全 文 ：图 1 葫芦素 B(A)和葫芦素滴丸(B)HPLC色谱图
Fig. 1 HPLC chromatograms of cucurbitacin B
( A) and Hulusu Dropping Pill (B)
216 线性关系考察:取葫芦素 B对照品约 25 mg,精
密称定,置 100 mL 量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻
度,摇匀。精密量取2, 3, 4, 5, 6 mL 置10 mL 量瓶中,
用流动相稀释至刻度,摇匀。分别取 20 LL 注入液相
色谱仪,记录峰面积积分值,以浓度为横坐标,积分值
为纵坐标, 进行计算, 得到回归方程为 Y = 13 518X
- 11 634, r= 01999 5。结果表明: 葫芦素 B浓度在
50~ 150 Lg/ mL 时与峰面积线性关系良好。
217 精密度试验:取供试品溶液, 连续进样 5次, 葫
芦素 B峰面积的 RSD = 0132% ,表明分析结果的精
密度良好。
218 稳定性试验:取供试品溶液在 0, 2, 4, 6, 8 h 时
测定,结果葫芦素 B峰面积的 RSD = 110%, 表明供
试品的溶液在 8 h内稳定。
219 重现性试验:对同一批样品, 分别取样 6份, 测
定,结果葫芦素 B 的平均含量为 01100 5 mg/丸,
RSD = 0160% ,重现性符合要求。
2110 回收率测定:采用加入法考察了方法的回收
率。取已准确测定含量的样品 15粒,置 25 mL 量瓶
中,加入葫芦素 B 对照品 115 mg, 用流动相溶解并
稀释至刻度,用微孔滤膜( 0145 Lm)滤过,取续滤液
测定。结果平均加样回收率为 9914%, RSD =
1116% ( n= 6)。
2111 样品测定: 测定了 6批样品, 结果见表 1。由
结果可知,本品的生产工艺较稳定。
表 1 葫芦素滴丸中葫芦素 B的含量测定结果( n= 3)
Table 1 Determination of cucurbitacin B
in Hulusu Dropping Pill ( n= 3)
批 号 葫芦素 B/ ( mg#丸- 1)
020201 0. 100 8
020202 0. 101 3
020203 0. 100 0
020204 0. 099 9
020205 0. 101 7
020206 0. 100 9
3 讨论
311 聚乙二醇 4 000对测定无影响, 可将样品直接
溶解后进样测定。
312 考察了不同牌号色谱柱对分离的影响,如 In-
ersil ODS 柱( 416 mm @ 250 mm)、Hibar ODS ( 416
mm @ 250 mm) , 均获得了与 Vercopak ODS 柱十分
相似的分离效果。另外,流动相组成的浓度改变( ?
2% )对分离效果基本无影响。
313 与已报道的方法作对比试验,本方法具有分离
效果好,检测灵敏度高(最小检出量为 0102 Lg)及重
现性好的特点。
References:
[ 1] Drug Specif ications Promulgated by Minist ry of Public Heal th PRC
(中华人民共和国卫生部药品标准) [ S]1 WS3-B-3711-981
[ 2] Zhao M . Assay and test for content uniformity of H ulusu Tablet
by HPLC [ J]1 Chin J Phar m A nal (药物分析杂志) , 1991, 11
( 4) : 2441
[ 3] Huang L Q, Yao S T. Determinat ion of cucurbitacin B in Tri-
chosanthes hup ehensis by HPLC [ J]1 Chin Tr ad it Herb Drugs
(中草药) , 1994, 25( 10) : 5551
HPLC法测定辛夷鼻炎丸中升麻苷和 5- O-甲基维阿米醇苷的含量
丘文珍 X
(广州中一药业有限公司, 广东 广州 510140)
辛夷鼻炎丸由鹅不食草、鱼腥草、防风等中药组
成,具有祛风清热、消炎解毒之功能,用于治疗鼻炎
(包括过敏性鼻炎、慢性鼻炎等) , 神经性头痛, 感冒
流涕,鼻塞不通等。该制剂原质量标准只对鹅不食
草、鱼腥草进行了薄层鉴别, 为了进一步控制其质
量,本实验对防风中的升麻苷与 5- O-甲基维阿米醇
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X 收稿日期: 2002-10- 31
苷含量[ 1]进行了测定。
1 仪器与试剂
Agilent 1100 serues 液相色谱仪 ( Ag ilent 1100
化学工作站,二极管阵列检测器) , M ODEL HN1006
超声波清洗机(中国华南超声设备厂)。
