全 文 ：HPLC法测定抗敏胶囊中升麻苷的含量
赵陆华, 屠　颖,严　方,孙如宁

(中国药科大学 分析中心,江苏 南京　210009)
　　抗敏胶囊由防风、黄芪、淫羊藿等 9味中药经特
殊制剂工艺提取后加适量赋形剂制成的胶囊,临床
上具抗过敏之功效,作用显著, 且疗效持久, 用于治
疗过敏性鼻炎。防风为方中君药,升麻苷为其主要成
分,因制剂成分较多,干扰较大, 文献报道的升麻苷
的 HPLC 测定方法 [ 1～3]不适宜本品测定。经色谱条
件优化,本实验建立了一种 HPLC 法测定抗敏胶囊
中升麻苷的含量, 重现性好,可作为评价防风及其制
剂中该成分的指标。
1　仪器与试药
日本岛津 LC—10A 高效液相色谱仪, SPT—
10A 检测器, C—R6A 记录仪。乙腈为色谱纯, 枸橼
酸、三乙胺、甲醇等均为分析纯, 水为二次重蒸水,升
麻苷对照品(中国药品生物制品检定所提供, 批号
980318) , 抗敏胶囊 (自制, 批号 990303、990310、
990317)
2　方法与结果
2. 1　测定波长的选择:取升麻苷对照品适量,用流
动相溶解,在 200～400 nm 波长扫描,升麻苷在 300
nm 处有最大吸收,故选 300 nm 作为检测波长。
2. 2　色谱条件: 色谱柱: Allt ima C18柱( 250 mm×
4. 6 mm, 5
m) ; 流动相: 0. 01 mol/ L 枸橼酸水溶
液-乙腈( 88∶14,三乙胺调节 pH 4. 0) ; 检测波长:
300 nm;体积流量: 1 mL/ m in;进样量: 20
L;柱温:
室温。
2. 3　溶液的制备
2. 3. 1　对照品溶液的制备: 取升麻苷对照品适量,
精密称定, 用甲醇配制成 15. 10
g / mL 的溶液, 作
为对照品溶液。
2. 3. 2　供试品溶液的制备:取本品 10粒, 倾出内容
物,混匀,精密称取 0. 5 g ,置圆底烧瓶中, 加甲醇 20
mL, 水浴回流 2 h,滤过, 甲醇定容至 25 mL,滤过,
取续滤液作为供试品溶液。
2. 3. 3　阴性对照溶液的制备:取缺防风的其他各味
中药按处方工艺制成阴性对照,按 2. 3. 2项下方法
制成阴性对照溶液。
2. 4　干扰考察:分别精密吸取上述 3种溶液各 20

L,注入液相色谱仪,在上述色谱条件下测定,结果
阴性对照溶液对样品中升麻苷的测定无干扰。样品
中升麻苷色谱峰的保留时间为 22. 7 m in, 用二极管
阵列检测器做峰纯度检查,匹配度为 999, 表明该峰
为纯的色谱峰。色谱图见图 1。
* -升麻苷
* -cimicifugos igl
图 1　升麻苷对照品(A)、阴性对照(B)
和抗敏胶囊(C)的 HPLC图谱
Fig. 1　HPLC chromatograms of cimicifugosigl ref er-
ence substance (A) , negative sample (B) ,
and Kangmin Capsule (C)
2. 5　线性范围考察: 取升麻苷对照品适量,精密称
定,加甲醇制成 0. 250 7 mg / mL 的贮备液。分别取
上述溶液 0. 5、1. 0、1. 5、2. 5、4. 0 mL 置 25 mL 量瓶
中,以甲醇稀释至刻度, 混匀, 分别进样 20
L。以峰
面积对质量浓度进行线性回归, 结果回归方程为
A = 3. 944 5×103C- 20. 480 1, r= 0. 999 8。升麻苷
在 5. 014～40. 11
g/ mL 与峰面积线性关系良好。
2. 6　精密度试验:取供试品溶液,连续进样 6次。测
定升麻苷峰面积,计算得其 RSD为 1. 0%。
2. 7　稳定性考察:取供试品溶液分别在 0、2、4、6、8
·764· 中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 35 卷第 7 期 2004年 7月

