全 文 ：·1642· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月
使用微波法提取丹参索与原儿茶醛，提取时间
分别为传统的1／2。
用微波法提取丹参所得丹参素、原儿茶醛及丹
参酮的量均高于传统提取法，说明中药材资源得到
了充分地利用，而提取时间又大大缩短，因此可节省
大量可观的能源。在国际能源价格上涨、世界能源资
源危机的今天，节约能源意味着可以降低中药成本，
有利于占领国内与国际市场。本实验研究为中试提
供了很好的依据。
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正交试验法优选雀儿舌头提取工艺的研究
龙跃1，陈彦君1，杜坡1，赵清治1，潘彦1，张旭2，孙希孟1，张宇虹1
(1．郑州大学化学系，河南郑州450052；2．郑州大学医学院生物教研室，河南郑州450052)
摘要：目的优化雀儿舌头中抗癌活性成分的提取工艺。方法选择乙醇体积分数、乙醇用量、加热温度作为因
素，采用L。(34)正交表，以抗癌括性为指标进行正交优选。结果最佳提取工艺为25℃，加8倍量的75％乙醇提
取。结论该优化的提取工艺扰癌恬性高，稳定性好，适用于产业化。
美毽词：雀儿舌头；提取工艺-正交试验
中图分类号：R286．02 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2005)1l一1642—02
OptimumextractingtechnologyforLeptopuschinensisbyorthogonaltest
LONGYuel，CHENYan—junl，DUP01，ZHAoQin—zhll，PANYanl，ZHANGXu2，
SUNXi—men91，ZHANGYu—hon91
(1．DepartmentofChemistry．ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450052，China；2．DepartmentofBiology
MedicalCo lege，ZhengzhouU iversity，Zhengzhou450052，China)
Keywords：Leptopuschinensis(Bunge)Poiark；extractingtechnology；orthogonaltest
雀儿舌头Leptopuschinensis(Bunge)Pojark
系大戟科黑钩叶属植物，别名黑钩叶、草桂花、黄杨
皮(湖北)、一叶秋(神农架)，为一年生草本植物，广
泛分布于吉林、湖北、河南、陕西、山西、甘肃、山东、
湖北、四川、云南、西藏等地。其根性温，具有理气止
痛，治疗胃病，腹泻下痢等作用。民间还用来治疗黄
疸、胃炎、水肿等多种疾病“’2]，在河南汝州甚至用它
来治疗癌症。雀儿舌头的乙醇提取物和水提取物对
食管癌Eca一109细胞株进行体外实验，观察到雀儿
舌头提取物均有较强的肿瘤抑制作用[3“]。为深入
研究其药用价值，提高其提取工艺的科学性和合理
性，本实验以雀儿舌头的乙醇提取物对肿瘤细胞的
杀伤效能为指标，采用正交试验优选其最佳提取工
艺，为生产提供科学依据。
1试剂与仪器
雀儿舌头药材由河南省禹州市外贸局提供，郑
州大学药学院潘成学鉴定。试剂均为分析纯。实验
所用食管癌Eca—109细胞株来自郑州大学医学院重
点实验室。
电热恒温水浴锅(北京市西城区医疗器械厂)，
Rc52—99旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)，
zK一82A型真空干燥箱(上海市实验仪器总厂)，超
净工作台(苏州净化设备工业公司)，BH2一RFC一5
荧光显微镜(湖北众友科技实业有限公司)，CO：培
养箱(日本三洋)。
2方法与结果
2．1提取方法的选择
2．1．1水提取法：将药材粉碎，过10目筛，称取粗
收稿日期：2005—02一D4
荛妻磊异：要南袭书毳鏊考焉乒端誓篙翟冕k授，硕士，1982年毕业于湖南师范大学化学系，研究方向为有机合成和天然产物化学研
究。Email：[ongyue@zzu．edu．cn
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第11期2005年11月·1643-
