全 文 ：表 1　左金丸中小檗碱 HPLC与药典法测定结果 (n= 3)
Table 1　 Content berberine in Zuojin Pill
by HPLC and Ch P s method (n= 3)
厂家 (批号 ) 小檗碱含量 / (m g· g
- 1 )
药典法 (盐酸小檗碱计 ) HPLC法
A ( 021203) 77. 8 40. 8
A ( 030103) 77. 4 41. 4
A ( 030604) 78. 3 41. 7
B ( 021002) 72. 1 35. 9
B ( 030301) 70. 0 31. 2
C ( 020301) 81. 0 45. 8
C ( 030102) 84. 0 47. 2
D ( 030212) 64. 0 27. 9
较低 ,以甲醇-盐酸 ( 100∶ 1)为溶剂盐酸小檗碱色谱
峰与其他干扰组分色谱峰的分离效果不好 ,以水 -盐
酸 ( 100∶ 1)为溶剂效果最佳。而超声提取时间从 20
min到 120min差异无显著 ,故选择 20 min为供试
品提取时间。
3. 3　不同厂家的左金丸 ,采用 HPLC法测定盐酸
小檗碱的含量结果差异较大 , A、 C厂家在 40 mg /g
以上 , B厂家在 30～ 40 mg /g , D厂家低于 30 mg /g。
3. 4　本方法与药典法比较专属性好 ,简便、准确、重
复性好 ,确定合适的限度范围后 ,可作为左金丸的定
量方法。
HPLC法测定益尔力口服液中淫羊藿苷的含量
涂　禾 ,张世明 ,郑　桅 ,闵本初
(国家体育总局成都运动创伤研究所 ,四川 成都　 610041)
　　益尔力口服液为著名运动医学专家郑怀贤教授
经验方经过系统的药物研究后制成的运动补剂。具
有益气血 ,补肝肾 ,强筋骨 ,畅血脉等功效 ,可用于改
善人体机能 ,提高运动能力 ,消除运动性疲劳。 益尔
力口服液以人参、黄芪、淫羊藿、三七、丹参、宁夏枸
杞、红毛五加、佛手等 10味药材为原料提取制得。为
控制其质量 ,本实验采用 HPLC法测定其中淫羊藿
苷的含量。
1　仪器与试药
Waters HPLC仪 , 680自动控制器 , 484可见 -
紫外发光检测仪 , 745B数据处理机。
淫羊藿苷对照品由中国药品生物制品检定所提
供 ,水为高纯水 ,其他试剂均为分析纯。益尔力口服
液由国家体育总局成都运动创伤研究所提供。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件: 色谱柱: Symmetry C18 ( 3. 9 mm×
150 mm , 5 μm ); 预柱: MbondpakTM C18 Gurd-
pakTM ;流动相:乙腈 -甲醇 -0. 1 mol /L磷酸二氢钠溶
液 ( 6∶ 50∶ 50) ;流速: 0. 6 mL /min;柱温: 30℃ ;检
测波长: 270 nm。
2. 2　供试品溶液的制备: 精密量取益尔力口服液
50. 0 mL,水浴浓缩至 10 mL,加甲醇 50 mL沉淀杂
质。高速离心 ( 10 000 r /min) 5 min,用 0. 45μm微
孔滤膜滤过 ,滤液浓缩至 10 mL。 再加甲醇 50 mL
沉淀杂质 ,高速离心 ( 10 000 r /min) 5 min,用 0. 45
μm微孔滤膜滤过 ,用甲醇定容至 100. 0 mL,即得。
2. 3　空白溶液的制备: 按处方组成 ,除去淫羊藿后
的其余药味按处方比例和工艺制成口服液 ,按照供
试品溶液的制备方法制备缺淫羊藿的空白溶液。
2. 4　系统适应性考察: 在上述色谱条件下 ,淫羊藿
苷保留时间约 6. 8 min。 理论塔板数按淫羊藿苷计
不低于 1 200。 空白溶液对测定无干扰。
2. 5　线性关系考察: 精密量取淫羊藿对照品适量 ,
配制 5. 15, 10. 30, 20. 60, 41. 20, 82. 40μg /m L淫羊
藿苷对照品溶液 ,按上述方法测定峰面积。以淫羊藿
苷浓度为横坐标 ,以峰面积为纵坐标进行回归 ,得方
程: A= 5× 105+ 5× 106C , r= 0. 999 9。 结果表明:
