全 文 :Ca 含量偏低, 样地Ê 和样地Ë 土壤 Zn 较缺, 样地É
土壤B、Cu 较缺。说明本芦荟基地土壤养分尚不平
衡, 样地Ë (原甘蔗地)肥力高于样地É 和样地Ê。由
于存在氮、磷、钾和中、微量元素养分障碍, 这样就影
响土壤养分平衡效应, 降低氮、磷、钾施肥对农作物增
产效果, 甚至会导致农作物品质的下降[6 ]。
314 在实施芦荟规范化种植过程中, 应根据土壤肥
力的实际情况, 以生态平衡施肥为原则[7 ] , 满足高
产、低投、无污染等多目标的要求。在肥料改性、根域
或者肥域土壤条件的改善, 减少养分投入、养分再利
用和循环技术等方面采取相对应的施肥方案。一是
增加有机肥料。有机肥料能同时补充有机质、N、P、
K 等营养成分, 维持土壤养分的平衡。注重有机肥
和无机肥结合使用, 即可丰富有机质、各种营养元素
的含量, 又可使养分不易流失和改土培肥; 二是增加
氮肥的施放量。因为作为药用部位的芦荟叶, 在生长
过程中需要大量的氮素, 氮是制约芦荟产量的首要
因素。同时合理施放镁、硼、钼、锌等微肥, 以提高芦
荟的品质; 三是保护好基地周边环境。禁止乱砍乱伐
山林, 防止造成水土流失、土壤酸化加剧、生态环境
受到破坏; 四是对山坡地和山脚地进行土壤改良。加
强水土保持, 多种绿肥, 在施用氮肥和微量元素肥料
的同时, 施好磷肥, 施用石灰改良其酸性。在栽培管
理上, 只有根据基地土壤供肥特征, 结合栽培品种的
生长特点和营养需求规律进行平衡施肥, 才能达到
高质、高产的目的。
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HPLC 法测定灯盏细辛中灯盏花乙素的含量
李廷钊1, 周 萍2, 刘文庸1, 张 川1, 苏 娟1, 张卫东1Ξ
(11 第二军医大学药学院, 上海 200433; 21 上海武警总队医院药局, 上海 201103)
灯盏细辛, 异名灯盏花, 为菊科植物短葶飞蓬
E rig eron brev iscap us (V an t. ) H and. 2M azz. 的全
草, 是一种常用中药。具散寒解表、祛风除湿、活络止
痛等功效。灯盏花乙素为灯盏细辛活性成分之一, 目
前在临床上用于治疗中风后瘫痪、复发性口疮及冠
心病等[1 ]。其含量测定多用紫外分光光度法测定[2 ] ,
但因灯盏细辛中含多种黄酮[3, 4 ] , 故干扰较大。本实
验考察了多种测定条件和样品处理方法, 建立了测
定灯盏花乙素的H PL C 法。
1 仪器与试剂
W aters 高效液相色谱仪, 510 型泵, 996 型紫外
检测器,W aters 工作站数据处理。
灯盏花乙素 (scu tellarin) 对照品购自中国药品
生物制品检定所 (编号: 8422200102)。灯盏细辛干燥 生药, 购于云南昆明, 经本院秦路平副教授鉴定为短葶飞蓬 E 1 brev isap us (V an t1) H and12M azz1 的干燥全草。甲醇为色谱纯, 水为重蒸水, 其余试剂为分析纯。2 方法与结果211 色谱条件: D iamon sil C 18 柱 ( 250 mm × 416mm , 5 Λm ) , 柱温为室温, 流动相: 甲醇2水2磷酸(45∶55∶0. 0125) [5 ] , 体积流量 1 mL öm in, 检测波长 280 nm。对照品及样品色谱图见图 1。212 标准曲线的绘制: 精密称取灯盏花乙素对照品约 25 m g 置 25 mL 量瓶中, 以甲醇定容, 精密吸取0. 5、1. 0、1. 5、2. 0、3. 0、5. 0 mL 分别置于 10 mL 量瓶中, 用甲醇定容。将配制的不同浓度的对照品溶液进样 20 ΛL , 以峰面积为纵坐标, 进样量为横坐标, 绘
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Ξ 收稿日期: 20032122133 通讯作者 T el: (021) 20570387
图 1 对照品 (A)及灯盏细辛样品 (B) HPLC 图谱
F ig. 1 HPLC chromatogram of reference
substance (A) and sample (B)
制工作曲线, 回归方程为 Y = 166 133. 1 X -
357 435. 9, r= 0. 999 3; 线性范围为 1. 04~ 10. 4 Λg。
213 精密度试验: 2. 2 项所配浓度为 208 ΛgömL 对
照品溶液, 吸取 20 ΛL 进样, 重复 5 次, 测定峰面积,
其R SD 为 0. 81%。
214 稳定性试验: 取该对照品溶液在0、4、8、20、24、48
h, 分别进样 20 ΛL , 记录峰面积, 计算R SD 为1. 28%
(n= 6) , 表明灯盏乙素甲醇溶液在 48 h 内稳定。
215 重复性试验: 取同一供试样品 5 份, 精密称定,
按样品测定项下方法进行含量测定, 结果平均质量
分数为 0. 62% , R SD 为 2. 56% (n= 5)。
216 回收率试验: 精密称取已测含量的灯盏细辛细
粉约 1 g, 5 份。分别准确加入灯盏花乙素对照品 2
m g, 按样品测定项下方法处理并测定, 计算平均回
收率为 96. 2% , R SD 为 1. 85%。
217 样品测定: 不同批次药材干燥粉碎, 精密称取
1 g, 60% 乙醇 20 mL 超声提取 2 次, 每次 1 h, 合并
提取液, 减压浓缩至近干, 加水 50 mL 溶解, 转入分
液漏斗, 用 20 mL 醋酸乙酯萃取 4 次, 弃去醋酸乙
酯部分。将水部分减压蒸干, 残渣用甲醇溶解并定容
于 25 mL 量瓶, 以微孔滤膜滤过, 取续滤液作供试
液, 进样 20 ΛL 测定, 结果见表 1。
表 1 灯盏细辛中灯盏花乙素含量 (n= 3)
Table 1 Scutellar in in E 1 brevisap us (n= 3)
样品号 灯盏乙素ö% RSD ö%
1 0. 61 2. 14
2 0. 55 2. 52
3 0. 63 2. 35
3 讨论
311 灯盏细辛中含有多种黄酮类化合物, 采用紫外
分光光度法测定灯盏花乙素的含量, 干扰较大, 测得
结果通常是总黄酮的含量, 而不能准确反映灯盏花
乙素的含量, 给灯盏细辛药材的质量控制带来困难。
灯盏花乙素在 280 nm 处吸光度大, 且在上述色谱
条件下分离度好, 干扰少, 本实验据此建立了灯盏花
乙素含量测定的 H PL C 法, 提高了准确度, 稳定可
靠。
312 醋酸乙酯萃取可以有效去除脂溶性成分, 使灯
盏花乙素色谱峰分离无干扰。H PL C 检查醋酸乙酯
部分未发现灯盏花乙素色谱峰, 纯化过程简单有效。
实验中比较了 50%、60%、70%、90% 乙醇液的提取
效果, 发现 60% 乙醇液提取转移率最高, 因此采用
60% 乙醇液提取。
313 实验结果表明, 本方法操作简便、快速、准确,
可作为灯盏细辛中灯盏花乙素的定量分析方法。
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保 护 植 被 造 福 人 类
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