全 文 ：薄层扫描法测定牛黄降压丸及
胆南星中猪去氧胆酸的含量
万绍晖　张国民1　齐赤虹 2　罗昭光
(河南省开封医学高等专科学校　 475001)
1　开封市药品检验所　 475002
2　河南省医药学校　 475001
　　牛黄降压丸及胆南星为常用药物 ,市场需
要量很大 ,至今均没有可靠的含量测定方法。本文以
主要有效成分之一的猪去氧胆酸为指标进行双波长
薄层扫描测定 ,获得满意结果。
1　仪器、试剂与样品
CS-930薄层扫描仪 (日本岛津公司 ) ;硅胶 G
(薄层色谱用青岛海洋化工厂 ) ; 501型超级恒温器
(上海市实验仪器厂 ) ; 5μl与 10μl微量进样器 (上海
医用激光仪器厂 ) ;猪去氧胆酸对照品 (中国药品生
物制品检定所 );牛黄降压丸 (开封市中药厂 ,批号:
960206, 960202, 951004) ;胆南星 (开封市中药厂 ,批
号: 950306, 940902, 950402;开封市药品检验所中药
室鉴定 )。 其它试剂均为分析纯。
2　实验方法
2. 1　分析方法的建立
2. 1. 1　薄层层析条件的筛选与确定　有关胆汁酸
类物质的薄层层析条件报道较多 [1～ 4] ,经筛选改进 ,
选 用 硅胶 G薄层板 (厚约 0. 3mm, 110℃活化
30min ) ,以氯仿 -乙醚 -冰醋酸 ( 2∶ 2∶ 1)为展开剂 ,
10%磷钼酸无水乙醇液为显色剂 ,在 105℃加热
6min～ 7min,显色 ,用洁净玻璃板覆盖。
2. 1. 2　仪器参数　采用双波长反射法锯齿扫描 ,狭
缝 1. 25× 1. 25mm,λs= 700nm,λR= 450nm , SX = 3。
2. 1. 3　标准曲线及线性范围 [4 ]　精密称取猪去氧
胆酸对照品 0. 0175g ,用无水乙醇定容至 10ml。分别
精密吸取对照品溶液 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8μl,点于同一
薄层板上 ,展开 17cm,显色剂喷雾显色 ,用薄层扫描
法测定各猪去氧胆酸斑点积分值 ,求得回归方程 Y
= 5. 74× 104+ 4. 66× 104X , r = 0. 9989, n= 6,对照
品浓度在 3. 50mg /ml～ 12. 25mg /ml范围内时 A与
C呈线性。因直线不过原点 ,所以采用外标二点法定
量。
2. 1. 4　稳定性试验 [4]　对上述薄层板的同一斑点
依法每隔 30min扫描一次 ,共测定 0h～ 2h ,测得峰
面积积分值 ,求得 RSD= 0. 9% ,n= 5。 故猪去氧胆
酸在本实验条件下 2h内稳定。
2. 1. 5　阴性试验　取牛黄降压丸处方比例的除牛
黄外的各组分 ,依法制剂、薄层层析 ,样品薄层色谱
中在猪去氧胆酸相应的位置上没有斑点。 另取生天
南星细粉 ,依法进行薄层层析 ,样品薄层色谱中在猪
去氧胆酸相应的位置上没有斑点。
2. 1. 6　精密度试验　在同一块薄层板上点 2个对
照品溶液 (分别为 3μl、 5μl)及 5个样品溶液 (配制方
法见 2. 2) ,外标两点法定量。
牛黄降压丸 RSD (% ) 3. 0;胆南星 R SD (% )
3. 5。将同一供试液分别点于 5块薄层板上 (点样模
式同上 ) ,依法定量。牛黄降压丸 RSD (% ) 3. 6;胆南
星 RSD(% ) 3. 8。
2. 1. 7　重现性试验　对同一批样品 ,按 2. 2中方法
依法测定 5份。
牛黄降压丸 ( 960202)RSD (% ) 3. 4;
胆南星 ( 950301)RSD (% ) 3. 4。
2. 1. 8　回收率试验　精密称取牛黄降压丸或胆南
星样品溶液所用细粉或碎片 ,分别为 2. 1220g及
7. 6080g ,加硅藻土 ,充分研匀 ,精密加入猪去氧胆酸
对照品氯仿液 ( 1. 70mg /ml) 0. 50ml,照各自样品溶
液配制 ,自“加氯仿 80ml”起 ,即得。在同一薄层板上
点 2个对照品溶液 (分别为 3μl、 5μl)、 2个 2μl的牛
黄降压丸样品溶液及 2个 2μl的牛黄降压丸回收率
试验溶液 (或 2个 5μl的胆南星样品溶液及 2个 5μl
的胆南星回收率试验溶液 ) ,依法定量 ,结果见表 1。
2. 2　样品测定　牛黄降压丸样品溶液的配制: 取
10丸 ,仔细剪碎 ,混匀 ,精密称取约 2. 0g ,加硅藻土
3g ,充分研匀 ,加氯仿 80ml,超声处理 30min,滤过 ,
滤渣用氯仿洗 3次 ( 15m l× 3) ,合并滤液及洗液 ,蒸
尽氯仿 ,残渣以无水乙醇定量转移并定容至 2m l。胆