淫羊藿苷在 0. 05～ 0. 82μg与峰面积成良好的线性
关系。
2. 6　重现性试验:按拟定的方法测定同一批供试品
(批号 990119) 6份 ,结果淫羊藿苷峰面积 RSD为
1. 02%。
2. 7　稳定性试验:取同批样品按供试品溶液的制备
方法操作 ,每间隔 6 h测定淫羊藿苷的峰面积 ,结果
其 RSD为 0. 98% (n= 3)。
2. 8　回收率试验:采用加样回收法。取已知含量 (含
淫羊藿苷 6. 75μg)的供试品 5份 ,分别准确加入不
同量的淫羊藿苷对照品溶液 ,按拟定方法测定 ,计算
·1009·中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 11期 2003年 11月
收稿日期: 2003-02-11
淫羊藿苷的回收率。结果平均回收率为 100. 56% ,
RSD为 0. 30% (n= 5)。
2. 9　样品测定:分别精密吸取对照品溶液和供试品
溶液各 10μL。 按照上述色谱条件测定淫羊藿苷的
含量 ,结果见表 1。
表 1　益尔力口服液中淫羊藿苷含量测定结果 (n= 2)
Table 1　 Content of icariin in Yierli Oral Solution (n= 2)
批号 淫羊藿苷 / ( mg· mL- 1) 批号 淫羊藿苷 / ( mg· mL- 1 )
990119 1. 34 000221 0. 57
990120 1. 41 000223 0. 52
990121 1. 30 000225 0. 58
991021 1. 28 000227 0. 54
000217 0. 54 000219 0. 54
3　讨论
3. 1　检测波长的选择:取淫羊藿苷对照品适量 ,加
甲醇溶解并稀释成 30μg /m L的溶液 ,于 200～ 450
nm波长扫描 ,在 206, 224, ( 269± 1) nm波长处有
最大吸收 ,在 270 nm处的 E最大。 以 270 nm作为
检测波长 ,进行高效液相色谱分析时 ,其他组分对淫
羊藿苷的测定无干扰 ,故确定 270 nm为检测波长。
3. 2　流动相的选择: 曾试用甲醇 -水、甲醇 -0. 1
mo l /L磷酸二氢钠溶液、甲醇 -0. 4%磷酸溶液、水-
甲醇 -0. 1 mol /L磷酸二氢钠溶液不同比例流动相 ,
结果以乙腈-甲醇-0. 1 mo l /L磷酸二氢钠溶液 ( 6∶
55∶ 50)为流动相效果最好。
3. 3　益尔力口服液组份较多 ,为减少其他组份的干
扰 ,预处理样品曾试用大孔树脂法、正丁醇提取法和
甲醇沉淀法。经比较 ,甲醇既能溶解淫羊藿苷 ,又能
将脂肪、蛋白质、糖等成分沉淀 ,并可除去大部分杂
质 ,其操作简单 ,既保护了色谱柱 ,又可得到较好的
色谱图 ,故采用甲醇沉淀法。
3. 4　测定 10批药材样品中淫羊藿苷的含量 ,结合
药材中淫羊藿苷的含量受产地、采收季节、贮存情况
等影响 ,样品中的淫羊藿苷含量为 0. 20%～ 3. 0% ,
差异较大 ,规定益尔力口服液中淫羊藿苷不得低于
0. 40 mg /m L。
　　 (上接第 966页 )
现代药理学研究方法发现中药复方有效物质 ,在防
治疾病慢性化中将具有重要的理论和实际意义 ,也
将具有十分广阔的临床应用前景。
7　结语
综上所述 ,中药复方物质基础研究已从传统的
思路和方法中走出 ,开始利用多种新兴方法和技术 ,
将中药复方多组份、多靶点、多途径的作用特点与基
因、蛋白表达关联起来进行超高通量筛选 ,将有可能
为临床提供目标更加特异、治疗效果更佳、副作用更
少的新型药物。高质量的研究将有赖于中西医、医学
与药学、临床与基础等多学科之间的跨学科协作。通
过这些研究 ,不仅可以丰富现代医学对疾病发病机
制中整体与局部之间关系的认识 ,而且将进一步深
化对传统中医辨证治疗理论的理解 ,进一步使中医
药学理论的丰富内涵在实践中宏扬光大。
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·1010· 中草药　 Chinese T raditional and Herba l D rugs　第 34卷第 11期 2003年 11月