全 文 ：[5 ]　何怀冰 ,王　蓓 ,陈　筠 ,等 .荧光光谱法测定家兔中丹参素血
浓度及其药代动力学参数 [ J ]. 药学通报 , 1983, 18( 2): 48-49.
[ 6]　赵福芹 ,王爱莲 ,王　林 .中药制剂中丹参素的家兔体内分布
研究 [ J ]. 中国药学杂志 , 1994, 29( 5): 291-293.
HPLC法测定不同品种柴胡中的柴胡皂苷 a、 c、 d的含量
茅仁刚 1 ,林东昊 1 ,王智华 2 ,洪筱坤 2 ,潘胜利 3
( 1. 上海师范大学新康制药厂 ,上海　 200234; 2. 上海中医药大学中药学院 ,上海　 200032;
3. 复旦大学药学院 ,上海　 200032)
摘　要: 目的　考察不同品种柴胡中柴胡皂苷 a、 c、 d的含量 ,以期扩大柴胡药用品种的范围。 方法　采用 RP-
HPLC法 ,使用 LUN A C18柱、乙腈 -水为流动相进行梯度洗脱 ,检测波长为 210 nm,以柴胡皂苷 a、 c、 d含量为指标
进行比较。结果　不同品种柴胡中的柴胡皂苷 a、 c、 d含量差异悬殊 ,其中云南会泽产多枝柴胡中的含量最高。结论
研究所建立的方法适合不同品种柴胡中柴胡皂苷 a、 c、 d的定量分析 ,并且结果准确可靠。
关键词: 柴胡 ;品种 ;柴胡皂苷 a、 c、 d; HPLC法
中图分类号: R282. 2; R286. 02　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 05 0412 03
Quantitative analysis of saikosaponin a, c, d in different species
of Radix Bupleuri by HPLC
MAO Ren-gang
1
, LIN Dong-hao
1
, W ANG Zhi-hua
2
, HON G Xiao-kun
2
, PAN Sheng-li
3
( 1. Xinkang Pharmaceutica l Facto ry , Shanghai No rmal Univ ersity, Shanghai 200234, China;
2. Co lleg e of TCM , Shanghai Univ e rsity of TCM , Shanghai 200032, China;
3. Pharmaceutical Co lleg e, Fudan Univ e rsity , Shanghai 200032, China )
Abstract: Object　 To observ e the content of saikosaponin a, c, d ( ss a, ss c, ss d) in dif ferent
species o f Radix Bupleuri and exploi t the medical use of them. Methods　 An optimal RP-HPLC method
w as set up. The samples w ere sepa ra ted by LUN A C18 column with acetoni t rile-w ater as mobile phase in a
g radient elution, and detected wi th UV 210 nm. Compa rison w as done w ith the index of ss a , ss c, ss d.
Results　 The amount of ss a, ss c, ss d in a va riety of species was remarkably di fferent. Among those,
the content of Bupleurum polyclonum Y. Li et S. L. Pan yielded in Huize, Yunnan Province w as the high-
est. Conclusion　 The HPLC method is suitable and accurate fo r the quantitativ e analysis of ss a, ss c, ss
d in di fferent species of Radix Bupleuri .
