全 文 ：推测新工艺提取的血竭中含黄酮或 类成分低于传
统工艺中的含量 ,与薄层色谱中看到的紫檀 含量
较低结果一致。
1-新工艺血竭　 2-芒果牌血竭　 3-柬龙牌血竭
图 2　 3种血竭的紫外光谱图
2. 5　高效液相色谱 [ 2]:色谱条件: 用十八烷基硅烷
键合硅胶为填充剂 ,乙腈 -1%冰醋酸溶液 ( 33∶ 67)
为流动相 ,室温 ,流速为 1 mL /min,检测波长为 280
nm。 测定方法:分别吸取芒果牌血竭和新工艺提取
的血竭备用液 ,微孔滤膜 ( 0. 45μm)过滤 ,取续滤液
各 20μL,注入高效液相色谱仪 ,记录 HPLC色谱
图。结果见图 3。
　　图 3中进一步证实:新工艺提取的血竭中所含
化合物较传统工艺提取的化合物多 ,且含量高 ,大多
数峰的峰面积大于芒果牌血竭 ,如第 5号峰的峰面
积新工艺提取的血竭比传统工艺的高出 28倍。另外
还含有芒果牌血竭中未检出的微量成分 ,如第 18和
25号峰 ;但第 26号峰的峰面积却小于传统工艺提
取的芒果牌血竭 ,该峰为紫檀 。
A-芒果牌血竭　 B-新工艺血竭
图 3　HPLC色谱图
3　讨论
　　厦门今润丰华医药科学公司采用免加热提取工
艺 ,使药物的提取率大大提高 (约为 23% ～ 25% ) ,
这样有利于节约药物资源 ,降低生产成本 ;所提取的
化学成分及含量明显提高 ,尤其适用于遇热易发生
变化的化学成分的提取与分离。新工艺提取物为疏
松的薄片状 ,在甲醇、丙酮、 95%乙醇和 75%乙醇中
的溶解度、澄明度均优于现在市场上各种品牌的血
竭 ,用其为原料进行制剂 ,分散度高 ,表面积大 ,有利
于吸收。 其化学成分的含量与现在上市的传统工艺
提取的血竭存在差异 ,其药效上是否也存在差异 ,还
有待于进一步研究。
参考文献:
[1 ]　 WS3-082( Z-016)-99( Z) ,国家药品监督管理局标准 [S ].
[2 ]　胡迎庆 ,张静泽 ,刘岱琳 ,等 . 两种 “柬龙牌”血竭的真伪鉴别
[ J] .中草药 , 2002, 33( 4): 358-360.
参附汤方药 4种方法提取液的成分比较
修彦凤1 ,孙秀梅2 ,张兆旺 2
( 1. 上海中医药大学中药学院 药剂教研室 ,上海　 200032; 2. 山东中医药大学中药学院 药剂教研室 ,山东 济南　 250014)
摘　要:目的　选择参附汤方药成分的提取工艺。 方法　以人参二醇、人参三醇、总生物碱、酯型生物碱、丹参酮
Ⅱ A、原儿茶醛、总糖、干浸膏为指标 ,在药材粒度、溶剂量、煎提温度、滤过、浓缩等条件相同的前提下 ,采用半仿生
提取 ( SBE)法、水提取 ( W E)法、半仿生提取醇沉 ( SBAE)法、水提醇沉 ( WAE)法进行比较研究。 结果　 8个指标综
合评价 Y值为: SBE法 > W E法> SBAE法> W AE法。 结论　参附汤方药成分的提取以 SBE法提取为佳。
关键词: 参附汤 ;指标成分 ;提取方法
中图分类号: R284. 2; R286. 02　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 08 0699 04
·699·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 8期
收稿日期: 2001-11-12作者简介:修彦凤 ( 1974-) ,女 ,山东栖霞人 ,助教 ,在读博士研究生 , 2000年毕业于山东中医药大学中药学专业 ,研究方向为中药质量控制。 Tel:
021-54231526　 E-mail: xiuyf@ sohu. com
Comparison of SHENFU DECOCTION
*
components extracted by four methods
XIU Yan-feng
1
, SUN Xiu-mei
2
, ZHANG Zhao-w ang
2
( 1. Depa rtm ent o f Pha rmacy , Colleg e of Chinese Mate ria M edica , Shanghai Univ er sity o f TCM , Shanghai 200032, China;
2. Depa rtment o f Pharmacy, Co lleg e of Chinese Materia Medica, Shandong Univ e rsity of TCM , Jinan 250014, China)
Abstract: Object　 To evaluate the ex t ract technolog y of SHEN FU DECOCTION ( SFD) components.
