全 文 ：在 8 h内稳定。
3. 6　重现性试验:取同一批号 (批号 990116)样品 6
份 ,按样品提取法提取、测定 ,结果 10-HDA含量为
7. 37 mg /g ,RSD= 0. 42% ,表明该法重现性较好。
3. 7　加样回收试验: 取已知含量的复方参芪维 E
胶囊样品 (批号 990116) ,分别称取 0. 05, 0. 1,
0. 2 g 各 3份 ,精密加入对照品溶液 ( 0. 622 mg /
m L) 1. 00, 1. 50, 2. 00 mL各 3份 ,按 3. 1. 1项下自
“加氯仿 75m L……”操作 ,直接定容至 10 mL,各进
样 10μL,记录色谱图 ,计算回收率 ,结果见表 1。
表 1　回收率实验结果 ( n= 3)
Table 1　 Results of recovery (n= 3)
称样量 / g 添加 10-HDA的量 /mg 平均回收率 /% RSD /%
0. 05 1. 244 98. 3 2. 0
0. 10 0. 933 0 98. 7 1. 9
0. 20 0. 622 0 96. 6 2. 6
3. 8　样品测定:分别精密吸取对照品溶液与供试品
溶液 10μL,注入液相色谱仪 ,按上述色谱条件测
定 ,记录色谱图 ,以外标法计算样品中 10-HDA的
含量 ,结果见表 2。
表 2　样品测定结果 (n= 3)
Table 2　 Results of samples determination (n= 3)
批号 10-HDA含量 / (mg· 粒 - 1 ) RSD /%
990116 2. 24 1. 34
000828 2. 19 1. 64
990811 0. 41 2. 00
000224 0. 54 0. 76
4　讨论
4. 1　实验中考察了甲醇、乙醇、氯仿提取的前处理
方法 ,结果表明 ,甲醇、乙醇提取成分过多 ,造成色谱
分离困难 ,氯仿提取成分少 ,容易分离 ,且氯仿提取
的 10-HDA量与甲醇、乙醇提取的量无差别。 进行
了氯仿超声提取、回流提取比较试验 ,由于加热造成
杂质溶出增多 ,故选择超声提取方法。考察了超声提
取 15, 20, 30, 40, 50 min的情况 ,结果表明超声处理
20 min,提取量不再增加 ,为了保证提取完全 ,选择
超声提取 30 min。
4. 2　对流动相组成进行了研究 ,结果发现提高流动
相的酸性可以改善色谱峰的峰型 ,但由于 pH值低
于 2会造成色谱柱固定相流失 ,所以调节流动相
pH值在 2. 5～ 3。
4. 3　批号为 990116、 000828的样品是棕黄色粉
末 ,批号为 990811、 000224的样品则为严重板结的
褐色固体 ,实验结果表明 ,后两个样品中 10-HDA
的含量明显降低 ,且其色谱图也比较复杂 ,显然潮湿
板结的样品中 10-HDA已变质 ,有文献 [2 ]报道 10-
HDA极易氧化分解 ,所以一定要注意该药品的贮
存条件。
References:
[1 ]　 Drug Speci f ica tions P romulga ted by the Ministr y of Publ ic
Health , P R Ch ina (中华人民共和国卫生部药品标准 ) [S ].
WS1-( X-083)-94Z.
[ 2]　 Feng T J, Sun Y B. Determination of th e levels of 10-HDA in
Royal Jelly Preparations b y TLC-UV spect roph otom et ry [ J].
China Pharm (中国药房 ) , 1993, 4( 2): 13-15.