粉15g。加水150mL，常温浸泡提取5d，滤过。低温
浓缩至50mL，吸取适量的浓缩液，加到100mL量
瓶中备用。
2．1．2乙醇提取法：将药材粉碎，过10目筛，称取
粗粉15g，加75％乙醇150mL常温浸泡提取5d，
滤过。低温浓缩至50mL，吸取适量的浓缩液，加到
100mL量瓶中备用。
2．1．3 抗癌活性的测定：取对数生长的食管癌
Eca一109细胞株，配成浓的细胞混悬液，检查存活率
(TrypanBlueExclusionStain法)，存活率>95％
的用于实验。稀释成(3～5)×104mL的细胞混悬
液，在24孔的细胞培养板中，每孔加入混悬液1．0
mL，然后分别加入上述药物溶液0．1mL，空白对照
组加入0．1mL的培养液，在含有50％CO。+95％
空气，37℃的培养箱内培养。培养72h后，将细胞
制成细胞混悬液，利用细胞计数板，显微镜下计数，
按下式计算抗癌活性。见表1。
抗癌活性一(空白细胞数一实验组细胞数)／空白细胞
数X100％
囊1雀儿舌头提取条件与抗癌活性的关系抽一6)
Table1 Relatianshipbetweenxtractingea dttian
andanticanceractivitym一6)
2．2最佳醇提参数的考察：乙醇提取法优于水提取
法，根据预试验，选乙醇体积分数、乙醇用量、加热温
度，作为观察的3个因素，每个因素选择3个水平，采
用L。(34)正交表进行实验设计优化。结果见表2～4。
裹2因素水平
Table2 FactorsandIevels
由R值可以看出，各因素指标对实验结果的重
要性次序为B>c>A，方差分析表明，乙醇体积分
数对实验结果有显著性的影响，乙醇的用量对抗癌
活性无显著性的影响。因此，权衡利弊，雀儿舌头中
抗癌活性成分的最佳提取工艺为A，B。c。，即乙醇体
积分数为75％，稀释倍数为8，温度为25℃。
2．3验证试验：采用优化筛选后的工艺路线技术重
复试验3次，测定抗癌活性以考查工艺技术路线的
稳定性。结果平均抗癌活性为52．39％，表明3次试
验的抗癌活性无显著性的差异，本研究制定的工艺
衰3 L(3‘)正交试验结果
Table3 ResultsofL，(3‘)arthaganaltest
裹4方差分析
Table4 Variancea alysis
Fo*(2，2)一19，00n．Di(2，2)=99．00
路线具有较好的稳定性。
3讨论
卒实验选择与雀儿舌头功效相对应的抗癌活性
为指标，以对抗癌活性有较大影响的乙醇体积分数、
乙醇用量、加热温度为3个主要因素，采用正交法优
化了雀儿舌头的提取工艺。该提取工艺具有稳定性
好，抗癌活性高，操作简单，生产成本较低的优点，适
用于产业化，为进一步开发打下了良好基础。
本品提取工艺中温度升高，抗癌活性降低，可能
是由于温度升高使抗癌活性成分分解加速所致，具
体原因还有待进～步探讨和研究。
致谢：药理活性实验由郑州大学基础医学院曲
全智教授及硕士研究生文彩虹帮助测定。
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万方数据
正交试验法优选雀儿舌头提取工艺的研究
作者： 龙跃， 陈彦君， 杜坡， 赵清治， 潘彦， 张旭， 孙希孟， 张宇虹， LONG Yue， CHEN
Yan-jun， DU Po， ZHAO Qin-zhi， PAN Yan， ZHANG Xu， SUN Xi-meng， ZHANG Yu-
hong
作者单位： 龙跃,陈彦君,杜坡,赵清治,潘彦,孙希孟,张宇虹,LONG Yue,CHEN Yan-jun,DU Po,ZHAO Qin-
zhi,PAN Yan,SUN Xi-meng,ZHANG Yu-hong(郑州大学,化学系,河南,郑州,450052)， 张旭
,ZHANG Xu(郑州大学医学院,生物教研室,河南,郑州,450052)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(11)
被引用次数： 1次

参考文献(5条)
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引证文献(1条)
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