全 文 ：摇匀, 即得 (含山柰素 01010 3 m gömL )。
213　供试品溶液的制备: 取本品, 研成细粉, 取约 1
g, 精密称定, 加入甲醇 50 mL , 加热回流 1 h, 滤过,
残渣用甲醇少量洗涤 2 次, 洗涤液并入滤液中。滤液
减压浓缩至干, 用水 25 mL 分次定量转移至分液漏
斗中, 用乙醚 40 mL 萃取 3 次 (15, 15, 10 mL ) , 萃取
液合并, 蒸干, 残渣加甲醇溶解并转移至 10 mL 量
瓶中, 并稀释至刻度, 摇匀, 微孔滤膜滤过, 取续滤液
作为供试品溶液。
214　线性范围的考察: 精密量取山柰素对照品贮备
溶液 (01103 m gömL ) 011, 015, 110, 115, 210, 310,
510 mL 分别置 10 mL 量瓶中, 用甲醇稀释至刻度,
摇匀, 制成系列浓度的溶液。分别量取 10 ΛL 进样,
以山柰素的量为横坐标, 峰面积为纵坐标, 绘制标准
曲 线, 计 算 得 回 归 方 程 为 Y = 224 07711X -
2 74212, r= 01999 9。结果表明山柰素在01010 3～
01515 0 Λg 时与峰面积值呈良好的线性关系。
215　精密度试验: 精密量取山柰素对照品溶液 10ΛL , 重复进样 6 次, 测定山柰素峰面积值, 结果其
R SD = 0177% (n= 6)。
216　稳定性试验: 取供试品溶液 (批号 20000628)
分别于 0, 2, 4, 6, 8 h 进样 10 ΛL , 测得样品中山柰素
峰面积值的R SD = 1133% (n= 6)。结果表明供试品
溶液在 8 h 内稳定。
217　重现性试验: 取同一批样品 (批号: 20000628)
5 份, 按上述方法制备供试品溶液, 依法测定, 计算
山柰素含量, 结果其R SD = 1157% (n= 5)。
218 　回收率试验: 取已知含量的样品 (批号:
20000628, 含量为 01109 7 m gög) 1 g, 分别精密加
入山柰素对照品溶液 (01236 m gömL ) 015 mL , 照
上述色谱条件和供试品制备方法操作, 结果平均回
收率为 99189% , R SD = 1183% (n= 6)。
219　样品测定: 照已建立的含量测定方法, 对金刚
藤颗粒中的山柰素进行了含量测定, 结果见表 1。
表 1　金刚藤颗粒中山柰素含量测定结果 (n= 3)
Table 1　Kaempferol in J ingangteng Granula (n= 3)
批号 山柰素含量ö(m g·g- 1) 批号 山柰素含量ö(m g·g- 1)
990909 0. 117 4 990916 0. 100 4
990921 0. 104 8 990923 0. 102 0
990907 0. 096 9 991005 0. 094 8
991007 0. 094 8
3　讨论
311　本品成分复杂, 用甲醇作溶剂提取后, 在主峰
前有大量的极性组份, 为了减小色谱柱的负荷以及
其他组份对山柰素的干扰, 故用乙醚对样品进行了
萃取, 并且对萃取的次数进行了考察, 测定结果表
明: 用乙醚萃取 3 次即可提取完全, 第 4 次萃取液未
检出山柰素。
312　对供试品溶液的制备所用溶剂和提取方法进
行了考察比较, 如用甲醇、乙醇、醋酸乙酯、乙醚作为
提取溶媒进行了考察; 同时对超声提取、索氏提取、
加热回流方法及提取时间进行了比较, 制备了各种
供试品溶液。经比较, 选用甲醇加热回流、乙醚萃取
制备供试品溶液为最佳方法。
313　比较了不同系统和比例的流动相, 如甲醇2水2
磷酸、乙腈2水2磷酸、乙腈2水2磷酸2三乙胺系统, 结
果以乙腈2水2磷酸2三乙胺 (29∶71∶013∶0105) 为
流动相, 使山柰素与其相邻的组份峰可获得良好分
离, 理论塔板数以山柰素计约为 7 000, 在上述条件
下, 山柰素与其相邻峰分离度符合要求。
314　在进行波长选择时, 采用甲醇和流动相分别配
制山柰素对照品溶液进行紫外吸收扫描, 表明在 365
nm 处均有最大吸收, 故选择检测波长为 365 nm。
HPLC 法测定水辣蓼中芦丁的含量
罗　杰1, 陆　霞2Ξ
(11 广州白云山中药厂, 广东 广州　510015; 21 广东省药品检验所, 广东 广州　510015)
　　辣蓼为蓼科植物水辣蓼 P oly g onum hy d rop ip er
L. 或旱辣蓼 P. f laccid um M eisn. 的干燥全草。具
有除湿化滞等功效, 用于痢疾、肠炎、食滞等。辣蓼含
黄酮类物质, 其中芦丁具有抗炎作用 [1 ]、止血作
用[2 ]。本实验采用H PL C 法对水辣蓼中芦丁进行测
定, 可以更好地掌握和控制药材的质量。
·582·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 3 期 2004 年 3 月
Ξ 收稿日期: 2003205227
作者简介: 罗　杰 (1966—) , 男, 广东人, 主管中药师, 1992 年毕业于广州中医药大学, 主要从事中药质量标准研究。
T el: (020) 88129119
1　仪器与试药
H P1100 高效液相色谱仪, DAD 检测器, AND
十万分之一电子天平。芦丁对照品 (中国药品生物制
品检定所, 批号 08029303) , 水辣蓼 P. hy d rop ip er
