全 文 ：·1650· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月
法等，其中普鲁士蓝法测定总多酚较其他方法灵
敏[⋯。本实验采用该方法测定总多酚时，溶液体系均
一，工作曲线线性良好，故选用普鲁士蓝法。
3．2不同的提取溶剂对多酚的提取能力有明显的
不同，进而会直接影响多酚含量的测定。文献报道有
机溶剂和水的复合体系比较适合多酚的提取，尤以
丙酮一水(1：1)最适合口’。]。本实验对水和丙酮一水
(1；1)的提取效果进行了比较，并进行了水浴和超
声提取方法比较以及提取时间的考察，最终确定以
丙酮一水溶液(1t 1)水浴浸提30min作为样品提取
的方法。
3．3松果菊中的多酚类成分研究较少，对照品的购
买和分离难度较大，无法用HPI。C等现代手段进行
定量分析。采用紫外分光光度法测定松果菊提取物
中的多酚是简单可行的好方法。
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紫外分光光度法测定丰城鸡血藤中总黄酮
余燕影1，彭志兵”，曹树稳2
(1．南昌大学化学系，江西南昌 330047，2．南昌大学食品科学教育部重点实验室t江西南昌330047)
丰城鸡血藤，又名香花崖豆藤Millettlanitida
Benth．var．hirsutissimaz．Wei，为江西特色中药
材，具有悠久的入药历史。丰城鸡血藤具有抗凝血
酶、促进纤维蛋白溶解，延长优球蛋白溶解时间等作
用，对凝血系统具有一定的影响；此外对肝细胞
DNA具有促进复制作用，从而促进肝细胞再生，恢
复肝功能“]。黄酮类化合物为丰城鸡血藤主要活性
成分之一口]。目前，天然产物中黄酮类化合物的测定
方法主要有高效液相色谱法[31和比色法“]。高效液
相色谱法主要用于测定单一黄酮类成分l比色法主
要用于测定总黄酮，而比色法大多以芦丁为对照品，
采用NaN0。一Al盐一Na0H显色体系在可见光区测
定。已有文献报道此方法测定总黄酮专属性差[5]。本
实验根据丰城鸡血藤中黄酮化合物主要成分的结构
特征和光谱特性，在上述方法的基础上进行改进，采
用紫外分光光度法测定，结果满意。
1仪器、试剂与材料
Tu一1800紫外可见分光光度计(北京普析通
用仪器有限责任公司)。试剂均为分析纯，所用水均
为一次蒸馏水。芦丁对照品购白中国医药(集团)上海
化学试剂公司。丰城鸡血藤采自江西省丰城市罗山
乡，经南昌大学生物系植物教研室杨柏云教授鉴定。
2方法与结果
2．1测定波长的选择；将芦丁对照品和供试品溶液
按实验方法操作．在200～600am进行波长扫描。
结果表明，对照品和供试品的络合物在271Nm处
有最大吸收，且光谱形状极为相似，形成的络合物在
常温下稳定性较好，满足分光光度法测定的基本要
求，因此，选定271nm作为测定波长。
2．2 pH值的影响：试验了不同酸度条件下对络合
物吸光度的影响，见图1。结果表明，在pH2～11
时，溶液的吸光度最大且稳定。故选在中性条件下进
llil{lll祷善96学3--基)龛妻墨磊星鬟芰：留鐾袭写要蠹蕊嘉磊葬器磊丞磊器器譬棼碧爱鸯刍括性研究。作者筒介。泉燕髟(1 ，女t江西金溪人，副教授，主要从事天然产物活性成分分离分析及生物括性研究。
*南昌大学2004届毕业生
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月· 651·
田1 pH位对吸光度的影响
Fig．1EffectsofpHvalueOnabsorbance
行反应。用NaNOz—A1(NOa)。一NaOH显色体系在可
见光区测定总黄酮是在强碱性条件下进行的，本法
是在中性条件测定的，这与可见光法的强碱性条件
相比具有较明显的优势。
