全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第8期2005年8月·1247·
RP—HPLC法测定黄芩中3种黄酮
刘 源1，邓少伟2，原文鹏3，马双成4
(】．深圳市第二人民医院，广州深圳518035；2．国家中药品种保护审评委员会，北京100061；
3．深圳市人民医院，广州深圳 518020；4．中国药品生物制品检定所，北京100050)
黄芩为唇形科植物黄芩Scutellariab icalensis
Georgi的干燥根，为常用中药，具有清热泄火、解
毒、止血、安胎等作用，其中黄酮类化合物为主要有
效成分，含量较高的成分有黄芩苷、汉黄芩营、黄芩
素口]。因此，研究制定此3种成分含量的药材标准，
对提高黄芩的整体质量水平有很大的意义。目前《中
华人民共和国药典》2000年版一部中[2]，仅对黄芩
中的黄芩苷进行含量测定。本实验利用RP—HPLC
梯度洗脱法，建立了同时测定黄芩中黄芩苷、汉黄芩
苷和黄芩素含量的方法，该方法可为黄芩药材质量
控制提供科学依据。
1仪器、试药和材料
Waters高效液相色谱仪包括：LC一2690泵，
996二极管阵裂检测器，600自动进样品，Millenium
32数据处理软件系统(美国)。
甲醇为色谱纯；水为Milli—Q；四氢呋喃
(THF)、磷酸、甲醇和乙醇为分析纯。黄芩样品分别
购自深圳市华辉药业公司，经深圳市人民医院中药
室主任原文鹏副主任中药师鉴定为黄芩S．
baicalensisGeorgi的干燥根。
黄芩苷对照品(中国药品生物检定所提供，含量
大于98％)；汉黄芩苷和黄芩素对照品(自制，
HPLC归一化法计算其含量大于98％)。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱为LichrospherC18柱(250
nnm×4．6mm，5弘m)；流动相为：1．CH30H，
2．H20—THF—H。PO。(85：12：0．3)梯度洗脱时间
程序见表1；检测波长为275nm；体积流量为1
mL／min；进样量为10肛L，色谱图见图1。
2．2对照品溶液的制备：取黄芩苷5mg，汉黄芩苷
(O．1mg／mL)5mL和黄芩素(o．1mg／mL)2mL
置同一25mL容量瓶内，用甲醇稀释至刻度，摇匀，
即得。
2．3 供试品溶液的制备：取黄芩细粉(过4号筛)
表1 含量测定梯度洗脱时间程序
Table1 Gradientelutionnquantitativenalysis
时间／min 流动相1／％ 流动相2／％
0 10 20 30 40 0 10 20 30 40
时间r／min
1一黄芩苷 2一汉黄芩苷 3一黄芩素
1-baicalin2-wogonoside3-baicalein
图1对照品(A)和黄芩(B)的HPLC色谱图
Fig．1HPLCchromatogramofreferencesubstances(A)
andS．baicalensissamples(B)
0．1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加70％乙醇
100mL，称质量，超声处理30rain，取出，放冷，再称
质量，用70％乙醇补足减失的质量，摇匀，滤过，弃
去初滤液，取续滤液过0．45肛m微孔滤膜，即得供
试品溶液。
2．4线性关系考察：取5个不同浓度的对照品溶液
分别进样10弘L，按上述色谱条件测定峰面积，以对
照品进样量(肛g)为横坐标(X)，以峰面积值为纵
坐标(y)进行线性回归，得回归方程及线性范围分
别为：黄芩苷：Y=3202474X+79479，r=
0。999，0．4～2．0腭；汉黄芩苷：Y=3607X+
783．5，r=0．9999，0．4～0．20Pg；黄芩素：Y一
3122X+688．2，r一0．9999，0．04---0．20,ug。
2．5精密度试验：精密吸取对照品溶液10弘L，连
续进样5次，按上述色谱条件测定，测得峰面积，3
种成分的RSD分别为：黄芩苷0．94oA；汉黄芩苷
收稿日期：2004一II-15
作者简介：刘源，女，1989年毕业于北京中医药大学中药学院，获医学学士学位，主管中药师，现在深圳市第二人民医院药学部临床药
