全 文 ：[ δ:105.2, 75.2 , 77.9, 69.3 , 78.3, 62.3] 。因此 ,文
献 〔1〕报道的升麻醇-3-O-β-D-葡萄糖苷的结构应为
升麻醇-3-O-β-D-半乳糖苷。
另外 ,本研究同时也分得升麻醇-3-O-β-D-半乳
糖苷 ,其13CNMR谱数据与文献〔1〕报道的升麻醇-3-
O-β-D葡萄糖苷的糖基部分和苷元部分均一致 。比
较化合物 1和升麻醇-3-O-β-D-半乳糖苷的薄层层
析色谱 ,其 Rf值不相同 ,说明二者为不同的化合物。
4 　实验部分
化合物 1:白色无定形粉末 , mp 234 ～ 235℃,
[ α] 20D +70.6(c 0.19, CHC l3 ), Libe rmann-Bu rchard
反应阳性 , Molish反应阳性。 FAB-MS显示其准分
子离子 m /z 651[M +H ] +。 IR(KBr)cm-1:3700 ～
3040(br, OH), 2965, 2935, 1460, 1380, 1260, 1170,
1075, 1045, 980。1HNMR (C5D5N , 500Hz) δ:0.23
(1H , d, J=4.0 H z, 19-H ), 0.55(1H , d, J=5.5 Hz,
19-H), 0.85(3H , d, J =5.4 H z, 21-CH3 ), 1.09,
1.14, 1.18, 1.32, 1.46, 1.48(各 3H , s, 6 ×CH3),
3.53(1H , dd, J=11.5, 4.5 H z, 3-αH), 3.76(1H , s,
24-H), 4.25(1H , s, 15-βH), 4.74(1H , d, J =8.5
H z, 23-H), 4.76(1H , d, J=9.0H z, 葡萄糖端基氢
1’ -H), 4.05(1H , t, J=8.H z, 2’ -H), 4.24(1H , t, J=
7.0Hz, 3’ -H ), 4.24(1H , dd, J =6.5, 7.0 H z, 4’ -
H), 3.96(1H , d, J=7.5 Hz, 5’ -H), 4.41(1H , dd, J
=11.6, 5.0 H z, 6’ -H ), 4.57(1H , dd, J =11.5,
2.0Hz, 6’ -H)。
化合物 4:白色针晶 , mp178 ～ 179℃(Me2CO)。
FeC l3反应阴性。 UV:λm ax (MeOH):220(11096),
234(11850), 288 (12355), 315 (13743) nm。 IR
(KB r) cm-1:2905, 2550, 1660, 1605, 1580, 1495,
1240, 1120, 960。 E I-M /z:209(M +1), 208(M +,
100)193, 91 , 77.51。 δH (CD3OH):3.84(6H , s, 2 ×
OCH3), 6.30 (1H , d, J =18H z, 反式烯氢 =C-
COOH), 7.02(3H , m , 3 ×A r-H), 7.58(1H , d, J =
18Hz反式烯氢 A r-C =)ppm。根据以上数据鉴定化
合物 4的结构为咖啡酸二甲醚 (Caffe ic acid dimethy l
e ther)〔5〕。
致谢:中国医学科学院药物研究所质谱室代测质谱 ,北京微量化
学研究所代测 1HNMR、13CNM R谱 ,本所分析室代测红外光谱 、紫外
光谱 、旋光光谱。
参 考 文 献
1　李从军 ,等 .升麻苷 F的分离和结构 . 药学学报 , 1994,
29(2)∶934
2　Kusano A, et al. S tudies on the constituents o fCim icifuga
Species X IX. Eight new g lycosides from Cim icifuga sim-
plex. Chem. Pharm. Bull. 1996, 44(11):2078
3　李从军 , 等 . 升麻中三萜类成分 . 药学学报 , 1994, 29
(6)∶449