2．3硝酸铝用量选择：硝酸铝的用量对络合物的形
成有一定的影响。随着硝酸铝用量的增加，溶液的吸
光度也相应增加。当硝酸铝试剂用量增加到4mL
以后，吸光度值大且保持稳定。本实验选择10％硝
酸铝试剂4mL。
2．4测定方法：精密吸取一定量芦丁对照品或供试
品溶液，置于25mL比色管中，加入10％硝酸铝溶
液4mL，用水稀至刻度，摇匀，放置10min后，用
1cnl比色皿以试剂空白为参比，在波长271nm处
测定吸光度。
2．5标准曲线及线性范围t精密吸取0．15、0．30、
0．45、0．60、0．75mL芦丁对照品，按实验方法处理，
测定吸光度，并随行做空白试验。得标准曲线回归方
程A一0．0496c一0．0114，r=0．9998，线性范围
为3～15pg／mL。
2．6供试品溶液的制备；称取一定量的鸡血藤干品
按固液比1：20加入90％乙醇(含2“盐酸)加热回
流60min，提取2次，残渣留下备用。合并提取液，
用NaHCo。中和，滤过，滤液回收乙醇，残留物即为
样品I。将上述残渣按固液比1：20加入70％乙醇
加热回流60min，提取2次，合并提取液并回收乙
醇，残留物即为样品Ⅱ。将样品I按质量比1t 10分
别用醋酸乙酯和氯仿加热回流提取60min，萃取液
回收溶剂，即得样品Ⅲ和V。样品Ⅱ按质量比1：10
用醋酸乙酯加热回流提取60min，萃取液回收溶
荆，即得样品IV。另称取一定量的鸡血藤千品按固液
比1：20加入70％乙醇加热回流60min，提取2
次，合并提取液，回收溶剂，残留物即为样品Yl。精密
称取一定量样品I～Ⅵ，用70％乙醇溶解并定容至
100mL，作为供试品溶液。
2．7精密度试验1分别精密吸取2．00mL，I～Vl
供试品溶液各5份，按实验方法操作，测定其吸光
度。结果表明，吸光度RSD分别为I．42％、0．54％、
1．71％、1．32％、1．84％、1．37％。
2．8稳定性试验：精密吸取I～Ⅵ供试品溶液，按
实验方法操作，每隔10min分别测定其吸光度，结
果在60min内，吸光度RSD分别为1．12％、
0．17％、2．48％、0．97％、0．90％、0．23％。
2．9回收率试验{精密吸取2．oomL，I～．1Jl供试
品溶液，加人芦丁对照品溶液(O．5mg／mL)0．4、
0．4、0．3、0．3、0．3mL测定吸光度，计算得平均回收
率分别为100．81％(RSD为2．7l％)、104．90％
(RSD为1．700A)、103．47％(RSD为0．96％)、
101．07％(RSD为0．88％)、105．07％(RSD为
1．53％)、i00．40％(RSD为0．37％)b一5)。
2．10样品的测定：取I～Ⅵ供试品溶液，测定吸光
度，按回归方程计算黄酮，结果分别为0．366％、
0．030％、23．820A、1．196“、25．84％、2．56蹦。
3结论
本实验建立了紫外分光光度法测定丰城鸡血藤
提取物中总黄酮的方法。实验表明，本法具有操作简
单、灵敏度高、准确度较好、试剂用量少、重现性好等
优点，用于丰城鸡血藤中总黄酮的测定，结果满意。
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万方数据
紫外分光光度法测定丰城鸡血藤中总黄酮
作者： 余燕影， 彭志兵， 曹树稳
作者单位： 余燕影,彭志兵(南昌大学,化学系,江西,南昌,330047)， 曹树稳(南昌大学,食品科学教育部
重点实验室,江西,南昌,330047)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(11)
被引用次数： 6次

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