L. 购于广州市药材公司, 经广州市药品检验所刘柏
英鉴定; 甲醇 (色谱纯) , 硅胶 G (青岛海洋化工厂)。
2　方法与结果
211 　色谱条件: 色谱柱: 依利特 H ypersil C 18
(250 mm ×416 mm , 10 Λm ) ; 流动相: 甲醇2014% 磷
酸 (35∶65) ; 流速: 1 mL öm in; 检测波长: 360 nm。
212　对照品溶液的制备: 精密称芦丁对照品适量,
置量瓶中, 加甲醇制成 25 ΛgömL 的溶液, 即得。
213　供试品溶液的制备: 取药材粉末 015 g, 精密称
定, 加入乙醚 50 mL , 超声 15 m in, 滤过, 弃去乙醚
液, 药渣挥干乙醚。药渣精密加甲醇 50 mL , 称定质
量, 水浴回流 1 h, 补足减失的甲醇质量, 滤过, 弃去
初滤液, 取续滤液作为供试品溶液。
214　标准曲线的制备: 取芦丁对照品溶液 (161704ΛgömL ) , 分别进样 5, 10, 15, 20 ΛL , 按拟定色谱条
件测定其峰面积。以芦丁进样量为纵坐标, 峰面积为
横坐标, 绘制标准曲线。结果表明, 芦丁在 01083 5～
01334 1 Λg 进样量与峰面积呈良好的线性关系。回
归方程为 Y = 01000 7X + 01002 9, r= 01999 7。
215　精密度试验: 取芦丁对照品溶液 (161704 Λgö
mL ) 10 ΛL 各进样 5 次, 测定, 结果芦丁峰面积的
R SD = 016%。
216　稳定性试验: 取供试品溶液, 每隔 2 h 测定芦
丁峰面积 1 次, 连续测 4 次, 结果其R SD = 0182%。
表明供试品溶液在 6 h 内测定是稳定的。
217　重现性试验: 取样品一式 5 份, 制备供试品溶
液, 进样测定, 结果芦丁峰面积R SD = 211%。
218　回收率试验: 取已测定芦丁含量 (01736 m gö
g ) 的样品约 0125 g, 精密称定, 再精密加入 01173
m g 芦丁对照品, 按上述供试品溶液的制备方法操
作, 结果平均回收率为 98% , R SD 为 312%。
219　样品的含量测定: 取样品制备供试品溶液, 分
别精密吸取对照品溶液与供试品溶液 10 ΛL , 进样,
测定, 结果见表 1。色谱图见图 1。
表 1　水辣蓼中的芦丁测定结果 (n= 2)
Table 1　Con ten t of rutin in P. hyd rop ip er (n= 2)
批号 芦丁含量ö(m g·g- 1)
1 0. 613
2 0. 736
3 0. 872
4 0. 9223 2芦丁3 2ru tin
图 1　芦丁对照品 (A)和水辣蓼 (B)的 HPLC 图
F ig. 1　HPLC chromatogram s of rutin reference
substance (A) and P. hyd rop ip er (B)
3　讨论
　　水辣蓼中芦丁含量测定的流动相还考察了甲
醇2水 (35∶65) (É ) [3 ]、甲醇2水2乙腈2冰醋酸 (30∶
5715∶10∶215) (Ê ) [4 ]。采用流动相 (É ) , 芦丁峰有
少许拖尾。采用流动相 (Ê ) , 芦丁峰分离效果较好,
但要采用 4 种溶剂, 成本也较高, 而采用甲醇2014%
磷酸溶液 (35∶65) , 芦丁峰分离效果好, 且成本低、
简便。
References:
[ 1 ]　H uang T K. H and book of Comp osition and P harm acolog ica l
A ction of Comm on ly 2used T rad itiona l Ch inese M ed icine (常用
中药成分与药理手册) [M ]1 Beijing: Ch ina M edico2Phar2m a2
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[ 2 ]　Edito rial O ffice of N ational Ch inese H erbal M edicine Co llec2
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草药汇编) [M ]1 Beijing: Peop le’sM edical Pub lish ing House,
19751
[ 3 ]　D eng F L , Chen B M , Chen G H , et a l. D eterm ination of
ru tin in F los S op horae by H PL C [J ]1 B u ll H unan M ed U niv
(湖南医科大学学报) , 2000, 25 (16) : 5971
[ 4 ]　Zhao D F. D eterm ination of ru tin in Shanhecha Cap su le by
H PL C [J ]1 Ch in T rad it P a t M ed (中成药) , 2002, 24 (9) :
7241
　青藏高原红景天提取物　
兰州汇元生物技术研究所
联系人: 李义富　电话: (0931) 7357097　手机: 13109366988
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