4　Saku ra iN, e t a l. S tud ie s on the chiene se c rude drug Sho-
ma. VⅢ. Tw o new trite rpenol b isdem oside s, 3-arab inosy l-
24-O-acety lhydroshengm ano l 15-g luco sede and 3-xy losy l-24-
O-ace ty lhydroshengm ano l 15-g lucoside from Cim icifufga
dahurica. Chem. Pharm. Bull. 1994, 42(1)∶48
5　黄驰 ,等 .南川升麻的成分研究 .中国药科大学学报 ,
1988, 19(3)∶201
(2004 - 12 -23收稿)
RP-HPLC法测定黄芩属四种药材中五个活性成分的含量
张　箭1　肖丽和2　李发美 3
(1.三九医药股份有限公司 ,广东深圳 518029;2.深圳市药品检验所 ,广东深圳 518029;3.沈阳药科大学
药学院 ,辽宁沈阳 110016)
　　摘要　目的:分析比较不同来源黄芩药材中五个有效成分(黄芩苷 、汉黄芩苷 、黄芩素 、汉黄芩素和千层纸素
A)的含量。方法:RP-HPLC法 , Z irchrom C8色谱柱(5 μm, 200×4.6 mm), 流动相为水-乙腈-甲醇(54∶28∶18, V /V /
V),含 0. 5%三乙铵 , 磷酸调 pH 2. 8, 检测波长 276 nm , 进样量 20μl。结果:所有成分在 30 m in内可达到完全分离 ,
每种成分在各自的浓度范围内均具有良好的线性相关性;加样回收率为 99.0% ～ 104. 6%, 其相对标准偏差为
1. 65% ～ 3.52%。结论:本法操作简便 ,结果准确 , 适用于黄芩类药材的活性成分分析。
关键词　RP-HPLC;黄芩苷;汉黄芩苷;黄芩素;汉黄芩素;千层纸素 A;黄芩
　　黄芩为常用中药 ,药用历史悠久 ,历代本草均有
收载。除了药典规定的黄芩 Scutellaria baica lensis
Georg i作为正品药用外 ,其同属近缘植物如粘毛黄
芩 S. viscidula Bge.、滇黄芩 S. amoena C. H.
389 中药材第 28卷第 5期 2005年 5月
DOI牶牨牥牣牨牫牳牰牫牤j牣issn牨牥牥牨牠牬牬牭牬牣牪牥牥牭牣牥牭牣牥牨牫
W righ t、甘肃黄芩 S. rehderiana D iels等在临床上也
作黄芩入药 ,滇黄芩在我国西南地区是药用黄芩的
主要来源 〔1〕。黄芩中黄酮类化合物为其主要有效
成分〔2〕 ,国内外针对其主要的黄酮类化合物建立了
不少定量分析方法 ,如紫外分光光度法 、二阶导数差
示脉冲极谱法 、薄层扫描法 、高效液相色谱法等 ,其
中高效液相色谱法因其简便 、准确最具优势 ,富森毅
等 〔3〕用两种 HPLC条件分别测定黄酮苷和黄酮苷
元 , Y.Takino等 〔4〕用 HPLC梯度洗脱法测定了 7种
黄酮类化合物 ,本文参考文献 〔5〕建立反相高效液相
色谱法同时测定黄芩中五个有效成分黄芩苷 (ba-
ica lin)、汉黄芩苷 (wogono side)、黄芩素 (baicalein)、
汉黄芩素(wogonin)和千层纸素 A(o roxy lin A)含量
的分析方法 ,并对不同来源的 4种共 16份黄芩药材
样品进行测定 ,为黄芩药材的质量评价及代用品的
合理应用提供一定的科学依据 。
1 　仪器 、试剂与药材
Jasco PU-980型高效液相色谱仪 , Jasco UV-975
紫外检测器 (日本分光公司 );WSC色谱工作站 (大
连化学物理研究所)。
黄芩苷对照品由中国药品生物制品检定所提
供 ,汉黄芩苷 、黄芩素 、汉黄芩素 、千层纸素 A均由
黄芩药材中提取分离制得 ,纯度 98%以上(HPLC法
测定);乙腈 、甲醇为色谱纯 , 水为二次重蒸水 ,磷
酸 、三乙铵为分析纯。
所用药材黄芩 S cutellaria ba ica lensis Georgi、粘
毛黄芩 S. viscidu la Bge.、滇黄芩 S. amoena C. H.
