全 文 ：表 1　 3种香茶菜叶表面细微结构比较
Table 1　 Comparison of f ine structure of leaf epidermis among three species in Rabdosia (Bl. ) Hassk.
名称 　　　　　　　　　上表面　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　下表面　　　　　　　　　　　　表皮细胞 非腺毛 腺鳞 气孔 表皮细胞 非腺毛 腺鳞 气孔
香茶菜 龙 骨 状 突
起 ,形状
极 不 规
则 ,纹饰
不明显
长短不一 ,一般
由 4～ 7个细
胞组成 ,单列 ;
毛底部的表皮
细胞成辐射状
排列
较少 无 稍膨胀 , 垂
周壁波浪
形 ,纹饰
不明显
较少 ,有些顶端弯曲成
90度角;较细长 ,单
列 ,由多细胞组成;
毛着生处的表皮细
胞层叠并辐射状排
列
多 椭圆形 ,副卫细胞
无或不明显 ;气
孔四周常有辐
射状角质纹饰 ;
气孔器无规则
型或横列型
大萼香茶菜 膨胀 ,细胞
较规则 ,
近等径 ,
条 形 纹
饰 隐 约
可见
极多 ,极短小 ,由
1～ 2个细胞
组成 ,多为单
细胞毛。 底部
只有一个表皮
细胞
较少 无 膨胀 ,垂周
壁波形 ,
条 形 纹
饰
较多 ,短小直立 ,多为
单细胞毛 ,径高比
1左右 ,底部一个
表皮细胞
很多 椭圆形 ,气孔器与
气孔均明显上
凸 ;保卫细胞环
形加 厚 , 稍膨
胀 ,副卫细胞明
显 ;气孔器多为
横列型
显脉香茶菜 扁平 ,稍膨
胀 ,角质
化明显 ;
形状多边
形 ,相对
不规则 ,
条形纹饰
清晰
短小 ,由 1～ 3个
细胞组成 ,多
为 2个。 底部
表皮细胞 1～ 3
个 ,不呈辐射
状排列
较少 有 ,且
下陷
强烈膨胀 ,
垂 周 壁
深波状 ,
角 质 化
明显 ,条
形纹饰
未见 较少 长椭圆形 ,气孔器
不上凸也不下
凹 ,气孔陷于副
卫细胞中 ;保卫
细胞稍膨胀 ,副
卫细胞多为 3
个 ,狭长 ; 气孔
器不等型
鉴别香茶菜属不同的种提供了依据。
　　另外 ,作者观察到的大萼香茶菜的叶面细微结
构与冯毓秀等 [5 ]报道的有一定的出入。 冯毓秀等指
出 ,大萼香茶菜非腺毛少 ,多呈直立状态 ,基部细胞
稍大 ,向上逐渐变细 ,由 2～ 7细胞组成。脉上非腺毛
细长 ,略呈弧状弯曲 ,多由 5～ 10细胞组成。据观察 ,
大萼香茶菜叶表面非腺毛多 ,由 1～ 2个细胞组成 ,
脉上非腺毛稍长 ,多由 1～ 3个细胞组成 ,这可能是
不同地理环境引起的大萼香茶菜的一种内变异。
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HPLC法测定红花五味子木脂素的含量
王彦涵 ,高建平 ,郁韵秋 ,陈道峰
(复旦大学药学院 ,上海　 200032)
摘　要:目的　测定不同产地、不同部位红花五味子的五味子酯甲 ( schisantherin A)、去氧五味子素 (五味子甲素 ,
deo xyschizandrin)、五味子乙素 ( schisandrin B)和五味子丙素 ( schisandrin C)含量。 方法　 HPLC法 ,使用 Spher e-
clone ODS柱 ;流动相: 水 ( A) ,甲醇 ( B) ,梯度洗脱: 0～ 4 min, 70% B; 4～ 54 min, 70% ～ 100% B;流速为 0. 4 mL /
min;柱温: 25℃ ;检测波长: 254 nm。 结果　五味子酯甲、甲素、乙素、丙素在红花五味子中含量分别为 0. 026% ～
·950· 中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 10期 2003年 10月
收稿日期: 2003-01-17基金项目:高校博士点基金项目 ( 200026519) ;国家自然科学基金项目 ( 30271586) ;高校优秀青年教师教学和科研奖励基金项目
( 1999- 71)作者简介:王彦涵 ( 1965- ) ,女 ,四川邻水人 ,博士生 ,生药学专业。
0. 083% , 0. 007% ～ 0. 945% , 0. 002% ～ 0. 121% , 0. 010% ～ 0. 038% ,其中五味子甲素普遍存在 ,且果实中含量高于
茎藤。 结论　去氧五味子素是红花五味子果实的主要活性成分。
关键词: 红花五味子 ;木脂素 ;高效液相色谱
中图分类号: R286. 02　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 10 0950 03
Determination of lignans of Schisandra rubriflora by HPLC
WANG Yan-han, GAO Jian-ping , YU Yun-qiu, CHEN Dao-feng
( Schoo l o f Pha rmacy , Fudan Univ er sity , Shanghai 200032, China )
Abstract: Object　 To determine the contents of schisantherin A, deoxyschizandrin, schisandrin B and
schisandrin C in the stems and fruits o f Schisandra rudri f lora ( Franch. ) Rehd. et Wils. , w hich w ere co l-
lected f rom di fferent areas. Methods　 An HPLC method w as set up: Co lumn, Sphereclone, ODS ( 250
mm× 4. 6 mm , 5μm); mobil phase, A: H2O, B: MeOH; g radient elution was wi th 70% B from 0- 4
min, 70% - 100% B from 4- 54 min; the f low ra te was 0. 4 mL /min; the column tempera ture w as 25℃
and the DAD detector was used at 254 nm. Results　 The contents of schisantherin A, deoxyschizandrin,
schisandrin B and schisandrin C in S. rubrif lora were 0. 026% - 0. 083% , 0. 007% - 0. 945% , 0. 002% -
0. 121% , 0. 010% - 0. 038% , respectively. Deoxyschizandrin exists w idely in S. rubrif lora and its content
is higher in f ruit s than tha t in stems. Conclusion　 Deoxy schizandrin is the main activ e lignan in the f rui ts
o f S. rubrif lora.
