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牛蒡子不同炮制品中牛蒡苷含量的HPLC测定



全 文 :  药典规定制何首乌饮片为厚 1 cm 的块片, 为何
首乌饮片经浸润后再切制, 干燥, 采用辅料炮制而
成。在浸润加工中, 稍不注意就会引起水溶性成分的
流失。另外, 从新鲜药材到炮制饮片的形状, 需要经
过两次干燥过程。试验结果显示, 间接切制片比直接
切制片中二苯乙烯苷含量有所降低, 蒽醌类含量无
明显差异。设想如果采用在产地将新鲜药材直接切
制成何首乌饮片的形状, 既可以简化操作程序, 降低
成本, 又可以避免水溶性成分的流失。
  药典中何首乌饮片的加工采用“干燥”的方法,
是指在干燥的过程中不需控制温度, 采用烘干、晒干
与阴干均可以。何首乌中的二苯乙烯苷成分对湿、热
不稳定。本试验结果也显示, 新鲜何首乌药材即使经
低温 (低于 50 ℃) 烘干 38 h 后, 比阴干法的二苯乙
烯苷含量也稍有降低。因此, 应注意何首乌饮片的干
燥方法。
References:
[ 1 ] Ch P (中国药典) [S ]1 2000 ed. V o l I1
[ 2 ] Guo Q , L u J. D eterm ination of con ten t of an th raqu inones in
R ad ix P oly g on i M u ltif lori and pocessed R ad ix P oly g on iM u l2
tif lori by H PL C [J ]1 Ch in J P harm A na l (药物分析杂志) ,
2000, 20 (5) : 32623281
[ 3 ] L iu Z L , Song Z Q. D eterm ination of con ten t and stab ility of
2, 3, 5, 4′2stilbene gluco side in p rocessed R ad ix P oly g on iM u l2
tif lori from differen t areas [J ]1 Ch in T rad it P a t M ed (中成
药) , 2002, 24 (9) : 68426851
[ 4 ] Xu K J , Xu Y G, H u G J, et a l. T he so lid stab ility of Fufang
Kang Shuai L ing [J ]1 Ch in T rad it H erb D rug s (中草药) ,
1989, 20 (5) : 92131
牛蒡子不同炮制品中牛蒡苷含量的 HPLC 测定
张 涛Ξ
(梧州市药品检验所, 广西 梧州 543002)
  牛蒡子为菊科植物牛蒡A rctium lapp a L. 的干
燥成熟果实。其性辛、苦、寒, 归肺、胃经。具有疏散
风热, 宣肺透疹, 解毒利咽等功效。中医临床应用有
生品与炮制品之分。牛蒡子传统炮制方法有单炒、酒
炒、酒蒸法等, 现代以清炒为主。牛蒡苷是牛蒡子的
主要有效成分, 具有抗肿瘤、抗菌、抗病毒作用及扩
张血管、子宫和肠管的作用[1 ]。本实验采用 H PL C
法测定牛蒡子生品及不同炮制品中牛蒡苷的含量变
化, 以探讨其炮制机制, 为完善牛蒡子的炮制工艺提
供了参考依据。
1 材料及仪器
牛蒡子购于梧州市医药有限责任公司, 经本所
饶伟文主任中药师鉴定为菊科植物牛蒡A rctium
lapp a L. 的干燥成熟果实。牛蒡苷对照品 (8192
9401)由中国药品生物制品检定所提供。其余所用试
剂均为分析纯。岛津L C—10A T vp 高效液相色谱
仪, Sarto riu s Sp 211D 电子天平, CQ X25—06 超声
波清洗器。
2 牛蒡子生品及各炮制品的制备
211 生品: 取牛蒡子洗净, 50 ℃干燥 1 h, 取出。
212 微炒品: 取生品 150 g, 用文火微炒至微鼓起, 有少量爆裂声, 略有香气, 取出放凉。213 炒黄品: 取生品 150 g, 用文火炒至鼓起, 有爆裂声, 微黄至黄色, 有香气, 取出放凉。214 炒焦品: 取生品 150 g, 在 120 ℃热锅内炒或用文火炒至微焦, 取出放凉。215 酒炒品: 取生品 150 g, 加酒 15 mL 拌匀闷透,置于锅中, 用文火炒至药材表面干, 50 ℃干燥 1 h,取出凉干。216 酒蒸品: 取生品 150 g, 加酒 15 mL 拌匀闷透,置锅中隔水蒸约 15 m in, 50 ℃干燥 1 h, 取出凉干。3 牛蒡苷的含量测定[2 ]311 色谱条件: 色谱柱: Bondapak C 18 (250 mm ×416 mm , 5 Λm ) ; 流动相: 甲醇2水 (1∶111) ; 流速:113 mL öm in; 检测波长: 280 nm。牛蒡苷色谱峰保留时间约为 6198 m in, 理论板数应大于 2 500。312 对照品溶液的制备: 精密称取牛蒡苷对照品5115 m g, 置 10 mL 量瓶中, 加甲醇溶解并稀释至刻度, 备用。313 供试品溶液的制备: 精密称取生品及炮制品粉末(过三号筛) 约 015 g, 置 50 mL 量瓶中, 加甲醇约45 mL , 超声处理 20 m in, 加甲醇至刻度, 滤过, 备用。
·604· 中草药 Ch inese T radit ional and H erbal D rugs 第 35 卷第 4 期 2004 年 4 月
Ξ 收稿日期: 2003206224
作者简介: 张 涛 (1962—) , 女, 广西玉林人, 副主任药师, 1983 年广西中医学院中药专业毕业, 主要从事药品监督、中药检验工作, 已发