Key words: Radix B upleuri; species; saiko saponin a , c, d ( ss a, ss c, ss d) ; HPLC method
　　柴胡是伞形科 ( Umbel liferae)柴胡属 ( Bupleu-
rum L. )植物的干燥根 ,具有解表和里、疏肝解郁、
升举阳气之功效 ,为中医治疗少阳证的首选要药。
《中华人民共和国药典》 2000年版规定北柴胡 Bu-
pleurum chinense DC.和狭叶柴胡 Bupleurum scor-
zonerifol ium Willd. (习称南柴胡、红柴胡 )为正品。
然而由于我国柴胡属植物品种众多 ,除海南外 ,全国
各地均有分布 [1 ] ,各地对柴胡的用药品种意见不一 ,
加之近年柴胡出口转畅 ,内需增加 ,市场需求量较
大 ,而野生资源量减少 ,人工栽培生产周期长、产量
低 ,因此根据当地所产柴胡而作为习惯用药的较为
普遍 ,各地供以药用的除南、北柴胡外还有同属 20
余个品种 [2 ]。为考察不同品种柴胡的质量 ,本研究采
用 RP-HPLC法对 23种柴胡样品中柴胡皂苷 a、 c、 d
( saikosaponin a、 c、 d,简称 ss a、 ss c、 ss d)进行了定
量分析。
1　仪器和材料
1. 1　仪器、药品: PERKIN ELMER高效液相色谱
仪 ( series 200 LC泵、 DAD 235 C型检测器 )。甲醇、
乙腈 (均为国产色谱纯 ) ,氨水 (国产分析纯 ) ,柴胡皂
苷 a、 c、 d对照品由上海医药工业研究院提供。
1. 2　实验材料:不同品种柴胡共 23个样品 ,由复旦
大学药学院潘胜利教授鉴定和提供。
2　实验方法及结果
·412· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 5期
收稿日期: 2001-08-07作者简介:茅仁刚 ( 1968-)男 ,上海人 ,工程师 ,硕士 ,现任上海师范大学新康制药厂技术副厂长 ,主要从事中药、天然产物活性成分和制剂研究。 Tel: ( 021) 64322290　 E-mail: rgmao@ eas tday. com
2. 1　色谱条件: 色谱柱: LUN A C18 ( 2)柱 ( 250 mm×
4. 6 mm, 5μm);柱温: 室温 ; UV检测波长: 210
nm;灵敏度: 0. 2 AU FS;流动相: 乙腈 -水 ;流速: 1
m L /min;洗脱梯度: 见表 1。
表 1　流动相的洗脱梯度
时间 ( min) 1 10 15 30 40 55
乙腈 (% ) 10 25 30 40 60 80
水 (% ) 90 75 70 60 40 20
2. 2　样品溶液的配制:取已干燥的柴胡样品适量 ,
粉碎 ,过 20目筛。准确称取各样品粗粉 0. 25 g ,置
10 mL容量瓶中 ,加 5%氨水 -甲醇溶液 8 mL,润湿
30 min,定容至 10 mL,密闭 ,超声提取 1 h。离心 ,取
上清液 8 mL,挥干 ,加适量甲醇溶解 ,移入 2 mL容
量瓶内 ,定容至刻度。临用前过 0. 45μm滤膜 ,作样
品溶液。
2. 3　标准曲线及线性范围: 准确称取柴胡皂苷 a、
c、 d对照品各约 5 mg ,分别置于 5 mL容量瓶中 ,用
甲醇溶解并稀释至刻度。混匀后分别进样 1, 5, 10,
15, 20μL,按上述色谱条件作 HPLC分析。 以峰面
积对进样量进行回归处理 ,得柴胡皂苷 a、 c、 d的线
性回归方程及线性范围 ,见表 2。
2. 4　重复性试验: 准确称取 1号样品粗粉约 0. 25g ,
表 2　柴胡皂苷的线性方法
名称 线性方程 r 线性范围 (μg)
ss a Y= 2. 037 7× 105+ 1. 155 5× 106X 0. 999 9 1. 02～ 20. 40
ss b Y= 4. 764 4× 105+ 9. 434 6× 105X 0. 999 2 1. 03～ 20. 60
s s c Y= 3. 403 1× 105+ 1. 352 5× 106X 0. 999 2 1. 05～ 21. 00
按样品溶液制备方法进行提取 ,按上述色谱条件进
样 20μL,结果样品中柴胡皂苷 a、 c、 d含量的 RSD
分别为 2. 8% 、 1. 1%、 2. 1% (n= 5)。
2. 5　精密度试验:将柴胡皂苷混标溶液按同样色谱
条件进行 HPLC分析 ,连续 5次 ,每次 20μL,柴胡
皂苷 a、 c、 d含量的 RSD 分别为 1. 6% 、 2. 0% 、
1. 2% 。
2. 6　回收率试验:准确称取 1号样品粗粉约 0. 15
g ,精密加入柴胡皂苷 a、 c、 d混标溶液 1 mL,一式 5
份 ,按样品溶液制备方法进行提取 ,以同样色谱条件
分别进样 20μL,柴胡皂苷 a、 c、 d的加样回收率分
别 为 93. 2% ( RSD = 3. 5% )、 95. 9% ( RSD =
1. 7% )、 95. 6% ( RSD= 3. 3% )。