HPLC法测定化瘀通脉注射液中原儿茶醛含量
郭　伟 ,严　红 ,刘建萍 ,薛　珊
(天津中医学院第一附属医院 制剂室 ,天津　 300193)
　　化瘀通脉注射液是我院石学敏院士根据中医药
传统理论及多年临床经验 ,结合现代制药技术开发
研制的中药输液型注射液 ,具有活血化瘀、行气止痛
之功效 ,用于心脑血管疾病及中风康复期治疗 ,临床
应用近 8年 ,疗效显著。本实验以方中君药丹参的
水溶性成分原儿茶醛为质量控制指标 ,采用 HPLC
法进行了含量测定 ,方法学研究表明 ,简便、准确、可
靠 ,可作为该制剂的质量控制方法。
1　仪器与试药
　　 Waters高效液相色谱仪 , 441-紫外检测器 ,
510-输液泵 , AN ASTAR色谱工作站。 FA-1104电
子天平。 原儿茶醛对照品 (中国药品生物制品检定
所 ,批号: 813-9201)。化瘀通脉注射液 (天津中医学
院第一附属医院制剂室 )。试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件: 色谱柱: Irregular-H C18柱 ( 4. 6
·522· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 6期 2003年 6月
收稿日期: 2001-10-12作者简介:郭　伟 ( 1967— ) ,女 ,主管药师 , 1989年毕业于天津中医学院中药系 ,主要从事中药制剂质量检验工作。
mm× 250 mm,天津三维公司 ) ,流动相: 水 -甲醇 -
N ,N二甲基甲酰胺 -冰乙酸 ( 90∶ 4∶ 4∶ 2) ,流速:
0. 9 mL /min,检测波长: 280 nm ,柱温: 室温。
2. 2　标准曲线的制备:精密称取原儿茶醛对照品适
量 ,加流动相溶解制成 100μg /mL的对照品溶液。
分别精密吸取 0. 50, 1. 00, 1. 50, 2. 00, 2. 50, 3. 00
m L对照品溶液于 50 mL量瓶中 ,加流动相稀释至
刻度 ,摇匀 ,依次进样 20μL测定。以峰面积积分值
对进样浓度进行线性回归 ,得回归方程 A= 20 586
C+ 2 554. 3, r= 0. 999 8。表明原儿茶醛进样量在
0. 02～ 0. 12μg有良好的线性关系。
2. 3　精密度试验: 吸取原儿茶醛对照品溶液 ,连续
进样 6次 ,测定峰面积 ,结果 RSD= 0. 83% 。
2. 4　稳定性试验:取化瘀通脉注射液 1袋 ,每天进
样 2次 ,连续 5天 ,测定原儿茶醛峰面积 ,结果 1周
内基本稳定 , RSD= 2. 26%。
2. 5　重现性试验: 取同一批号 ( 010412)化瘀通脉
注射液 6袋 ,依次进样 ,平行测定 ,结果原儿茶醛平
均含量为 1. 518μg /mL, RSD= 1. 27% 。
2. 6　空白试验: 依照制剂处方比例 ,制成缺丹参的
化瘀通脉阴性对照液 ,按上述色谱条件测定 ,结果在
原儿茶醛峰出现的位置无对应峰出现 ,表明方中其
他成分对原儿茶醛的测定无干扰 (图 1)。
* -原儿茶醛
* -p rotocatechualdehyde
图 1　原儿茶醛 ( A)、化瘀通脉注射液 (B)
和阴性对照 ( C)的 HPLC色谱图
Fig. 1 HPLC chromatograms of protocatechualdehyde
( A) ,Huayu Fongmai Injection( B) and blank( C) .
2. 7　回收率试验:采用加样回收法。精密吸取已知
含量的化瘀通脉注射液 6份 ,分别精密加入原儿茶
醛对照液 ,加流动相定容 ,充分混匀 ,过 0. 45μm滤
膜 ,直接进样测定。 结果平均回收率为 99. 12% ,
RSD= 1. 39%。
2. 8　样品测定:取化瘀通脉注射液 3批 ,直接进样
测定 ,结果见表 1。
表 1　化瘀通脉注射液中原儿茶醛含量测定结果 (n= 3)
Table 1　 Content of protocatechuldehyde
in Huayu Tongmai In jection (n= 3)
批号 原儿茶醛 / (μg· mL- 1) R SD /%
010427 1. 471 1. 48
010510 1. 646 1. 90
010810 2. 086 1. 50
3　讨论
3. 1　原儿茶醛含量测定方法文献报道较多 ,如薄层
扫描法 [ 1]、高效液相色谱法 [2 , 3]、毛细管电泳法 [4 ]等。
其中 HPLC法较为准确方便。本实验采用 HPLC法
测定化瘀通脉注射液中原儿茶醛的含量 ,效果满意。
3. 2　原儿茶醛为丹参中具活血化瘀活性的主要水
溶性成分 ,原儿茶醛稳定性好 ,且其含量高低与临床
疗效相关 ,对其进行质量控制有实际意义。
3. 3　采用化瘀通脉注射液直接进样 , HPLC法分析
测定 ,适用于医院制剂简便、快速、准确地控制质量。
References:
[1 ]　 Huang Y M , Pan L H, Jian P, et al . Determination of proto-
catech ualdeh yde in Danh ong Injection by TLC scanning [ J].
Ch in Hosp Pharm J (中国医院药学杂志 ) , 2001, 21( 10):
605-607.
[ 2 ]　 Hu X W, Zhao Q W. Determination of p ro tocatech uic acid,
protocatech ualdeh yde in Fenghan Ganmaoning Gran ula by
RP-HPLC [ J] . Ch in J Mod Appl Pharm (中国现代应用药
学 ) , 2002, 19( 1): 53-56.
[ 3 ]　 Guan D W. Determination of Danshensu in Dansh en Pow der
fo r injection by HPLC [ J ]. Ch in J Pha rm Anal (药物分析杂
志 ) , 1994, 14( 3): 36-37.
[ 4]　 Rui J Z, Zou H F, Yuan Y S, et al . Separation of w ater-solu-
ble active principles of Dansh en— Danshensu, protocate-
ch uicaldehyde and p ro tocatech uic acid by HPCE [ J] . Chin
Tra dit Herb Drugs (中草药 ) , 2000, 31( 5): 337-340.
·523·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 6期 2003年 6月