全 文 ：12槲皮素　22杜鹃素
12quercetin　22farrero l
图 1　混合对照品溶液 (A)和消咳
喘糖浆 (B)的 HPLC 图
F ig1 1　HPLC chromatogram s of m ixed reference
substance (A) and X iaokechuan Syrup (B)
他成分很好的分离。在等度洗脱条件下, 使用反相色
谱柱时, 槲皮素极性比杜鹃素大, 因此保留相差很
多, 分析时间过长, 不宜共同测定。采用梯度洗脱法,
能缩短杜鹃素的保留时间, 且流动相比例不变, 基线
平稳, 不影响含量测定。
　　用二极管阵列检测器对槲皮素和杜鹃素进行
200～ 400 nm 波长扫描, 槲皮素在 202～ 395 nm 有
吸收, 最大吸收波长为 370 nm ; 杜鹃素在 202～ 390
nm 有吸收, 最大吸收波长为 297 nm。槲皮素含量比
杜鹃素高, 槲皮素在 297 nm 吸收值较低, 所以选择
297 nm 检测波长, 两种成分都有吸收, 且能缩小峰
高差异。
　　本实验方法简便、易行, 定量结果准确, 使在通
常条件下采用不同流动相、不同检测波长、分别测定
含量的两种成分能在同一台仪器上共同检测, 缩短
分析时间, 节约试剂, 提高工作效率, 为消咳喘糖浆
的质量控制提供了一种新的快速检测方法。
References:
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(药物分析杂志) , 2003, 23 (4) : 34023411
HPLC 法测定羚羊感冒胶囊中牛蒡苷的含量
朱山寅1, 睢凤英2Ξ
(11 嘉兴市药品检验所, 浙江 嘉兴　314001; 21 嘉兴学院医学院, 浙江 嘉兴　314001)
　　羚羊感冒胶囊由羚羊角、牛蒡子、淡豆豉、金银
花等 10 味中药组成, 收载于《中华人民共和国卫生
部药品标准》中药成方制剂第 6 册。具有清热解表之
功效, 用于流行性感冒、伤风咳嗽、头晕发热、咽喉肿
痛。现标准中尚无含量测定项目。牛蒡苷是牛蒡子
的活性成分, 是本方有效成分之一。为了有效地控制
羚羊感冒胶囊的质量, 本实验采用H PL C 法测定制
剂中牛蒡苷的含量, 方法操作简便、重复性好、结果
准确。
1　仪器与试药
高效液相色谱仪: W aters 510ö484ö745B 色谱 系统。牛蒡苷对照品 (中国药品生物制品检定所, 供含量测定用, 批号 81929801) ; 羚羊感冒胶囊由宁波立华制药有限公司生产, 批号: 000509、030103、030204) , 制备阴性样品所用药材由浙江嘉信医药股份有限公司中药材分公司提供, 自制缺牛蒡子的阴性样品; 乙腈为色谱纯, 其余试剂均为分析纯, 水为重蒸馏水。2　方法与结果211　色谱条件: K rom asil C 18分析柱 (150 mm ×416mm , 5 Λm ) ; 流动相: 乙腈2水 (30∶70) ; 体积流量:110 mL öm in; 测定波长: 280 nm ; 柱温: 室温。
·5421·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 11 期 2004 年 11 月
Ξ 收稿日期: 2004201208
作者简介: 朱山寅 (1958—) , 男, 浙江嘉兴市人, 副主任中药师, 主要从事中药的分析检验及药品质量控制的研究工作, 在专业杂志上发
表科研论文 43 篇。其中多篇论文获奖。T el: (0573) 2073235
212　对照品溶液的制备: 精密称取经五氧化二磷干
燥器中减压干燥至恒重的牛蒡苷对照品适量, 加甲
醇制成 01251 2 m gömL 的溶液, 即得。
213　供试品溶液的制备: 取装量项下的样品内容物
1 g, 精密称定, 置 25 mL 量瓶中, 加甲醇约 22 mL ,
超声处理 30 m in, 放至室温, 加甲醇至刻度, 摇匀,