南星样品溶液的配制: 精密称取粉碎研细的胆南星
约 7. 0g ,加硅藻圭 6g ,充分研匀 ,加氯仿 80ml,超声
处理 30min,滤过 ,滤渣用氯仿洗 3次 ( 20ml× 3) ,合
并滤液及洗液 ,蒸尽氯仿 ,残渣以无水乙醇定量转移
并定容至 2ml。 在同一薄层板上点 2个对照品溶液
(分别为 3μl、 5μl)及 3个 2μl的牛黄降压丸样品溶液
或 3个 5μl的胆南星样品溶液 ,依法定量。同法测定
了 3批样品 ,结果见表 2。
·64· Chinese Journal of Experimenta l T raditional Medica l Fo rmulae Feb. 1999, 5( 1)DOI : 10. 13422 /j . cnki . syf jx . 1999. 01. 029
表 1　回收率试验
品种 样品中含量
(μg )
加入对照品
(μg)
测得对照品
(μg )
回收率
(% )
RSD
(% )
牛黄降压丸
6. 355
6. 017
6. 287
6. 434
6. 326
0. 85
0. 85
0. 85
0. 85
0. 85
0. 88
0. 84
0. 82
0. 87
0. 86
103. 5
98. 8
96. 5
102. 4
101. 2
2. 8
胆　南　星
3. 462
4. 178
3. 345
3. 540
4. 023
2. 125
2. 125
2. 125
2. 125
2. 125
2. 174
2. 032
2. 078
2. 053
2. 025
102. 3
95. 6
97. 8
96. 6
95. 3
2. 9
表 2　样品测定
样　品 批号 含量 ( mg /丸 )
牛黄降压丸 960206 4. 77
951004 5. 01
960202 5. 71
胆南星 950306 0. 20
940902 0. 14
950402 0. 19
3　小结
3. 1　方法所用薄层层析系统及扫描条件经多个品
种反复验证 [4 ] ,证明分离效果好 ,检出斑点清晰圆
整 ,方法专属性强、数据重现性好 ,不需特殊试剂。故
方法可靠 ;中国药典 ( 1995年版 )收载的含猪去氧胆
酸的中药材及中成药达 30余种 ,薄层扫描仪在药检
所及中药厂应用普遍 ,故本法具良好推广应用前景
及价值。
3. 2　购得的猪去氧胆酸对照品经上述薄层层析后
显示除主斑点外尚有一杂质斑点 ,用归一化法求出
主斑点含量为 90. 7% (R SD= 1. 8% ,n= 5)。本文中
有关含量均为折合后含量。
参考文献
1　中华人民共和国药典 (一部 ) . 广州:广东科学技
术出版社 , 1995. 345, 346, 384, 394, 436, 502
2　倪坤仪 ,常丽萍 ,陈凤玲等 . 六应丸中牛黄有效
成分的薄层扫描 . 中国药科大学学报 , 1989, 20
( 2): 100
3　张健军 ,薄少英 ,徐航利等 . 双波长薄层扫描法
测定清开灵注射液中牛胆酸及猪去氧胆酸的含
量 . 中国医院药学杂志 , 1991, 11( 6): 260
4　万绍晖 ,束刚 ,张萱等 . 薄层扫描法测定发酵前
后猪胆汁中猪去氧胆酸的含量 . 中国药学杂志 ,
1997, 32( 2): 108
(收稿: 1998-03-13)
全国中药研究开发与产业化学术讨论会征文通知
中国中西医结合学会中药专业委员会拟定于 1999年 8月在广西北海召开中药研究开发与产业化学术讨
论会。 现将征文有关事项通知如下:
一、征文范围　 1. 中药新剂型、新工艺、新辅料的研究 ; 2. 中药产业化关键技术探讨 ; 3. 中药化学成分、
有效物质及质量标准的研究 ; 4. 中药现代药理学、毒理学研究及方法学探讨 ; 5. 中药临床研究 ; 6. 中药现代
化发展战略、中药复方研究思路及方法学探讨 ; 7. 中药文献综述及其他有关方面的研究。
二、征文要求　 1. 来稿字数限 4000字以内 (包括参考文献 ) ,并另附有详细摘要 500～ 800字以内 ,无摘
要者恕不录用。 2. 来稿请打印或用 400字方格稿纸抄写清楚。论文题目下按顺序写明作者姓名、工作单位、单
位地址、邮政编码。 3. 征文不管录用与否 ,一律不退稿 ,请作者自留底稿。 4.《中国实验方剂学杂志》将参加本
次会议论文的审稿工作 ,对质量要求同时能达到该杂志稿约要求的论文 ,该杂志将优先刊用。
三、征文截止日期: 1999年 5月 31日 (以邮戳日期为准 )。
四、征文寄交地点:北京市东直门内北新仓 18号 , 100700　中国中医研究院中药研究所蔡仲德同志。
·65·1999年 2月　第 5卷第 1期 中国实验方剂学杂志