全 文 ：间, 从而提高萃取速率; 另一方面微波作用于溶剂,
不仅加热了溶剂, 而且提高了溶剂的活性, 使其能更
多地溶解有效成分。正是微波的这些热效应和非热
效应加速了萃取过程。
314　对于传统的醇提取工艺, 加热回流时溶剂温度
很难达到 80 ℃以上, 若在水中加热回流, 则最高温
度也难以超过 100 ℃, 无论加热时间多么长均如此。
但微波加热就有可能使受热物质在局部温度超过
100 ℃。若液泡不能耐受 100 ℃高的温度, 就易破
裂, 以致有效成分在破裂处一拥而出。如果把液泡看
作一个气球, 对外是密封的, 则微波加热此球, 尽管
球内也是水分, 但在这样一个密闭体系内 (相当于压
力容器内) , 温度可能超过 100 ℃, 于是液泡膜破裂。
315　通过透射电镜观察, 发现微波萃取较传统提取
更易使细胞内的液泡膜发生变形或破裂, 从而更易
使细胞内的有效物质溶出。这正是微波辅助萃取所需
的时间较传统提取的时间短的原因, 也是微波萃取所
得产品中有效成分的含量相对较高的原因所在。
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配伍对葛根芩连汤中小檗碱含量的影响
吴昭晖, 奚林明, 戴开金, 罗佳波, 谭晓梅Ξ
(第一军医大学 中药制剂研究重点实验室, 广东 广州　510515)
摘　要: 目的　建立H PL C 法测定葛根芩连汤各配伍煎液中小檗碱的含量测定方法, 研究配伍对小檗碱含量的影
响。方法　采用L 8 (27)正交设计及统计软件 SPSS1010 统计方法, 以H PL C 法测定小檗碱的含量。结果　葛根、黄
芩、甘草对方中小檗碱含量的影响差异存在显著性 (P < 0105) , 葛根与黄芩、黄芩与甘草、葛根与甘草对小檗碱的含
量影响交互作用不显著。实验中观察到凡是黄连与葛根、黄芩、甘草的配伍组皆有沉淀产生, 沉淀中含有一定量的
小檗碱。结论　葛根、黄芩、甘草降低小檗碱的含量。
关键词: 葛根芩连汤; 配伍; 小檗碱; 高效液相色谱
中图分类号: R 286102　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 01 0033 03
Inf luence of com pa tib il ity on con ten t of berber ine in Gegen Qin l ian D ecoction
W U Zhao2hu i, X I L in2m ing, DA I Kai2jin, LUO J ia2bo , TAN X iao2m ei
(Key L abo rato ry of Pharm aceu tics of Ch inese M ateria M edica, F irst M ilitary M edical U niversity,
Guangzhou 510515, Ch ina)
Abstract: Object　To set up the quan t ita t ive m ethod of berberine in decoct ion s p repared from variou s
com b inat ion s of the recipe nam ed Gegen Q in lian D ecoct ion (GQD ) by H PL C and to determ ine the change
of berberine con ten ts in differen t decoct ion. M ethods　By L 8 (27) o rthogonal design and sta t ist ics analysis
(SPSS 1010) , eigh t decoct ion s of R h iz om a Cop tid is either a lone o r in com b inat ion w ith one o r mo re o r the
o ther th ree componen ts w ere p repared and analyzed. T heir berberine con ten ts w ere determ ined by H PL C.
Results　Fo r R ad ix P uera riae, R ad ix S cu tella rias, and R ad ix G ly cy rrh iz ae P rep a ra ta , the difference on
the con ten t of berberine is sign if ican t (P < 0105). In teract ion s betw een tw o of th ree is in sign if ican t in th is
experim en t. T he sedim en ta t ion is found in the decoct ion s of R h iz om a Cop tid is incom b ined w ith one o r
mo re of the o ther th ree componen ts. Conclusion 　T he con ten t of berberine is reduced by R ad ix P uera ri2
ae, R ad ix S cu tella ria , and R ad ix G ly cy rrh iz ae P rep a ra ta.