Methods　 Four methods— the semi-bionic ex t raction ( SBE) , the w ater ex t raction (WE) , the semi-bionic
ex t raction by precipi tation wi th alcoho l ( SBAE) , and the w ater ex t raction by precipitation w ith alcohol
(W AE) w ere used to ex t ract SFD, by taking panaxadiol, panaxit riol, to tal alkaloid o f aconi te, aconi tine,
tanshinoneⅡ A , protoca techn aldehyde, to tal sugar and dried ex tract as the markers and to compare and
study the four methods under the same condi tions o f drug g ranula ri ty , so lv ent amount , decocting tempera-
ture, fi lt ra tion, concentration, etc. Results　 Th rough the comprehensiv e evaluation of the eight markers,
the comprehensiv e values Y w ere SBE> WE> SBAE> WAE. Conclusion　 SBE method is better than the
o ther three methods in the ex t raction of SFD components.
Key words: SHEN FU DECOCTION ( SFD) ; ma rker components; ex t raction method
* SHEN FU DECOCTION consists of Radix Ginseng, Radix Aconit i Lateral is Preparata and Herba
Leonuri .
　　参附汤由人参、附子、丹参组成。 为选择其提取
工艺 ,本实验以人参二醇、人参三醇、总生物碱、酯型
生物碱、丹参酮Ⅱ A、原儿茶醛、总糖、干浸膏为指标 ,
根据半仿生提取 ( SBE)法理论 [1～ 4 ] ,在用均匀设计
优选 SBE法条件、药材组合方式及最佳醇沉浓度的
基础上 ,比较该方药 4种方法提取液的成分。
1　仪器与药品
pHS-3C型精密 pH计 (上海雷磁仪器厂 ) ;
M A110型电子分析天平 (上海第二天平仪器厂 ) ;
721-100型分光光度计 (上海第三分析仪器厂 ) ; CS-
930型薄层扫描仪 (日本岛津 ) ; LX J-Ⅱ型离心沉淀
机 (上海医疗器械三厂 ) ; Beckman高效液相色谱仪
(美国贝克曼仪器公司 )。
药材经张兆旺教授鉴定 ,人参为五加科植物人
参 Panax ginseng C. A. Mey. 的干燥根 ;附子为毛
茛科植物乌头 Aconitum carmichaeli Debx. 子根的
加工品 ;丹参为唇形科植物丹参 Salvia mil tiorrhiza
Bge.的干燥根及根茎。
人参二醇、人参三醇、乌头碱、丹参酮Ⅱ A、原儿
茶醛对照品均购自中国药品生物制品检定所 ,其他
试剂均为分析纯。
2　 4种方法提取液的制备
2. 1　 SBE液: 按处方比例称取 10～ 24目的药材粗
粉人参 56 g、附子 42 g、丹参 42 g ,人参与附子混匀
加热回流提取 3次 ,加水量分别为药材量的 10, 6, 6
倍 , pH值分别为 2. 0, 6. 5, 9. 0,提取时间依次为 4,
2, 1 h ,提取液用 4层纱布加 100目筛 ,分别滤过 ,离
心 ( 2 000 r /min, 20 min) ,合并上清液 ,得Ⅰ 液 ;丹
参单独加热回流提取 3次 ,操作条件同上 ,得Ⅱ液 ;
将Ⅰ 液和Ⅱ液混合 ,平均分成两份 ,分别浓缩。一份
浓缩至 500 mL,作为 SBE液 ;另一份浓缩至 175
mL,供制半仿生提取醇沉 ( SBAE)液使用。
2. 2　 SBAE液: 取 2. 1项下另一份浓缩液 175 mL,