2. 7　含量测定: 结果见表 3,对照品、样品图谱见
图 1。
3　讨论
3. 1　由于柴胡皂苷 a、 d在提取过程中受酚类或酸
表 3　不同品种柴胡属植物 ss a、 ss c、 ss d含量测定结果
编号 样　品 名　　称 产　地
含　　　量 (% )
ss a ss c ss d s s( a+ c+ d) ss (a+ d)
1北柴胡 Bupleurum chinense DC. 河北 石家庄 0. 48 0. 26 0. 63 1. 37 1. 11
2狭叶柴胡 B. scorzonerifol ium Willd. 天津 0. 37 0. 18 0. 31 0. 86 0. 68
3银州柴胡 B. yinchowense Sh an et Y. Li 宁夏 吴中 0. 68 0. 15 0. 37 1. 20 1. 05
4线叶柴胡 B. angust issim um ( Franch. ) Ki tagaw a 内蒙古 包头 0. 27 0. 17 0. 28 0. 72 0. 55
5多枝柴胡 B. polyclonum Y. Li et S. L. Pan 云南 会泽 3. 66 0. 82 2. 96 7. 44 6. 62
6
　
窄竹叶柴胡
　
B. m arg inatum Wall. ex DC. var. stenophyl lum
Sh an et Y. Li
广西 柳州
　
0. 75
　
0. 13
　
0. 64
　
1. 52
　
1. 39
　
7锥叶柴胡 B. bica ule Helm 内蒙古 呼伦贝尔盟 0. 15 0. 07 0. 15 0. 37 0. 30
8小叶黑柴胡 B. sm ithi i Wolf f var. parvifol ium Shan et Y. Li 宁夏 银川 0. 20 0. 11 0. 32 0. 63 0. 52
9大叶柴胡 B. longiradiatum Tu rcz 吉林 通化 0. 19 0. 04 0. 15 0. 38 0. 34
10黑柴胡 B. sm ithi i Wolf f 辽宁 沈阳 0. 43 0. 42 0. 48 1. 33 0. 91
11阿尔泰柴胡 B. kryloviam Schis chk. ex Kry1. 新疆 乌鲁木齐 0. 59 0. 04 0. 16 0. 79 0. 75
12四川柴胡 B. sichuanense S. L. Pan et Hsu 四川 汶川 1. 08 0. 19 1. 06 2. 33 2. 14
13韭叶柴胡 B. kunm ingense Y. Li et S. L. Pan 云南 昆明 1. 71 0. 67 2. 01 4. 39 3. 72
14泸西柴胡 B. lu xinese Y. Li et S. L. Pan 云南 建水 0. 64 0. 53 0. 58 1. 75 1. 22
15川滇柴胡 B. candolle Wall. Ex DC. 云南 会泽 - - - - -
16柴首 B. chaishou i Sh an et Sh eh 四川 汶川 0. 88 0. 30 0. 71 1. 89 1. 59
17
　
空心柴胡
　
B. long icaule Wall. ex DC. var. f ranchet ii de
Boiss.
贵州 毕节
　
0. 05
　
-
　
0. 03
　
0. 08
　
0. 08
　
18汶川柴胡 B. wenchuanese Sh an et Y. Li 四川 汶川 1. 47 0. 73 2. 25 4. 45 3. 72
19丽江柴胡 B. rocki i Wolf f 云南 丽江 1. 38 0. 31 0. 84 2. 53 2. 22
20细茎有柄柴胡 B. petiolu latum Franch. v ar. tenerum Shan et Y. Li 云南 丽江 1. 09 0. 38 0. 88 2. 35 1. 97
21小柴胡 B. hamil ton ii Balak 云南 昆明 0. 11 0. 02 0. 08 0. 21 0. 19
22马尔康柴胡 B. malconense Shan et Y. Li 四川 汶川 0. 52 0. 18 0. 51 1. 21 1. 03
23
　
黄花鸭跖柴胡
　
B. commelynoideum d e Bois s. v ar. f lavif lorum
Shan et Y. Li
青海 湟中
　
0. 13
　
0. 19
　
0. 15
　
0. 47
　
0. 28
　
　　注: —痕量
·413·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 5期
图 1　柴胡属植物北柴胡 (A)和柴胡 (B)的 HPLC图谱
性成分的影响 ,易使环氧醚键开环 ,转化为柴胡皂苷
b1、 b2 ,因而通常采用弱碱性溶剂提取原生柴胡皂苷
a、 c、 d。本实验通过提取方法比较 ,选择了 5%氨水 -
甲醇溶液为提取溶剂 ,超声提取 60 min的提取
方法。