收稿日期: 2003-10-03
h 进样, 测定升麻苷质量浓度, 结果其 RSD 为
0. 95% ,表明样品溶液在 8 h 内稳定。
2. 8　重现性试验: 取同一批号样品 6份, 制备供试
品溶液, 分别测定升麻苷的质量分数,结果 RSD为
1. 6%。
2. 9　回收率试验:采用加样回收率测定方法。取已
知含量的样品 0. 25 g(含升麻苷约 0. 17 mg ) ,按高、
中、低浓度法分别添加一定量的对照品溶液(升麻苷
的量分别约为 0. 25、0. 19、0. 11 mg ) ,制备成加样回
收供试品溶液, 并依法测定, 结果平均回收率为
99. 62% , RSD为 2. 1% ( n= 9)。
2. 10　样品测定: 取不同批号的样品,制备供试品溶
液,在选定色谱条件下,外标法测定升麻苷含量。结
果见表 1。
表 1　抗敏胶囊中升麻苷含量测定结果 ( n= 3)
Table 1　Cimicifugoside in Kangmin Capsule ( n= 3)
批号 升麻苷/ ( mg·粒- 1)
990303 0. 350 8
990310 0. 348 2
990317 0. 348 9
3　讨论
3. 1　比较了甲醇、乙醇超声和回流提取,用氯仿、丙
酮除杂方法,结果用甲醇回流提取 2 h效果最佳。
3. 2　比较了乙腈-水、甲醇-水、0. 03 mo l/ L 枸橼酸-
乙腈、0. 01 mo l/ L 枸橼酸-乙腈 ( pH 3～6) , 结果
0. 01 mol / L 枸橼酸-乙腈( pH 4)分离效果良好。
3. 3　选用 Hyper sil C18柱 ( 250 mm×4. 6 mm, 10

m)、Diamonsil C18柱( 250 mm×4. 6 mm , 10
m)、
Alltima C18柱 ( 250 mm×4. 6 mm, 10
m) , 结果
Alltima C18柱( 250 mm×4. 6 mm, 10
m)分离的峰
形对称,分离效果好。
References:
[1]　Wang J H, T ian Z, Lou Z Q . Determinat ion of four
chromones in Fangfen g ( root of Sap oshnikov ia d ivaric ata
S chis chk . ) by HPLC [ J] . Chin J P harm A nal (药物分析杂
志) , 1988, 8( 6) : 325-328.
[2]　Wang N H , Yu an C Q. Deter mination of Fangfen g ( r oot of
Saposhnikov ia divaricata S chis chk . ) cult ivate and wildness by
HPLC [ J ] . J Chin Med Mater (中药材) , 1990, 13( 10) : 9-10.
[3]　T ian Q, Li F M. Deter mination of prim-O-glucos ylcimifugin
and 4′-O-
-D glucosyl-5-O-methylvisamminol in Ganmao-qin-
gre Gran ules by RP-HPL C [ J] . Chin T rad it Pat Med (中成
药) , 2002, 24( 9) : 671-673.
RP-HPLC法测定咳停糖浆中盐酸麻黄碱和伪麻黄碱的含量
邓开英, 姚丽佳,王白露,李汝惠

(重庆市药品检验所,重庆　400015)
　　咳停糖浆是由麻黄、黄芩、金银花等十几味中药
经提取制成的复方制剂, 具有散寒宣肺, 清热化痰,
止咳平喘的功效。麻黄碱和伪麻黄碱为麻黄所含有
效成分,与其功效直接相关。因此本实验建立了分离
效果好、专属性强、灵敏度高的 RP-HPLC法同时测
定其中盐酸麻黄碱和伪麻黄碱的含量的方法,以控
制产品的质量。
1　仪器与试药
HP1100高效液相色谱仪(美国惠普) ; 盐酸麻
黄碱和伪麻黄碱对照品均由中国药品生物制品检定
所提供,批号分别为 714-9903和 1237-9601;咳停糖
浆由重庆市中药研究院提供;乙腈为色谱纯,其余试
剂均为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件: 色谱柱: Kromasil C18 ( 250 mm×
4. 6 mm , 5
m) (天津特纳科学仪器有限公司) ;流动
相: 乙腈-0. 02 mol / L 磷酸二氢钾溶液(含 0. 2%三
乙胺,磷酸调pH 2. 7) ( 4∶100) ;体积流量: 1. 5 mL/
m in; 检测波长: 214 nm ;柱温: 室温。在此色谱条件
下, 盐酸麻黄碱和伪麻黄碱色谱峰均与相邻色谱峰
达到基线分离, 阴性对照无干扰(图 1)。
2. 2　溶液的制备
2. 2. 1　对照品溶液的制备:分别取盐酸麻黄碱和伪
麻黄碱对照品适量, 精密称定,加 0. 01 mo l/ L 盐酸
溶液制成含两种成分 0. 08、0. 02 mg / mL 混合溶液,
即得。
2. 2. 2　供试品溶液的制备:精密量取本品 5 mL,置
分液漏斗中,加浓氨水 10 mL,摇匀,用氯仿-异丙醇
·765·中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 35 卷第 7 期 2004年 7月

收稿日期: 2003-10-04作者简介:邓开英( 1968—) ,女,副主任药师,中国药科大学药物分析专业在读硕士, 1990年毕业于上海医科大学药学专业,同年到四川省中药研究所从事新药研究开发, 1997年至今在重庆市药品检验所工作,从事药物分析、新药质量标准研究。
T el: ( 023) 89039422