升麻苷(批号: 1522-200001)、5- O-甲基维阿米
醇苷(批号: 1523-200001)对照品由中国药品生物制
品检定所提供, 超纯水, 甲醇为色谱纯与分析纯, 辛
夷鼻炎丸为本公司产品。
2 方法与结果
211 色谱条件: Hypersil ODS 柱( 5 Lm, 410 mm @
250 mm) ,流动相为甲醇-水( 4B6) , 流速为 110 mL/
min,检测波长为 254 nm,柱温为 45 e 。在该色谱
条件下,升麻苷的保留时间约为 411 min,理论塔板
数不少于 4 000; 5- O-甲基维阿米醇苷的保留时间
约为 914 m in,理论塔板数不少于 8 000。
212 溶液的制备
21211 对照品溶液: 精密称定升麻苷对照品 2193
mg和 5- O-甲基维阿米醇苷对照品 21795 mg, 用甲
醇溶解并定容为 50 mL, 摇匀, 即得(每毫升溶液含
升麻苷 5816 Lg和5- O-甲基维阿米醇苷 5519 Lg)。
21212 样品溶液:精密称取辛夷鼻炎丸粉末 2 g, 置
50 mL 容量瓶中, 加甲醇适量, 浸过夜后, 超声 30
min,冷却,定容至刻度, 摇匀, 滤过, 弃去初滤液, 取
续滤液,即得。
21213 阴性样品溶液:按处方制备不含防风药材的
样品,同法制成阴性样品溶液,备用。
213 方法可行性考察: 取阴性样品溶液、样品溶液
和对照品溶液,在上述色谱条件下进样 3 LL, 结果
见图 1。可知阴性样品对升麻苷和 5- O-甲基维阿米
醇苷测定无干扰。
214 标准曲线的制备: 精密吸取对照品溶液, 各进
样1, 2, 3, 4, 5 LL,测定升麻苷和 5- O-甲基维阿米醇
苷的峰面积,以升麻苷和 5- O-甲基维阿米醇苷的进
样量为横坐标, 峰面积为纵坐标, 绘制标准曲线, 分
别得回归方程。升麻苷: Y = 11779 65X + 01226
634 ( r = 01999 96) ; 5- O-甲基维阿米醇苷: Y =
21074 31X + 11506 16 ( r = 01999 96)。线性范围:
升麻苷 01058 6~ 01293 0 Lg; 5- O-甲基维阿米醇苷
为01055 9~ 01278 5 Lg。
215 精密度试验:精密吸取对照品溶液 3 LL,重复进
样5 次,测定各成分的峰面积, 计算,结果升麻苷的
RSD= 0173%, 5- O-甲基维阿米醇苷的 RSD= 0186%。
2 1 6 重现性试验 : 精密称取同一批样品5份 , 按
1-升麻苷 2- 5- O-甲基维阿米醇苷
1-cimicifugoside 2- 5- O-methylvisammioside
图 1 对照品( A)、阴性样品( B)和辛夷鼻炎丸( C)HPLC图
Fig. 1 HPLC chromatograms of reference substances
(A) , negative solution ( B ) and Xinyibiyan
Pill (C)
21212项下方法平行操作,各取 3 LL 进样,测定,计
算得升麻苷的平均含量为 11026 mg/ g, RSD =
1135% ; 5- O-甲基维阿米醇苷的平均含量为 01768
mg/ g, RSD= 1162%。
217 稳定性试验:精密吸取新配制的样品溶液, 每
隔 2 h进样测定 1次,共测定 5次,结果升麻苷含量
的 RSD = 0163% , 5- O-甲基维阿米醇苷含量的
RSD= 0171%, 表明样品溶液在 8 h内稳定。
218 回收率试验: 精密称取已知升麻苷和 5- O-甲
基维阿米醇苷含量的样品 5份, 分别加入一定量的
升麻苷与 5- O-甲基维阿米醇苷对照品, 按 21212项
处理后, 进样 3 LL,依法测定,计算得升麻苷平均回
收率为 10211% , RSD = 113%; 5- O-甲基维阿米醇
苷回收率为 10311% , RSD= 117%。
219 样品测定: 取 3个批号样品, 每批样本数 n =
3, 分别按 21212项处理后, 进样 3 LL, 依法测定,按
外标峰面积法计算升麻苷和 5- O-甲基维阿米醇苷
的含量,结果见表 1。
表 1 辛夷鼻炎丸中升麻苷和 5- O-甲基维阿米醇
苷含量测定( n= 3)
Table 1 Content of cimicifugoside and 5- O-methy-l visammio-
side in Xinyi Biyan Pill ( n= 3)
批 号 升麻苷/ ( mg#g- 1) 5- O-甲基维阿米醇苷/ ( mg#g- 1)
E00081 1. 019 0. 768
E00077 0. 970 0. 706
EF0003 0. 870 0. 648
3 讨论
311 经多种比例流动相选择[ 2] ,甲醇-水( 4B6)能消
除干扰,使样品中的升麻苷和 5- O-甲基维阿米醇苷
