE法是
最常用于研究药物的抗病毒试验的方法。牛黄羚贝
消炎片(37．5mg／mI。)对流感病毒FM。株，腺病毒
Ⅲ型的致细胞病变作用有抑制作用。对HSV—l的
致细胞病变作用有一定延缓作用。本实验结果表明
牛黄羚贝消炎片具有较好的体内、体外抗病毒作用，
在防治病毒性疾病方面具有较大的临床应用价值。
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万方数据
牛黄羚贝消炎片的抗病毒作用
作者： 韩杨， 李宜平
作者单位： 韩杨(长春中医学院,药理学教研室,吉林,长春,130117)， 李宜平(长春中医学院,药剂学教
研室,吉林,长春,130117)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(9)
被引用次数： 2次
参考文献(4条)
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2.Yang Z W;Zhou Y;Chao X Q Antiviral effect of Sophora alopecuroides alkaloids on Coxsackie virus B3
in vitro[期刊论文]-四川中医 2003(03)
3.Wang C H;Yang Z Q;Xiao H Researth of antiviral activity of Penciclovir to herpes virus in vitro[期
刊论文]-中国病毒学 2002(02)
4.Heim A;Grumbach I P;Akerblom P Inhibition of coxsackievirus B3 carrier state infection of cultured
human by ribaririn and myocardial fibroblasts natural interferon alpha 1997(01)
引证文献(2条)
1.陈莉莉.张洪泉 中药抗病毒性呼吸道感染的研究进展[期刊论文]-中国野生植物资源 2006(6)
2.李永平.李福安.童丽 抗病毒中药的临床实验研究进展[期刊论文]-青海医学院学报 2006(1)
本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200509034.aspx