表论文 10 余篇。T el: (0774) 3839787
314 线性关系考察: 精密量取牛蒡苷对照品溶液 5
mL 于 25 mL 量瓶中, 加甲醇至刻度, 摇匀。分别精
密吸取 3, 5, 10, 15, 20 ΛL , 测定峰面积。将峰面积对
应牛蒡苷含量进行回归, 得方程: Y = 71898 X -
51463, r= 01999 7, 牛蒡苷在 20~ 150 ΛgömL 与峰
面积线性关系良好。
315 精密度试验: 精密吸取牛蒡苷对照品溶液 10ΛL , 重复进样 5 次, 测定峰面积, 计算其 R SD =
0128%。
316 重现性试验: 取酒蒸品的样品 5 份, 制成供试
品溶液, 依法平行进样测定 5 次, 结果牛蒡苷含量
R SD = 0186% (n= 5)。
317 稳定性试验: 取微炒品的供试品溶液, 在 0, 1,
2, 4, 6, 8 h 分别进样 10 ΛL , 记录牛蒡苷峰面积, 结果
其R SD 为 1103%。可见供试品溶液在 8 h 内稳定。 318 加样回收率试验: 精密吸取已知含量的供试品溶液 10 mL , 加入牛蒡苷对照品 4 m g, 按样品测定的方法进行分析, 结果平均回收率为 99142% , R SD为 0182%。319 样品测定: 分别取对照品溶液与供试品溶液进样, 按外标法进行测定, 结果见表 1, 色谱图见图 1。表 1 牛蒡子不同炮制品中牛蒡苷的含量测定结果 (n= 5)Table 1 D eterm ination of arctiin in d ifferen t processedproducts of F ructus A rctii (n= 5)样品 牛蒡苷含量ö% RSD ö%生 品 9. 96 1. 42微炒品 8. 53 1. 33炒黄品 5. 40 0. 92炒焦品 0. 51 1. 26酒炒品 8. 78 0. 24酒蒸品 8. 29 0. 863 2牛蒡苷 A 2牛蒡苷对照品 B2生品 C2微炒品 D 2炒黄品 E2炒焦品 F2酒炒品 G2酒蒸品 3 2arctiin A 2arctiin reference substance B2crude drug C2lit t le fried drug D 2bo iled drug
E2burn t drug F2fried drug w ith alcoho l G2drug w ith evapo rated alcoho l
图 1 牛蒡苷对照品和牛蒡子不同炮制品 HPLC 图谱
F ig. 1 HPLC chromatogram s of arctiin reference substance and differen t processed products in F ructus A rctii
4 讨论
411 提取时间的选择: 取微炒品按供试品溶液制备
方法处理, 提取时间分别从 10~ 30 m in 超声处理,
结果超声处理 20 m in 后, 即可将样品中的牛蒡苷提
取完全。
412 牛蒡子辛苦而寒, 主要有透发与清泄两种功
效, 清泄的作用较显著。而透发的力量较弱[3 ]。牛蒡
子的炮制目的, 主要是通过加热与辅料的作用而缓
和寒滑之性, 并利于成分煎出。实验结果表明, 不同
炮制品中牛蒡苷的含量变化依次为生品> 酒炒品>
微炒品> 酒蒸品> 炒黄品> 炒焦品, 说明在炮制过
程中的受热影响, 尤其是清炒中的直接加热使牛蒡
苷受到不同程度的破坏。从目前的研究情况看, 牛蒡
苷可能是牛蒡子起寒凉作用的主要有效成分, 通过炮
制, 降低其含量, 缓和药性, 从而突出其他方面的作
用, 应具一定的科学道理。但由于炮制温度与时间对
牛蒡苷含量影响很大, 如何掌握炮制的程度很重要。
413 中医理论认为酒制能升提, 通经活络, 加强药 效。而牛蒡苷可溶于乙醇, 古代文献的酒炒、酒蒸品符合中医原理, 既可增强牛蒡子的透发升提功能, 又可缓和药性。从本实验结果看, 酒炒、酒蒸品更容易把握炮制的程度, 有效成分的破坏也不是很严重, 我们认为是更合理的方法。414 上述分析结果表明, 中医临床要求把不同的牛蒡子炮制品应用于不同疾病及治疗对象有一定的科学道理。《中华人民共和国药典》2000 年版目前仅收载生品及清炒品两种, 建议进一步对其进行化学、药理研究, 深入阐明炮制原理, 制定合理的炮制工艺,增收炮制规格, 以更好地发挥中医药特色。References:[ 1 ] Zheng H Z, Dong Z H , She J , et a l. M od ern S tudy of T rad i2tiona l Ch inese M ed icine (中药现代研究与应用) [M ]1 Beijing:Xueyuan P ress, 19971[ 2 ] Ch P (中国药典) [S ]1 2000 ed. V o l I1[ 3 ] T he T each ing and Research Group of TCM Fo rm ula, Shang2hai Co llege of T raditional Ch inese M edicine. T he C lin ica lH and book of T rad itiona l Ch inese M ed icine (中药临床手册)[M ]1 Shanghai: Shanghai Peop le’s Pub lish ing House, 19981
·704·中草药 Ch inese T radit ional and H erbal D rugs 第 35 卷第 4 期 2004 年 4 月