加乙醇使含醇量达 80% ,静置冷藏 24 h,离心 ,上清
液回收乙醇后 ,定容至 500 mL。
2. 3　水提取 ( WE)液: 按 2. 1项下方法 ,只改用中
性水提取 ,一份定容至 500 mL作为 WE液 ,另一份
浓缩至 175 mL,供水提醇沉 ( WAE)液使用。
2. 4　W AE液:取 2. 3项下另一份浓缩液 175 mL,
按 2. 2项下方法制得 WAE液。
3　成分的含量测定
3. 1　人参二醇、人参三醇、总生物碱、酯型生物碱的
含量测定:按文献方法 [ 5] ,依法测定 ,结果见表 1。
3. 2　丹参酮Ⅱ A的含量测定
3. 2. 1　色谱条件: 色谱柱: Shim-pack ODS C18柱
( 6. 0 mm× 150 mm);流动相:甲醇-水 ( 77∶ 23) ;检测
波长: 270 nm;流速: 1. 0 mL /min;进样体积: 20μL。
3. 2. 2　标准曲线的制备:精密称取丹参酮Ⅱ A对照
品 2. 3 mg,用氯仿定容于 2 mL容量瓶中 ,精取对照
液 1. 0, 2. 0, 4. 0, 8. 0, 12. 0μL于干燥容量瓶中 ,加
氯仿至 300μL,混匀。吸取 20μL进样 ,以进样量为
横坐标 ,峰面积为纵坐标作图 ,得一过原点的直线 ,
丹参酮Ⅱ A在 0. 077～ 0. 920μg内进样量与峰面积
呈良好线性关系 ,回归方程 Y = 166 198. 919X+
4 413. 247, r= 0. 999 4。
3. 2. 3　含量测定:精取以上 4种提取液各 50 mL,
分别用氯仿萃取 4次 ( 25, 20, 15, 10 mL) ,合并萃取
液 ,回收溶剂至干 ,转移于 1 mL容量瓶中 ,定容。经
·700· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 8期
微孔滤膜滤过 ,进样 20μL,采用外标两点法 ,计算
丹参酮Ⅱ A的含量 ,结果见表 1。
3. 3　原儿茶醛的含量测定
3. 3. 1　溶液的制备: 精取以上 4种提取液各 50
m L,分别用 0. 1 mo l /L盐酸调至 pH 1. 00,用乙醚
萃取 4次 ( 25, 20, 15, 10 mL) ,萃取液回收乙醚近
干 ,残渣用无水乙醇转移并定容至 2 mL,得供试液。
精密称取原儿茶醛对照品 2. 3 mg ,用无水乙醇溶解
并定容至 2 mL,得对照液。
3. 3. 2　薄层扫描条件:λS= 310 nm,λR= 225 nm;灵
敏度:中 ; Sx= 3;狭缝 1. 2 mm× 1. 2 mm;双波长反
射式锯齿扫描。
3. 3. 3　标准曲线的制备及含量测定: 在 0. 3%
CMC-Na硅胶 G薄层板上 ,分别点原儿茶醛对照液
0. 5, 1. 0, 1. 5, 2. 0, 3. 0μL,以氯仿-丙酮 -甲醇 ( 8∶
1∶ 1)为展开剂 ,展开 ,挥干溶剂 ,扫描。 以点样量为
横坐标 ,峰面积为纵坐标作图 ,得一不过原点的直
线 ,原儿茶醛在 0. 575～ 3. 45μg与峰面积呈良好的
线性关系 ,回归方程 Y= 36 551. 516X - 8 985. 989,
r= 0. 999 8。精取供试液 10μL及原儿茶醛对照液
1. 0, 2. 0μL,分别点于同一薄层板上 ,展开 ,扫描 ,结
果见表 1。
3. 4　总糖的含量和干浸膏的测定:按文献方法 [ 5]测
定 ,结果见表 1。
表 1　 4种提取液中各成分的含量测定结果
提取液 人参二醇
( mg /100 g )
人参三醇
( mg /100 g )
总生物碱
( g /100 g )
酯型生物碱
( g /100 g)
丹参酮Ⅱ A
( mg /100 g )
原儿茶醛
(mg /100 g)
总糖
( g /100 g)
干浸膏
( g /100 g)
SBE 　 10. 859 3 　 14. 932 8 　 0. 144 3 　 0. 019 3 　 0. 625 6 　 0. 157 3 　 13. 981 0 　 41. 252 4
W E 9. 229 8 13. 530 8 0. 122 2 0. 017 5 0. 448 1 0. 125 3 10. 928 6 34. 676 2
SBAE 6. 180 0 8. 761 2 0. 106 5 0. 009 2 0. 333 6 0. 095 2 0. 734 6 24. 742 9