Key words: Gegen Q in lian D ecoct ion (GQD ) ; compat ib ility; berberine; H PL C
·33·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 1 期 2004 年 1 月
收稿日期: 2003204214
基金项目: 国家自然科学基金面上重点资助项目 (39970886) ; 广东省自然科学基金资助项目 (001070)
　　葛根芩连汤出自《伤寒论》, 由葛根、黄芩、黄连、
甘草组成, 具有轻清解肌、清热止利功效, 用于治疗
太阳表邪内陷所致肠热下利证, 临床应用广泛。葛根
芩连汤具有解热、抗菌、抗病毒、解痉、抑制胃肠运
动、抗缺氧、抗心律失常、增强机体免疫功能等药理
作用。本实验主要研究了配伍对小檗碱含量的影响。
1　仪器与试药
　　美国惠普 H P 1100 高效液相色谱仪 (G1315A
紫外2可见光二级管阵列检测器) ; pH 计 (美国OR I2
ON , 410A 型) ; 甲醇 (分析纯、色谱纯) , 乙腈 (色谱
纯) , 三乙胺 (分析纯) ; 盐酸小檗碱对照品 (中国药品
生物制品检定所, 含量测定用, 批号: 071329906) ; 葛
根、黄芩、黄连、甘草药材由广州市药材公司提供, 经
第一军医大学中药药剂教研室奚林明鉴定分别为豆
科植物野葛 P uera ria loba ta (W illd. ) O hw i, 唇形
科植物黄芩 S cu tella ria ba ica lensis Geo rgi 干燥根
茎, 毛茛科植物黄连Cop tis ch inensis F ranch. 干燥根
茎, 豆科植物甘草G ly cy rrh iz a u ra lensis F isch. 干燥
根茎 (经蜜制)。
2　方法与结果
211　葛根芩连汤中小檗碱的含量测定
21111　色谱条件: 色谱柱为 Zo rbax SB C 18柱 (416
mm ×250 mm , 5 Λm ) ; 流动相: 乙腈2012 mo löL 乙酸
铵 (0101 mo löL KH 2PO 4+ 012% 三乙胺) (47∶53) ;
流速: 018 mL öm in; 柱温: 室温; 检测波长: 346 nm。
21112　标准曲线: 精密称取盐酸小檗碱对照品约 6
m g, 置 50 mL 量瓶中, 加流动相溶解, 制成对照品溶
液。精确吸对照品溶液 1, 2, 4, 6, 8 mL 于 10 mL 量
瓶中, 流动相定容。进样, 测定峰面积, 以浓度对峰面
积进行线性回归, 得回归方程: Y = 191568 972 X -
91564 875, r = 01999 9。结果表明盐酸小檗碱在
11196～ 11916 ΛgömL 线性关系良好。
21113　供试品溶液及阴性对照溶液的制备: 按处方
配比取葛根芩连汤各味药饮片 (葛根 15 g, 黄芩、黄
连各 9 g, 甘草 6 g) 3 份及缺黄连阴性对照 3 份, 加
水 400 mL , 先煎葛根 20 m in, 余药共煎 30 m in, 煎
两次, 粗滤过, 合并滤液, 定容至 1 000 mL。取 20
mL , 用 80 mL 甲醇溶解, 离心, 洗涤沉淀, 清液用甲
醇定容至 100 mL , 膜滤过, 得供试品溶液。依次进
样, 测定浓度, 计算得汤剂中小檗碱的含量为 01293
gö剂, R SD = 1197% (n= 3)。色谱图见图 1。
21114　精密度试验: 取对照品溶液重复进样 5 次,
小檗碱峰面积R SD 为 0119%。
21115　稳定性考察: 取样品液各一份, 在配置后 4,
A 2盐酸小檗碱对照品　B2葛根芩连汤
C2葛根芩连汤沉淀物　D 2缺黄连阴性
A 2berberine ch lo ride reference substance　B2GQD
C2depo sito r of GQD　D 2samp le w ithou t R h iz om a Cop tid is
图 1　HPLC 色谱图
F ig. 1　HPLC chromatogram s
8, 12, 24 h 进样, 测定小檗碱浓度, 其 R SD 为
0186% , 表明 24 h 内溶液稳定。
21116　加样回收率试验: 精密量取已测定含量的葛
根芩连水煎液 20 mL , 分别加入盐酸小檗碱对照品
约 6 m g, 按 21113 项下“用 80 mL 甲醇溶解⋯⋯”起
同法操作, 进样, 测定小檗碱浓度, 计算含量, 求得平
均回收率为 98150% , R SD 为 0159% (n= 4)。
212　配伍对葛根芩连汤中小檗碱含量的影响
21211　正交设计: 选葛根、黄芩、苷草作为 3 个因
素, 选用药和不用药为 2 个水平, 并考虑两两交互作
用, 因素水平见表 1。