Key words: Schisandra rubri f lora ( Franch. ) Rehd. et Wils. ; lignans; HPLC
　　红花五味子 Schisandra rubrif lora ( Franch. )
Rehd. et Wils. 为五味子科五味子属植物 ,其果实
和藤茎在云南、四川等地区一直入药 ,果实效用同五
味子 ,具有收敛、滋补、强壮、安神功能 ,藤茎具活血、
祛风、除湿之功效 [1 ]。红花五味子主要含有五味子甲
素、五味子丙素、五味子酚、五味子酚乙、五味子酚
酯、 gomisin O、红花五味子酯和红花五味子素等联
苯环辛烯类木脂素成分 [2 ]。药理研究表明 ,此类木脂
素具有降血清谷丙转氨酶作用、对活性氧自由基损
伤的拮抗作用、中枢神经的抑制作用 ,抗炎、抗胃溃
疡、抗癌及抗 HIV等活性 [ 3]。本实验采用 HPLC法
对不同产地、不同药用部位红花五味子的 4种主要
活性木脂素:五味子酯甲 ( schisantherin A)、去氧五
味子素 (五味子甲素 , deo xy schisandrin)、五味子乙
素 ( schisandrin B)和五味子丙素 ( schisandrin C)进
行含量测定 ,以期寻找五味子新的资源植物。
1　仪器、药材与试剂
Agi lent 1100 series高效液相色谱仪 ,包括四元
梯度泵 ,二极管阵列检测器 ,化学工作站。 红花五味
子果实和藤茎采自不同地区 (其中 1个样品为市
售 ) ,植物学名由作者鉴定 ,凭证标本存复旦大学药
学院生药学教研室。对照品:五味子酯甲、五味子甲
素系作者从华中五味子 S. sphenanthera Rehd. et
Wils. 果实中分得 ,五味子乙素和五味子丙素从五
味子 S. chinensis ( Turcz. ) Baill. 果实中分得 , 4种
成分的核磁共振氢谱、碳谱和质谱与文献 [4, 5 ]一致 ,
经 HPLC检测均为单峰。甲醇为色谱纯 ,水为重蒸
水 ,其他试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件: 色谱柱: Sphereclone, ODS柱 ( 250
mm× 4. 6 mm, 5μm);流动相:水 ( A) ,甲醇 ( B) ,梯度
洗脱 , 0～ 4 min, 70% B; 4～ 54 min, 70% ～ 100% B;
流速为 0. 4 mL /min;柱温: 25℃ ;检测波长: 254 nm。
2. 2　对照品溶液的制备:精密称取对照品 5 mg ,置
5 mL容量瓶中 ,用少量甲醇加热溶解 ,冷却 ,甲醇定
容 ,制得标准贮备液备用。
2. 3　供试品溶液的制备:精取药材干燥粉末 0. 4～
2. 5 g ,置具塞三角瓶中 ,室温条件下精密加入环己
烷 50 mL,称重 ,密封 ,放置过夜 ,环己烷调整重量 ,
滤过 ,取续滤液 40 mL水浴蒸干 ,加入甲醇溶液 , 5
mL容量瓶中定容 ,摇匀 , 5 000 r /min,离心 2 min,
上清液即为供试品溶液。
2. 4　线性关系考察:分别精密吸取稀释过的标准贮
备液 2, 4, 6, 10, 12μL进样做 HPLC分析。以峰面
积对进样量 (μg )求得直线回归方程。 五味子酯甲
( 0. 1 mg /mL ): Y = 3 132. 6X + 4. 014 3, r =
0. 999 9,线性范围为 0. 20～ 1. 20μg;甲素 ( 0. 11
mg /mL): Y= 3 985. 7X+ 7. 526 8, r= 0. 999 8,线性
范围为 0. 22～ 1. 32μg;乙素 ( 0. 098 mg /mL): Y=
3 163X+ 2. 959 8, r= 0. 999 9,线性范围为 0. 196～
·951·中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 10期 2003年 10月
1. 176μg;丙素 ( 0. 095 mg /mL): Y= 3 441. 1X+
5. 828, r= 0. 999 9,线性范围为 0. 19～ 1. 14μg。
2. 5　精密度试验: 取同一份对照品溶液 ,按上述色
谱条件连续进样 5次 ,以峰面积计算 ,五味子酯甲、
甲素、乙素、丙素的 RSD分别为 0. 66% , 0. 72% ,