W AE 5. 541 8 7. 992 7 0. 098 3 0. 007 6 0. 224 8 0. 068 0 0. 621 4 19. 281 0
4　 4种方法的综合评价
　　将人参二醇、人参三醇、总生物碱、酯型生物碱、
丹参酮Ⅱ A、原儿茶醛、总糖、干浸膏 8个指标各数据
按下列公式进行标准化处理:
x′i , j= xi, j - x jS j 。
式中 xi , j为提取液 i中成分 j的含量 , x j为 4种提取液 i
中成分 j 的平均值 , S j 为成分 j 的标准偏差 ,即 S j =
∑ (x i , j - x j )2
n- 1
, x′i , j为标准化后的值。
　　分别将 x′i, j加权后求和 ,即得综合评价指标 Y
值。 其关系式: Y= (人参二醇+ 人参三醇+ 总生物
碱 -酯型生物碱+ 丹参酮Ⅱ A+ 原儿茶醛 )× 6+ 总
糖× 4+ 干浸膏× 2,结果见表 2。 4种方法 Y值大小
顺序为 SBE> W E> SBAE> WAE。
表 2　 4种提取液中各成分标准化结果
提取液 人参二醇　 人参三醇　 总生物碱　 酯型生物碱 丹参酮Ⅱ A 原儿茶醛　 总糖　 干浸膏　 Y
SBE 1. 153 9 1. 053 9 1. 307 8 1. 006 8 1. 270 0 1. 190 9 1. 072 6 1. 143 7 36. 396 0
W E 0. 507 0 0. 646 7 0. 215 9 0. 699 7 0. 233 9 0. 359 7 0. 631 0 0. 476 0 11. 057 0
SBAE - 0. 703 7 - 0. 738 7 - 0. 559 8 - 0. 716 7 - 0. 434 5 - 0. 422 1 - 0. 843 6 - 0. 532 6 - 17. 292 2
W AE - 0. 957 2 - 0. 961 9 - 0. 964 9 - 0. 989 8 - 1. 069 5 - 1. 128 6 - 0. 860 0 - 1. 087 1 - 30. 168 0
5　讨论
5. 1　以人参二醇、人参三醇、总生物碱、酯型生物
碱、丹参酮Ⅱ A、原儿茶醛、总糖、干浸膏为指标 ,对参
附汤的 4种方法提取液进行比较 ,根据 SBE法理论
和附子炮制原理 ,确定 Y的关系式 ,综合评价指标 Y
值: SBE> WE> SBAE> WAE。本实验又一次提示:
SBE法有可能代替 WE法 , SBAE法有可能代替
WAE法 ,进一步验证了 SBE法的科学性和可行性。
5. 2　中医用药绝不只是单体成分 ,而是多种成分综
合作用的结果 ,这种综合作用从化学成分方面考虑
可能是同一中药共存成分之间和 /或多种中药共存
成分之间的复合作用 ,根据 SBE法理论和附子炮制
的原理 ,以人参二醇、人参三醇、总生物碱、酯型生物
碱、丹参酮Ⅱ A、原儿茶醛、总糖、干浸膏为指标。 同
时 ,根据各指标在工艺选择中的主次 ,给予不同的加
权系数 ,确定综合评价 Y 的关系式: Y= (人参二
醇+ 人参三醇+ 总生物碱 - 酯型生物碱+ 丹参酮
Ⅱ A+ 原儿茶醛 )× 6+ 总糖× 4+ 干浸膏× 2。对 8个
指标的数据进行标准化处理 ,以消除各指标的单位
和量纲不同及各指标数值不同所造成的影响 ,以标
准化指标加权后求和作为综合指标 Y ,优选出 SBE
法较佳条件 ,这样更加科学、合理。
参考文献:
[1 ]　张兆旺 ,孙秀梅 . 试论“半仿生提取法”制备中药口服制剂 [ J ].
中国中药杂志 , 1995, 20( 11): 670-673.
[2 ]　张瑞亭 ,张兆旺 ,孙秀梅 . 思维方式的转换与中药“半仿生提取
法” [ J] . 中国中药杂志 , 1997, 22( 9): 542-544.
[3 ]　张兆旺 ,孙秀梅 .“半仿生提取法”的特点与应用 [ J ]. 世界科学
·701·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 8期
技术 -中药现代化 , 2000, 2( 1): 35-38.
[4 ]　张兆旺 ,孙秀梅 . 中药方剂药效物质提取新技术— “半仿生提
取模式”的初探 [ J] .世界科学技术 -中药现代化 , 2000, 2( 5): 5-
10.
[ 5]　张兆旺 ,修彦凤 ,孙秀梅 .用均匀设计优选参附汤的半仿生提
取法工艺条件 [ J ]. 中国中药杂志 , 2000, 25( 6): 345-347.