表 1　因素水平表
Table 1　Factors and levels
水平
因　　素
A 葛根 B 黄芩 C 甘草
1 用　药 用　药 用　药
2 不用药 不用药 不用药
21212　试验安排: 采用L 8 (27) 正交试验优化, 试验
安排及结果见表 2。
21213　统计分析: 采用 SPSS 1010 统计分析软件,
结果表明葛根、黄芩、甘草对小檗碱的影响差异具有
显著性 (P < 0105) , 即葛根、黄芩、甘草降低了小檗
碱的含量。葛根与黄芩、黄芩与甘草、葛根与甘草交
互作用差异无显著性。
213　单味药及产生沉淀各煎液 pH 测定和沉淀中
小檗碱含量测定: 在实验的过程中发现凡含黄连的
各配伍均有沉淀产生, 故对沉淀进行考察。各配伍药
液的煎法按 21113 项下至“⋯⋯合并滤液”, 滤液放
冷, 离心, 上清液用 pH 计测 pH , 沉淀用水洗 3 次,
60 ℃干燥至恒重, 称重, 精确称取定量, 加定量甲醇
回流提取 1 h, 滤过, 定容, 按小檗碱的含量测定方
法测定。含黄连配伍溶液 pH 值及沉淀中小檗碱的
·43· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 1 期 2004 年 1 月
含量测定结果见表 3。从表 3 中可以看出pH 值从低
到高的顺序为黄连煎液< 含黄连合煎液< 葛根、黄
芩、甘草单煎液, 各配伍煎液沉淀中小檗碱的含量高
于单煎液, 黄连与黄芩配伍煎液沉淀中小檗碱最多。
表 2　L 8 (27)正交设计及结果
Table 2　L 8 (27) orthogonal design and result
实验
次数
A B A ×B D A ×D B×D 空白
小檗碱含量ö
(g·剂- 1)
1 1 1 1 1 1 1 1 0. 294
2 1 1 1 2 2 2 2 0. 335
3 1 2 2 1 1 2 2 0. 295
4 1 2 2 2 2 1 1 0. 388
5 2 1 2 1 2 1 2 0. 336
6 2 1 2 2 1 2 1 0. 357
7 2 2 1 1 2 2 1 0. 414
8 2 2 1 2 1 1 2 0. 506
表 3　含黄连配伍溶液 pH 值及沉淀中小檗碱的含量
Table 3　pH in decoction s with Rh izom a Cop tid is
and berber ine con ten t in depositors
　　　配　伍 pH 值 小檗碱含量ö(g·剂- 1)
　葛　根 5. 23 -
　黄　芩 5. 45 -
　甘　草 5. 10 -
　黄　连 3. 73 0. 004
　黄连+ 葛根 4. 23 0. 033
　黄连+ 黄芩 4. 14 0. 209
　黄连+ 甘草 4. 08 0. 086
　黄连+ 黄芩+ 葛根 4. 36 0. 045
　黄连+ 黄芩+ 甘草 4. 31 0. 044
　黄连+ 葛根+ 甘草 4. 15 0. 121
　葛根芩连汤 4. 48 0. 064
3　结果及讨论
311　从表 2 可以看出, 在 0105 的水平下, 葛根、黄
芩、甘草使小檗碱含量降低。实验中发现葛根与黄连
合煎液会有沉淀产生, 产生沉淀的原因是否是葛根
中的某些成分与小檗碱形成复合物, 有待进一步的
研究证实。黄芩使小檗碱含量降低的原因是否是小
檗碱与黄芩苷形成复合物有待进一步的研究证实。
甘草降低小檗碱的含量是否与产生新物质有关还有
待进一步的研究。
312　对含黄连各配伍产生的沉淀物分析表明, 沉淀
中所含主要成分之一为小檗碱 (约占沉淀物 15%～
25% ) , 小檗碱沉淀是否是由于形成的复合物分解所
致有待进一步的研究。从表 3 中可以看出 pH 值从
低到高的顺序为黄连煎液< 含黄连合煎液< 葛根、
黄芩、甘草单煎液, pH 值的改变可能与小檗碱沉淀
有一定的关系。
313　黄连能清热燥湿, 泻火解毒, 主治温病热甚心
烦, 湿热痞满, 湿热下痢等。黄连苦寒, 有抑阳损脾伤
胃的副作用, 单用或用量过大, 往往引起胃脘饱胀、
厌食、腹痛等症状, 所以需要配伍性微温的药物, 以
减缓其苦寒太过, 避免不良反应。有研究表明黄连与
黄芩、甘草配伍可拮抗黄连对红细胞的损害作用[2 ] ,
本研究证明葛根、黄芩、甘草皆能降低方中黄连小檗
碱的含量, 提示降低了苦寒之性可能与降低了小檗
碱的含量有关。
314　葛根、黄芩、甘草皆能降低方中黄连小檗碱的
含量, 并不意味着配伍后药效就降低, 药效的降低与
否取决于有效成分的综合作用。有研究表明黄连与
黄芩、甘草按适当的比例配伍, 可以增强黄连对金黄
色葡萄球菌生长抑制作用[3 ]。而葛根、黄连、黄芩、甘
草单味药还未发现抑制作用。提示本方配伍仍可能
有增强药效的作用。
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