0. 77% , 0. 74%。
2. 6　重现性试验:取云南大理红花五味子藤茎样
品 ,按 2. 3的方法制备 5份供试品溶液 ,测定 ,结果
五味子酯甲、甲素、乙素、丙素的峰面积的 RSD分别
为 0. 69% , 0. 95% , 0. 98% , 1. 02% 。
2. 7　稳定性试验: 取同一份对照品溶液 ,分别在 1,
2, 4, 6, 24 h测定 ,结果五味子酯甲、甲素、乙素、丙
素的 RSD( n= 5)分别为 0. 82% , 0. 75% , 0. 75% ,
0. 72% 。结果表明样品在 24 h内稳定。
2. 8　回收率试验:精密称取丽江产红花五味子藤茎
粉末 5份 ,每份 900 mg左右 ,分别精密加入浓度
1 mg /mL的五味子酯甲、甲素、乙素和丙素各 170,
100, 70, 120μL,按 2. 3项下方法制备 ,测定 ,计算回
收率 ,结果见表 1。
表 1　 4种木脂素的回收率试验结果 (n= 5)
Table 1　 Recovery test of four lignans (n= 5)
木脂素 加入量 /μg 测得量 /μg 回收率 /% RSD /%
五味子酯甲 　 183. 6 　 160. 70 　 87. 51 　　 0. 65
去氧五味子素 103. 0 97. 94 95. 09 1. 63
五味子乙素 71. 4 67. 80 94. 96 1. 16
五味子丙素 129. 6 130. 60 100. 80 1. 19
2. 9　样品的测定: 取 4个产地的 6个样品 ,分别制
备供试品溶液 ,取 1～ 15μL进样作 HPLC分析 ,结
果见图 1,表 2。
A-对照品　 B-丽江产红花五味子
A-reference subs tance　 B-S. rubr if lora grow n in Li jiang
1-五味子酯甲　 2-五味子甲素　 3-五味子乙素　 4-五味子丙素
1-schisan therin A　 2-deoxys chizand rin　 3-schisandrin B
4-schisandrin C
图 1　红花五味子 HPLC色谱图
Fig. 1　HPLC chromatogram of S . rubrif lora
3　讨论
3. 1　由于生药中成分复杂 ,为了使所测 4种活性成
分与其他成分达到有效的分离 ,我们通过反复调整
流动相的比例 ,最终确定流动相:水 ( A) ,甲醇 ( B) ,
表 2　红花五味子中木脂素的含量
Table 2　 Lignan contents of S. rubrif lora
编号 产地及部位 五味子酯甲 /%
五味子
甲素 /%
五味子
乙素 /%
五味子
丙素 /%
1 大理 ,果实 (市售 ) - 0. 945 - -
2 大理 ,茎 ,雄株 0. 070 0. 053 0. 005 0. 010
3 丽江 ,茎 ,雌株 0. 026 0. 007 0. 002 0. 038
4 重庆金佛山 ,茎 ,雌株 - 0. 009 - -
5 重庆金佛山 ,果实 - 0. 148 0. 035 0. 017
6 陕西太白山 ,果实 0. 083 0 0. 757 0. 121 0. 026
　　“ - ”所测成分难以检出
“ - ” absence in determined cons ti tu ents
梯度洗脱 , 0～ 4 min, 70% B; 4～ 54 min, 70% ～
100% B,使 4种活性成分达到了较好的分离。但从
结果来看 ,五味子酯甲的回收率较低 ( 87. 51% ) ,其
分离条件还有待于进一步优化。因测定的是联苯环
辛烯类木脂素成分 ,所以样品制备方法采用文献方
法 [6 ] ,该方法简便、可靠 ,且提取效率高。
3. 2　含量测定结果表明 ,红花五味子木脂素成分的
种类、含量因用药部位和产地的不同而有差别。其中
只有五味子甲素普遍存在 ,且果实中含量高于茎藤。
测定结果还发现 ,采自金佛山同一植株的果实和藤
茎 ,果实中不仅所含成分比茎中多 ,而且含量比茎
高 ,说明形成果实后 ,活性成分主要集中在果实中。
致谢:大理医学院马晓匡教授 ,重庆药用植物种
植研究所刘正宇研究员、任明波先生协助采集标本 ;
本教研室王钢力博士后、王震平硕士研究生在实验
中给予的帮助。
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