W righ t、甘肃黄芩 S. rehderiana D iels均购自各地药
材市场 ,由沈阳药科大学郭允珍教授鉴定 。
2 　方法与结果
2.1 　色谱条件　Z irchrom K romasil C8 色谱柱 (5
μm , 4.6×200 mm);流动相:水-乙腈-甲醇 (54∶28∶
18, v /v /v),含 0.5%三乙胺 , 磷酸调 pH 2.8;流速:
0.8m l /m in;柱温:室温:检测波长:276 nm。
2.2 　对照品及供试品溶液的配制　分别精密称取
黄芩苷 、汉黄芩苷 、黄芩素 、汉黄芩素 、千层纸素 A
对照品适量 ,用甲醇配制成浓度分别为 570 μg /m l、
190μg /m l、220 μg /m l、160μg /m l、45 μg /m l的储备
液 。由各对照品储备液适量混合 ,甲醇稀释配制成
对照品溶液和不同浓度的标准工作曲线溶液。分别
称取 60℃干燥 4 h的各种黄芩中粉约 0.3 g,精密称
定 ,加 75%乙醇 40 m l,加热回流 1 h,过滤 ,滤液置
100m l量瓶中 ,用少量 75%乙醇分次洗涤容器和残
渣 ,洗液滤入同一量瓶中 ,加 75%乙醇至刻线 ,摇
匀;精密量取溶液 1 m l于 10m l量瓶中 , 30%甲醇稀
释至刻线 ,摇匀 ,过 0.45 μm滤膜 ,取续滤液作为供
试品溶液 。
2.3　线性关系考察　以不同质量浓度的黄芩苷
(7.125 ～ 142.5 μg /m l)、汉黄芩苷 (2.375 ～ 47.5
μg /m l)、黄芩素(0.22 ～ 17.6 μg /m l)、汉黄芩(0.16
～ 3.2 μg /m l)、千层纸素 A(0.1675 ～ 2.25 μg /m l)
混合标准溶液各 20 μl分别进样 ,依上述方法测定
其峰面积 。以相应组分峰面积 Y对其质量浓度 X
(μg /m l)进行线性回归 ,计算回归方程如下:Y =
1.021×105X - 8.419 ×104 , r=0.9999(黄芩苷 );Y
=8.314 ×104X - 2.359 ×104 , r=0.9999(汉黄芩
苷);Y=1.377×105X - 1.779×104 , r=0.9994(黄
芩素 );Y =2.157×105X - 1.820 ×104 , r=0.9999
(汉黄芩素 );Y =1.831 ×105X - 2.048 ×104 , r =
0.9999(千层纸素 A)。
2.4　精密度试验　取对照品溶液 ,进样 20 μl,重
复 5次 ,根据测得数据计算各组分峰面积的相对标
准偏差为 0.45% ～ 0.89%;取同一药材样品 5份 ,
按照 “1.3”项下方法制备样品溶液 ,测定各组分含
量 ,其相对标准偏差为 1.26% ～ 2.43%。
2.5　回收率试验　同一药材样品 6份 ,分别精密
加入不同体积的各对照品储备液 ,依法测定 ,测得回
收率如表 1所示。
　表 1 　回收率测定结果
化合物 平均回收率 (%) RSD(%)
黄芩苷 103 1.65
汉黄芩苷 103 1.95
黄芩素 99. 0 3.52
汉黄芩素 101 1.71
千层纸素 A 105 1.95
图 1　对照品(A)与 15号样品(B)的色谱图
1.黄芩苷　2.汉黄芩苷　3.黄芩素　 4.汉黄芩素　5.千
层纸素 A
2.6　样品分析　在选定的色谱条件下 ,以外标法
分别测定了 4种黄芩药材共 16份样品的五个活性
成分 ,结果见表 2。对照品及 15号样品的色谱图见
图 1。根据得到的结果 ,正品黄芩中北京 、山东 、甘
肃的黄芩苷含量较高 ,非正品黄芩中滇黄芩的黄芩
苷含量较高 ,滇黄芩中汉黄芩苷与汉黄芩素的含量
390 中药材第 28卷第 5期 2005年 5月
　表 2 　样品测定结果
编号 产地 品种 黄芩苷(%) 汉黄芩苷(%)黄芩素(%) 汉黄芩素(%)千层纸素 A
1 北京 黄芩 15. 1 5. 06 0. 320 0.157 0. 067
2 山西 黄芩 12. 9 3. 62 2. 74 0.451 0. 298
3 山西 黄芩 11. 2 3. 74 3. 42 0.833 0. 348
4 安徽 黄芩 10. 3 3. 47 2. 12 0.578 0. 197
5 山东 黄芩 15. 8 4. 89 1. 33 0.519 0. 120
6 甘肃 黄芩 13. 7 4. 60 0. 125 0.132 0. 030
7 山东临沂 黄芩 16. 5 4. 95 0. 554 0.193 0. 069
8 内蒙 黄芩 11. 7 4. 08 0. 853 0.245 0. 174
9 甘肃 黄芩 16. 4 4. 60 1. 07 0.230 0. 123
10 内蒙 粘毛黄芩 7. 76 3. 01 1. 02 0.322 0. 266