双水相体系萃取甘草酸盐的研究
林　强 ,霍　清
(北京联合大学化学工程学院 ,北京　 100023)
摘　要: 目的　研究从甘草中提取甘草酸盐的新工艺。方法　采用与水互溶的有机溶剂的新型双水相体系萃取。结
果　提取甘草酸盐的最佳溶剂为乙醇 /磷酸氢二钾双水相体系 ,此体系的两相分配完全 ,分配系数达 12. 8,收率为
98. 3%。 结论　此方法简单易行 ,是从甘草提取液中制备甘草酸单铵盐的新工艺。
关键词: 有机溶剂 ;双水相萃取体系 ;甘草酸单铵盐
中图分类号: R284. 02; R286. 02　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 08 0702 03
Separation of glycyrrhetate by aqueous two-phase extraction system
LIN Qiang , HUO Qing
( Colleg e o f Chemica l Enginee ring , Beijing Union Univ er sity , Beijing 100023, China)
Key words: o rganic solv ents; aqueous tw o-phase ex t raction system; g lycy rrhetate
　　近年 ,双水相萃取 ( Aqueous Tw o-phase, ATP)
技术因设备投资少 ,操作简单 ,引起了人们极大的重
视 ,并且被广泛用于生物化学 ,细胞生物学和生物化
工等领域。该类双水相体系多为聚乙二醇 /葡萄糖和
聚乙二醇 /无机盐两种 [1 ]。但水溶性聚合物形成的双
水相萃取体系存在着粘度高、分析困难及需要反萃
取。事实上 ,普通的能与水互溶的有机溶剂在无机盐
的存在下也可形成双水相体系 [2 ]。 基于与水互溶的
有机溶剂和盐水相的双水相萃取体系具有价廉、低
毒、较易挥发等特点 ,本实验根据对双水相体系中不
同种类盐分相能力及不同种类有机溶剂的分相情况
开展研究 ,并应用于甘草提取主要成分甘草酸中 ,确
定乙醇 /磷酸氢二钾双水相体系萃取甘草有效成分
的工艺。
1　试剂与仪器
试剂均为分析纯。甘草酸单铵盐 (呼和浩特制药
厂 ,纯度≥ 98% ) ,甘草饮片 (北京同仁堂股份公司饮
片厂出品 )。 800型离心沉淀器 ( 4 000 r /min,上海医
用器械十厂 ) ; 721紫外可见光分光光度计 (北京瑞
利分析仪器厂 )。
2　实验方法
2. 1　双水相体系的配制: 双水相体系按体积配制 ,
各组分浓度用毫升数表示 ,系统总量为 10 mL,置于
10 mL离心试管中 ,加入一定体积的有机溶剂 ,加水
至 10 mL,再加入一定量的盐 ,甘草酸单铵盐加入量
为 0. 2 g。振荡 2 min,放置片刻 ,待溶液分相完全 ,
以 2 000 r /min离心 5 min,读取上下相体系 ,分别
取样分析上下相中甘草酸单铵盐的含量。
相比 R= V t /Vb　V t、Vb分别是上、下相体积
分配系数 K= Ct /Cb　Ct、Cb分别是上、下相甘
草酸单铵盐的浓度
收率 Y= 1 / ( 1+ 1 /RK )
2. 2　甘草浓缩液的制备:将甘草粗粉 ( 40目左右 ) ,
加入少量氨水 ,浸泡 , 100℃煎煮 30 min后 ,过滤 ,
滤液浓缩至 1 /3,得甘草浓缩液 ,低温保存备用。
2. 3　利用双水相乙醇 /磷酸氢二钾体系从甘草中提
取甘草酸:称取 1. 5 g磷酸氢二钾溶于 4 mL甘草浓
缩液中 ,搅拌使溶解 ,并与 6 mL无水乙醇混合 ,倒
入 10 mL的离心试管中 ,以 2 000 r /min离心 3
min,形成两相 ,用分液漏斗将两相分开 ,分别向两
相中缓慢逐滴加入浓硫酸 ,析出大量甘草酸沉淀
( p H= 2) ,停止加酸。放在冰水浴中冷却 10 min,使
沉淀完全析出 ,用无水乙醇洗涤沉淀 ,称量并记录
数据。
2. 4　分析方法:甘草酸单铵盐的含量测定采用紫外
可见分光光度计在 253 nm下测定 [ 4]。
·702· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 8期
收稿日期: 2001-10-06基金项目:北京市教委科技发展项目