3. 2　由于柴胡皂苷 a、 c、 d的极性差异较大 ,且不同
品种柴胡的化学组分差异很大 ,用固定流动相进行
洗脱时不能使全部样品的柴胡皂苷 a、 c、 d得到良好
分离。因而本实验采用梯度洗脱 ,在上述梯度条件下
各样品中的 3种皂苷成分得到了良好分离。
3. 3　以柴胡皂苷 a、 c、 d为检测指标进行含量测定
结果表明:不同品种的柴胡 ,其柴胡皂苷含量差异悬
殊 ,以有效成分柴胡皂苷 a、 d含量之和计 , 23种柴
胡的含量从痕量到 6. 62% ,其中川滇柴胡、空心柴
胡、小柴胡的含量极低 ,其药用价值值得商榷 ;而多
枝柴胡、韭叶柴胡、汶川柴胡、丽江柴胡、四川柴胡的
含量均明显高于 2000年版《中华人民共和国药典》
规定使用的南、北柴胡 ,堪称为柴胡属植物中的上
品 ,其中多枝柴胡皂苷含量高达 6%以上 ,因此可考
虑扩大柴胡药用品种的范围 ,增加这些品种的栽培 ,
以满足市场需求。
参考文献:
[ 1]　潘胜利 ,李　颖 ,戴克敏 .云南省柴胡属药用植物的分类及其
化学成分的研究 [ J] . 上海第一医学院学报 , 1984, 11( 1 ): 1-
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药用柴胡の研究 (第 1报 ) [ J] . 药用植物研究 , 1996, 19( 1): 1-
17.
汉中地区虎杖中白藜芦醇苷及苷元含量的测定
周建军 ,张宏杰 ,杨培君 ,李会宁
(陕西省资源生物重点实验室 陕西理工学院 ,陕西 汉中　 723000)
摘　要: 目的　测定汉中地区虎杖中白藜芦醇苷及苷元的含量。 方法　采用 HPLC法直接测定 ,色谱柱为 Eclipse
XDB C8柱 ,流动相为乙腈 -水 ,流速为 1 m L /min,检测波长为 303 nm。结果　虎杖中白藜芦醇苷的含量为 2. 5% ,
白藜芦醇的含量为 0. 43%。 结论　汉中地区虎杖中白藜芦醇的含量为首次报道 ,白藜芦醇苷的含量高于文献报道
的结果。
关键词: 虎杖 ;汉中地区 ;白藜芦醇苷 ;白藜芦醇 ; HPLC
中图分类号: R286. 02　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 05 0414 03
Determination of resveratrol glucoside and resveratrol in radix and
rhizome of Polygonum cuspidatum yielded in Hanzhong Region
ZHOU Jian-jun, ZHANG Hong-jie, YAN G Pei-jun, LI Hui-ning
( Bio resources Key Labo rato ry of Shanxi Province, Shanxi Science
and Enginee ring Co lleg e, Hanzhong Shanxi 723000, China)
Abstract: Object　 To determine the content of resv erat rol g lucoside and resv erat rol in radix and rhi-
zome o f Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. yielded in Hanzhong Region. Methods　 The HPLC method
w as used to assay resverat rol g lucoside and resv era tro l directly , using Eclipse XDB C8 column and acetoni-
trile-w ater as the mobile phase, the UV detection waveleng th was 303 nm, with a f low rate of 1 mL /min.
Results　 The content of resv erat rol g lucoside w as 2. 5% and resverat rol was 0. 43% in the radix and rhi-
zome. Conclusion　 The content of resv erat rol g luco side is higher than that in the former refernece. The
·414· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 5期
收稿日期: 2001-08-14基金项目:陕西省教育厅专项科研基金资助 ( 01 JK094)作者简介:周建军 ( 1953-) ,男 ,陕西城固县人 ,副教授 ,硕士 , 1987年获西安医科大学医学硕士学位 ,现任陕西省资源生物重点实验室分析测试分室主任 ,主要研究方向为秦巴山区生物资源开发利用 ,已发表学术论文 20余篇。 　 Tel: 0916-2641835( H)