11 内蒙 粘毛黄芩 7. 41 2. 53 0. 318 0.184 0. 111
12 内蒙 粘毛黄芩 10. 1 3. 97 0. 237 0.098 0. 075
13 云南 滇黄芩 12. 1 0. 947 0. 446 0 0. 197
14 云南 滇黄芩 16. 0 0. 436 0. 451 0 0. 114
15 甘肃 甘肃黄芩 10. 5 3. 02 0. 245 0.051 0. 064
16 甘肃武都 甘肃黄芩 9. 87 3. 16 0. 374 0.116 0. 113
明显偏低;各样品的黄芩素 、汉黄芩素含量差异很
大 。从整体上看这五个成分的含量 ,滇黄芩与正品
黄芩的差别较明显 ,而粘毛黄芩 、甘肃黄芩与正品黄
芩的差别较小 。
参 考 文 献
1　宋万志 . 药用黄芩的资源研究 . 药学学报 , 1981, 16
(2)∶139
2　郑占虎 ,等 .中药现代研究 .北京:学苑出版社 , 1998∶
3943
3　 Tsuyoshi Tom im ori, e t al. S tudies on the Constituen ts of
Scutellaria Spec ie s. Ⅵ . Yakugaku Zasshi, 1985, 105
(2)∶148
4　Yoshio Tak ino, e t a l. De term ination of Some F lavono ids in
Scute llariae Radix by H igh-Pe rfo rm ance L iquid Ch rom a tog-
raphy. Chem. Pharm Bull, 1987, 35(8)∶3494
5　Kazuh iko Sagara, e t a l. Sim ultaneous De term ination o f Ba-
ica lein, W ogonin, O roxy lin-A, and Their G lucu ronides in
Scute llariae Radix by Ion-Pair H igh-Perfo rmance L iquid
Chrom a tog raphy. Journa l of Pha rma tog raphy, 1985, 328∶
289
(2004 - 11 -29收稿)
HPLC-ELSD法测定不同产地女贞子
中齐墩果酸与熊果酸的含量
李　涛　郝武常　徐长根　马鹏飞
(陕西省药品检验所 ,陕西西安 710061)
　　摘要　采用 HPLC-ELSD法 ,色谱柱:L ichro spher C18柱(4. 6 mm ×250 mm , 5 μm);流动相:甲醇-0.5%醋酸铵溶
液(90∶10);A lltech ELSD 2000(蒸发光散射检测器 )。结果:在此色谱条件下 , 齐墩果酸与熊果酸峰完全达到基线
分离(R>1.9)。十批不同产地女贞子中齐墩果酸含量均在 0. 7%以上 , 熊果酸含量均在 0. 1%以上。齐墩果酸含
量测定的线性范围为 0.76 μg～ 11. 4 μg( r=0.9985, n=6),平均加样回收率为 97. 38%, RSD为 1.9%;熊果酸含量
测定的线性范围为 0.118 μg ～ 1. 77 μg( r=0. 9996, n=6), 平均加样回收率为 96. 10%, RSD为 1. 7%。
关键词　女贞子;齐墩果酸;熊果酸;HPLC-ELSD
　　女贞子含女贞子苷 、洋橄榄苦苷 、齐墩果酸 、乙
酰齐墩果酸 、熊果酸 、乙酰熊果酸 、4-羟基-β-苯乙基-
β-D-葡萄糖苷 、桦木醇 、甘露醇 、棕榈酸 、脂肪酸 、苹
果酸等 ,具有滋补肝肾 、明目乌发的功效;药理研究
显示女贞子具有保肝 、抑瘤 、升白 、生血 、抗衰老 、抗
变异 、增强机体免疫功能等作用 ,而其中齐墩果酸与
熊果酸的存在是其具有抗变异活性的主要原因 。
《中国药典》2000年版一部对女贞子中的齐墩果酸
采用薄层色谱法进行定量控制 ,但因女贞子中还含
有熊果酸 ,二者同属三萜酸 ,性质与化学结构较为相
似 , TLC法定量时 ,二者相互干扰 。齐墩果酸与熊果
酸在紫外区同属末端吸收 ,采用 HPLC-UV法测定
效果不太理想。本文首次采用 ELSD(蒸发光散射
检测器),用高效液相色谱法对二成分进行同时测
定 ,并进行了方法学考察 ,获得了满意的结果 。
1　仪器与试剂 、试药
W aters A llianceHT型高效液相色谱仪 , A lltech
ELSD 2000型蒸发光散射检测器 。甲醇 (色谱纯 ,
Ted ia公司 ,美国 ),水 (超纯水 ),醋酸铵(分析纯 ,西
安化学试剂厂生产 )。齐墩果酸与熊果酸对照品均
391 中药材第 28卷第 5期 2005年 5月