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益母草中不含马兜铃酸的薄层鉴别



全 文 :益母草中不含马兜铃酸的薄层鉴别
朱爱梅
(广州潘高寿药业股份有限公司 ,广东 广州  511490)
  益母草为唇形科植物益母草 Leonurus japoni-
cus Hout t. 的地上部分 ,为妇科常用药 ,主治月经不
调 ,痛经 ,经闭 ,恶露不尽 ,水肿尿少 ,急性肾炎水肿
等症 [1 ]。 益母草的化学成分主要有:生物碱类 ,二萜
类 ,苯丙醇苷 ,挥发油等 [2 ]。 近年来有不少文献报道
益母草有肾毒性 [3, 4 ] ,因此有些中医专家推测益母草
的肾毒性缘自其含有马兜铃酸 ,但国内外文献均未
见此报道。鉴于马兜铃酸的严重肾毒性及基因致癌
毒性 [ 5 ] ,本实验对益母草中是否含有马兜铃酸进行
了薄层鉴别研究。
1 仪器与试药
三用紫外线分析仪 ,定量毛细管 ,硅胶 G(青岛
海洋化工厂 ) ,所用试剂均为分析纯 ;益母草药材、马
兜铃酸对照品由中国药品生物制品检定所提供。
2 方法与结果
2. 1 马兜铃酸对照品溶液的制备:取马兜铃酸对照
品适量 ,加乙醇制成 0. 5 mg /mL的溶液 ,作为对照
品溶液。
2. 2 供试品溶液的制备: 取益母草 3 g ,加乙醇 50
m L,加热回流 1 h滤过 ,滤液蒸干 ,残渣加乙醇 1
m L使溶解 ,作为供试品溶液。
2. 3 薄层色谱条件及结果: 按《中华人民共和国药
典》 2000年版一部薄层色谱法试验 ,吸取供试品溶
液、对照品溶液各 20μL,分别点于同一硅胶 G薄层
板上 ,使成条状 ,以甲苯-醋酸乙酯-水-甲酸 ( 20∶
10∶ 1∶ 1)的上层溶液为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干。
置日光下和紫外灯 ( 365 nm)下检视。供试品色谱中 ,
与对照品色谱相应位置上无相同颜色条斑 (图 1)。
2. 4 检测限试验:精密吸取马兜铃酸对照品溶液
( 0. 5 mg /mL) 1 mL置 10 mL的容量瓶中 ,加乙醇
稀释至刻度 ,摇匀 ,即得。吸取此稀释液 5, 6, 7, 8, 9,
10, 20μL点于同一硅胶 G薄层上 ,按 2. 3项下方法
检视 ,点样量少于 6μL时观察不到马兜铃酸斑点。
因此本法的检测限为 0. 3μg。
2. 5 加样试验: 取益母草 3 g ,加马兜铃酸对照品溶
液 ( 0. 5 mg /m L) 1 mL,按 2. 1项下方法制备加样试
1-马兜铃酸对照品  2-供试品
A-日光下检视  B-紫外灯 ( 365 nm)下检视
图 1  TLC图谱
验的样品溶液。 吸取此液及马兜铃酸对照品溶液各
2μL点于同一硅胶 G薄层板上 ,按 2. 3项下方法检
视。 样品色谱中 ,在与对照品色谱相应位置上 ,有相
同颜色、强度相当的马兜铃酸斑点。
3 讨论
3. 1 供试品溶液的制备 ,试用了 3种方法: ( a)加乙
醇加热回流 ; ( b)用氨水湿润后 ,加乙醇超声提取 ;
( c)用氨水湿润后 ,加甲醇冷浸过夜。 结果 3种方法
的薄层色谱基本一致 ,均检不出马兜铃酸。加样试验
表明:加乙醇加热回流提取马兜铃酸是可行的。
3. 2 展开剂选用《中华人民共和国药典》 2000年版
一部马兜铃酸项下马兜铃酸薄层色谱的展开剂。 供
试品溶液的点样量 ,试用了 3, 5, 10, 20μL,均检不
出马兜铃酸。可以认为益母草基本不含马兜铃酸。至
于益母草的肾毒性由其所含的何种成分引起 ,还有
待进一步的研究。
参考文献:
[1 ] 中国药典 [ S] . 2000年版 .一部 .
[ 2 ] 晁 志 ,周秀佳 .益母草类中药的研究概况和进展 [ J] . 中草
药 , 1998, 29( 6): 414-417.
[3 ] 王永钧 .肾病门诊 [M ] .杭州:浙江科学技术出版社 . 1994.
[ 4] 蔡浙毅 ,周锦明 ,葛缘仁 .益母草对肾功能及其组织形态影响
的动物实验研究 [ J ]. 上海中医药杂志 , 2000, 11: 37-39.
[ 5] 国 植 ,徐 莉 . 对广防己、关木通导致的国际大规模中毒事
件的反思 [ J ]. 中草药 , 2001, 32( 1): 88-89.
·623·中草药  Chinese T raditional and Herbal Drug s  2002年第 33卷第 7期
收稿日期: 2001-08-28
作者简介:朱爱梅 ( 1965-) ,女 ,主管药师 , 1989年毕业于上海医科大学药学院 ,现任广州潘高寿药业股份有限公司中心检验室主任 ,主要
从事中药质量标准的研究。 Tel: 020-84801664