的分离度好,峰形尖锐,较对称, 不拖尾。
312 经加样回收试验及精密度试验, 认为该 HPLC
法不经分离,直接测定其中的升麻苷和 5- O-甲基维
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阿米醇苷的含量, 方法简便快速, 结果可靠, 可作为
辛夷鼻炎丸的质量控制方法。
References:
[ 1] Ch P (中国药典) [ S ]1 2000 ed. Vol Ñ1
[ 2] Chen F K. Deter minat ion of A cti ve Composit ion in Common
T radit ional Chinese Medicine (常用中草药有效成分含量测定 )
[ M ]1 Beijing: People. s Medical Publishing House, 19971
中 药 辛 夷 质 量 标 准 研 究
) ) ) 比色法测定辛夷中总黄酮的含量
王 琪,李洪玲X
(石河子大学药学院,新疆 石河子 832002)
挥发油是中药辛夷中主要有效成分之一, 并且
也一直作为辛夷生药的质量控制指标, 5中华人民共
和国药典62000年版又把木兰脂素作为辛夷生药的
另一质量控制指标,但一些成药和制剂对辛夷的成
分一直没有可靠的质量控制指标。辛夷除了含挥发
油、木脂素外, 还有黄酮类、生物碱及萜类成分[ 1]。
现代药理实验表明[ 2] , 辛夷的醇提物具明显的抑
菌、扩张血管、降血压及对血小板聚集和血栓形成起
抑制作用等药理活性, 而仅以挥发油或木脂素作为
质量控制指标, 不够全面,因此有必要通过多指标综
合分析该类药材的质量。为此我们建立了比色法测
定辛夷中总黄酮含量方法,并对该方法进行了考察,
该法简便、快速、稳定性较好, 可用于辛夷中总黄酮
的测定。
1 材料、仪器和试药
自西安市万寿路药材市场购得多份辛夷药材,
分别为望春玉兰 Magnolia biondii Pamp1、武当玉
兰 M . spr enger i Pamp.的花蕾;自西安市植物园采
得玉兰 M . denudata Desr.的花蕾。以上材料均经
西安交通大学药学院生药室李映丽教授鉴定。将材
料阴干,粉碎,过 3号筛备用。
752型紫外光栅分光光度计(上海第三分析仪
器厂) , TG328B 型光学分析天平(上海天平仪器总
厂) , 电热恒温水浴锅(北京长安科技仪器厂)。
芦丁对照品( 0080-9705)由中国药品生物制品
检定所提供,所用试剂均为分析纯。
2 方法和结果
211 对照品、供试品溶液的制备[ 3]
21111 对照品溶液制备: 精密称取芦丁 10126 mg,
用甲醇定容于 10 mL 容量瓶中,精密吸取 5 mL 置
50 mL 容量瓶中, 加水至刻度, 摇匀, 即得 01102 6
mg/ mL 对照品贮备液。
精密吸取对照品溶液 1 mL 置 25 mL 容量瓶
中,加入蒸馏水8 mL; 加入 5%亚硝酸钠015 mL,放
置 6 min;加入 1%硝酸铝溶液 1 mL, 放置 6 min;加
入 4%氢氧化钠溶液 8 mL,用蒸馏水定容至刻度,
摇匀,备用。
21112 供试品溶液制备:精密称取 5 g 辛夷药材粉
末置索氏提取器中,加石油醚 120 mL, 加热回流至
提取液无色, 放冷, 弃去石油醚液, 残渣加甲醇 40
mL,加热回流 415 h(经考察黄酮类物质已提取完
全) ,提取液过滤, 置 50 mL 容量瓶中, 以甲醇定容
至刻度, 精密吸取 1 mL 于 25 mL 的容量瓶中, 依
21111项下方法显色,备用。
212 检测波长的选择:取对照品、供试品溶液适量,
于 400~ 600 nm 波长扫描。对照品溶液与供试品
溶液在 510 nm处均有最大吸收,故确定 510 nm 为
检测波长。
213 线性关系的考察: 精密吸取对照品贮备液
010, 110, 210, 310, 410, 510, 610, 710, 810 mL, 按
21111项下方法显色,放置 15 m in,用空白作对照,
在 510 nm 处测定。以吸光度值为纵坐标, 浓度为
横坐标进行回归, 得方程 Y= 2186X + 01043 7, r=
01997 5。线性范围为 41104~ 32183 Lg / mL。
214 重复性试验:精密称取 5份望春玉兰药材样品
适量, 制备供试液测定, 吸光度值的 RSD 为
2123%。
215 稳定性试验: 精密称取望春玉兰药材样品适
#424# 中草药 Chinese T raditional and Herbal Drugs 第 34 卷第 5 期 2003年 5月
X 收稿日期: 2002-09- 18作者简介:王 琪( 1968 ) ) ,男,新疆石河子人,硕士学位,讲师,从事天然药物的资源调查及开发利用。
T el: ( 0993) 2057159 E-mail: w angqi681015@ 163. com