学室工作，主要研究方向为中药、民族药的鉴定、整理、新制剂、新剂型开发及质量控制、医院药房管理、临床药学等。
万方数据
·1248· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第8期2005年8月
1．21％；黄芩素0．67％。
2．6稳定性实验：精密吸取对照品溶液10肛L，分别
于2、4、6、8、10、24h进样，按上述色谱条件测定，测
得峰面积，3种成分的RSD分别为：黄芩苷0．74％；
汉黄芩苷1．11％；黄芩素0．57％。结果表明对照品
溶液在24h内稳定。
2．7重现性试验：取同一批样品5份，按“2．3”项制
备供试品溶液，按上述色谱条件测定，结果平均质量
分数为：黄芩苷10．26％，RSD=1．14％(咒=5)；汉
黄芩苷2．77％，RSD一1．34％(72=5)；黄芩素
0．77％，RSD一1．69％(，z一5)。
2．8加样回收率试验：取已测知含量的样品0．05
g5份，精密称定，精密加入各种对照品溶液，照上
述方法提取，测定，结果平均回收率为：黄芩苷
100．52％，RSD一1．23％(，z=5)；汉黄芩苷
99．58％，RSD=1．99％(咒一5)；黄芩素99．67％，
RSD=1．04％(咒=5)。
2．9 样品测定：照上述方法提取，测定，结果见
表2。
3讨论
3．1 《中国药典》2000版一部黄芩项下规定黄芩苷
含量不得低于9％。本次所测定5批黄芩样品中，黄
芩苷含量全部高于9％，同时这5批样品中汉黄芩
表2 5批黄芩样品含量测定结果(露一4)
Table2 QuantjtatLveanalysisoffiveS．baicalensis
insamples(撑一4)
批号 黄芩苷 汉黄芩苷 黄芩索
1 12．15
2 13．14
3 12．88
4 10．52
5 9．99
2．77
2．94
2．87
2．58
2．62
苷的量全部高于2％，黄芩素的量全部高于1％。建
议《中国药典》增加汉黄芩苷和黄芩素两个质量控制
指标。
3．2本试验方法同时测定3种成分，为保证3种成
分都能提取完全，比较了70％乙醇和甲醇超声提取
的提取率，根据实验结果，选用70％乙醇作溶剂。
通过比较不同超声时间(15、30、45、60min)的提取
率，结果表明超声30rain提取率最高。
3．3本实验结果为黄芩药材质量标准的修订提供
了科学依据。
References：
EliGaozH，HuangKX，XuHB．ProgressOilbiologicalaetivi—
tystudyofflavonoidsinScutellariab icalensis口]．Chin
PharmJ(中国药学杂志)，1998，33(12)：705—707．
[z]ChP(中国药典)Es]．VolI．2000．
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万方数据
RP-HPLC法测定黄芩中3种黄酮
作者： 刘源， 邓少伟， 原文鹏， 马双成
作者单位： 刘源(深圳市第二人民医院,广州,深圳,518035)， 邓少伟(国家中药品种保护审评委员会,北
京,100061)， 原文鹏(深圳市人民医院,广州,深圳,518020)， 马双成(中国药品生物制品检
定所,北京,100050)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(8)
被引用次数： 6次
参考文献(2条)
1.Gao Z H;Huang K X;Xu H B Progress on biological activity study of flavonoids in Scutellaria
baicalensis[期刊论文]-中国药学杂志 1998(12)
2.中国药典 2000
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6.赵刚.杜玮.魏玉辉.姚小军.武新安 银黄制剂的HPLC-ELSD指纹图谱研究[期刊论文]-中草药 2009(7)
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