滤过。取续滤液用 0145 Λm 微孔滤膜滤过, 即得。
214　阴性对照溶液的制备: 取缺牛蒡子阴性样品,
按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。
215　干扰试验: 照上述色谱条件, 取对照品溶液、供
试品溶液、阴性对照溶液各 20 ΛL , 分别注入色谱
仪。供试品色谱图中, 在与对照品色谱图相应的位置
上, 有一相同的色谱峰, 而阴性对照溶液在此保留时
间无干扰。见图 1。 3 2牛蒡苷3 2arctiin
图 1　牛蒡苷 (A)、羚羊感冒胶囊 (B)和缺牛蒡子
阴性对照 (C)的 HPLC 图谱
F ig1 1　HPLC chromatogram s of arctiin (A) , L ingyang
Ganmao Capsule ( B ) , and negative sample
without F ructus A retii (C)
216　线性关系考察: 分别精密吸取牛蒡苷对照品溶
液 (01251 2 m gömL ) 110、210、410、610、810、1010
mL , 分别置 20 mL 量瓶中, 加甲醇稀释至刻度, 分
别进样 20 ΛL。以峰面积积分值为纵坐标 (Y ) , 牛蒡
苷进样量为横坐标 (X ) , 绘制标准曲线, 得回归方
程: Y = 345 604 X - 4 157, r= 01999 4。表明牛蒡苷
在01251 2～ 21512 Λg 与峰面积呈良好的线性关系。
217　精密度试验: 准确吸取牛蒡苷对照品溶液 20ΛL , 重复进样 5 次, 测定, 计算得牛蒡苷峰面积的
R SD 为 0197%。
218　稳定性试验: 精密吸取新配制的同一供试品溶
液, 分别在 0、4、8、16、24 h 进样, 测定峰面积, 结果
牛蒡苷峰面积R SD = 1114% , 表明供试品溶液在 24
h 内稳定。
219　重现性试验: 取同一批号样品 6 份, 制备供试
品溶液, 进样, 测定, 计算牛蒡苷的含量, 结果牛蒡苷
质量分数的R SD = 1134% (n= 6)。
2110　加样回收率试验: 精密称取含牛蒡苷 91383
m gög 的羚羊感冒胶囊内容物约 015 g, 精密加入牛
蒡苷对照品适量, 照 213 项下方法操作并按上述色
谱条件进行测定, 计算, 结果牛蒡苷的平均回收率为
99167% , R SD = 1153% (n= 6)。
2111　样品测定: 分别取不同批号的羚羊感冒胶囊
约 1 g, 制备供试品溶液。分别精密吸取供试品溶液
和牛蒡苷对照品溶液各 20 ΛL , 按上述色谱条件测
定, 3 批样品中牛蒡苷的含量测定结果见表 1。
表 1　羚羊感冒胶囊中牛蒡苷的含量 (n= 5)
Table 1　Arctiin in L ingyang Ganmao Capsule (n= 5)
批　次 牛蒡苷ö(m g·g- 1) RSD ö%
1 91838 1135
2 91536 1144
3 101367 1112
3　讨论
311　提取条件的选择: 根据牛蒡苷的性质, 考察了
加热回流、超声提取等方法, 并对不同溶剂和提取时
间进行了综合考察, 结果表明, 以甲醇超声处理 30
m in 的提取方法为最佳。
312　测定波长的选择: 牛蒡苷对照品溶液与羚羊感
冒胶囊的醇提液在 280 nm 波长处均有最大吸收,
故选择 280 nm 作为检测波长。
313　流动相的选择:《中华人民共和国药典》2000
年版一部“牛蒡子”项下测定牛蒡子药材中牛蒡苷采
用甲醇2水 (1∶111) 为流动相, 但在本样品中的牛蒡
苷的色谱峰与其他干扰组份色谱峰的分离效果不
好。经摸索, 结果以乙腈2水 (30∶70)作为流动相, 牛
蒡苷色谱峰能与其他组份的色谱峰很好地分离, 且
峰形对称而尖锐。
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