全 文 ：心泰平片中小檗碱含量的 HPLC法测定
杜智敏 1 ,张一飞 1 ,刘　影 2 ,杨宝峰 2
( 1. 哈尔滨医科大学附属第二医院临床药物研究所 ,黑龙江 哈尔滨　 150086; 2. 哈尔滨医科大学 药理教研室 ,黑龙江 哈尔
滨　 150086)
　　心泰平片是本室自行研制的纯中药制剂 ,具有
抗心律失常作用 ,对室性早搏有较好的治疗作用 ,对
冠心病有一定的预防和治疗作用。本品由黄连、珍珠
母、甘草等原料经现代提取工艺制成。黄连在此处方
中为君药 ,其主要有效成分属小檗碱化合物。具有抗
心律失常、调血脂、抗动脉粥样硬化等方面的药理活
性 [1, 2 ]。 本实验建立了 HPLC法测定心泰平片中小
檗碱含量的方法 ,可用于心泰平片及其植物原料的
质量控制。
1　仪器与试药
Shimadzu LC-9A高效液相色谱仪 , SPD-6AV
检测器 , SIL-6B自动进样器 , C-R4A数据处理机。
水为去离子重蒸水 ,乙腈为色谱纯 ,其余试剂均
为分析纯 ,小檗碱对照品 ( 713-8702)购自中国药品
生物制品检定所 ,心泰平片由本室提供。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件:色谱柱: YWG C1 8柱 ( 250 mm× 4. 6
mm, 10μm);流动相: 0. 02 mo l /L磷酸二氢钾溶液 -
乙腈 ( 70∶ 30,用磷酸调节 pH为 2. 3) ;流速: 1 mL /
min;检测波长: 346 nm。
2. 2　线性关系:精密称取小檗碱对照品 9. 5 mg,溶
于 50 m L容量瓶中 ,用甲醇定容。另取 0. 5 mL上述
溶液置 5 mL容量瓶中 ,甲醇定容 ,得 0. 019 mg /mL
溶液。 取此溶液 12, 10, 8, 6, 4μL分别进样 ,得线性
方程 Y= 1 326 176. 3X - 18 779. 6, r= 0. 999 4。小
檗碱含量在 0. 08～ 0. 23μg线性关系良好。
2. 3　供试品溶液的制备:精密称取本品 0. 5 g ,溶于
100 mL水中 ,超声 10 min,过滤 ,即得。
2. 4　专属性试验: 分别吸取供试品溶液、对照品溶
液各 10μL,按上述色谱条件分别进样测定 ,结果小
檗碱对照品的保留时间为 10. 58 min,供试品溶液
在该保留时间有特征吸收峰。
2. 5　精密度试验: 精密吸取同一对照品溶液 ( 19
μL /mL) 10μL,重复进样 6次 ,以小檗碱峰面积计
算 ,其 RSD= 0. 24%。
2. 6　稳定性试验:取供试品溶液按上述条件分别在
0, 2, 4, 6, 8 h进样 ,峰面积的 RSD为 0. 28% 。结果
表明 ,供试品溶液在 8 h内稳定。
2. 7　重现性试验:取同一批号样品 5份 ,按含量测
定方法测定盐酸小檗碱含量 , RSD为 1. 18% 。结果
表明本方法重复性良好。
2. 8　回收率测定:精称已知含量的样品 ,添加一定
量的小檗碱对照品 ,平行测定 6份 ,平均回收率为
99. 04% , RSD= 1. 21%。
2. 9　样品的测定:取上述心泰平片供试品溶液 ,进
样 10μL,在上述色谱条件下采用标准曲线法测定
小檗碱含量 ,结果见表 1。
表 1　心泰平片中小檗碱的含量 ( n= 3)
Table 1　 Content of berberine in Xintaiping Tablet (n= 3)
批号 小檗碱含量 /( mg· g- 1 ) R SD /%
1 0. 15 1. 05
2 0. 13 0. 98
3 0. 16 1. 14
4 0. 17 1. 45
5 0. 21 1. 40
3　讨论
3. 1　采用 HPLC法测定小檗碱含量的报道较多 ,
但所选择的流动相不同 [3～ 5 ]。 本实验流动相选择
0. 02 mol /L磷酸二氢钾溶液-乙腈 ,但比例有所调
整 ,因 60∶ 40分离度不理想 ,后改为 70∶ 30,制剂
中其他成分不产生干扰 ,与杂质峰得到良好分离。
3. 2　本法测定心泰平片中小檗碱的含量 ,快速稳
定 ,重现性好 ,可用于中药制剂质量控制。
References:
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[3 ]　 Wang D M, Li X N, Chen W L, et al . Determination of
berberine in Huanglian Sh ang qing Tablet by HPLC [ J ]. Chin
·714· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 8期 2003年 8月
收稿日期: 2002-10-15作者简介:杜智敏 ,女 ,教授 ,硕士导师。 Tel: ( 0451) 86605353　 E-mai l: dzm@ pharm-h rbmush. com
* 通讯作者
Trad it Pa t Med (中成药 ) , 1995, 17( 2): 16-17.
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HPLC [ J ]. Chin Tra di t Pat Med (中成药 ) , 1994, 16(4) : 18.
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of An tido tic and An tipy retic Oral Liquid [ J]. Ch in Tra dit Pat
Med (中成药 ) , 1997, 19( 1): 1-13.
天然澄清剂在乐脉口服液澄清工艺中的应用
龚　涛 1 ,郭　涛 2 ,陶云平 1* ,刘三康 1 ,向　军 1* *
( 1. 四川大学华西药学院 ,四川 成都　 610041; 2. 梓潼宫药业有限公司 ,四川 内江　 641006)
　　乐脉口服液处方来源于《中华人民共和国药典》
2000年版一部的乐脉颗粒 ,由丹参、赤芍等 7味中
药组成 ,具有活血行气、化瘀通脉之功效 ,主治冠心
病、心绞痛等症 [ 1]。口服液制备常用水提醇沉法 ,需
耗费大量的乙醇 ,成本较高 ,且中药复方的多种有效
成分性质各异 ,醇沉常常损失较多 ,影响制剂的临床
疗效。 为了在纯化过程中尽量保留浸出液中的有效
成分 ,本实验采用新型天然澄清剂代替醇沉处理乐
脉口服液。通过对有效成分的 T LC检识和芍药苷、
丹参素的含量测定 ,证明天然澄清剂能较好地除去
杂质 ,达到澄清药液的目的。
1　材料与仪器
丹参为唇形科植物 Salv ia milt iorrhiza Bge.的
干燥根及根茎 ,赤芍为毛茛科植物川赤芍 Paeonia
veitchii Lynch的干燥根 ,川芎为伞形科植物川芎
Ligusticum chuanx iong Hort.的干燥根茎 ,红花为
菊科植物红花 Carthamus tinctorius L.的干燥花 ,香
附为莎草科植物莎草 Cyperus rotundus L.的干燥根
茎 ,木香为菊科植物 Auck landia lappa Decne.的干
燥根 ,山楂为蔷薇科植物山里红 Crataegus pinnat i-
f ida Bge. va r. major N. E. Br.的干燥成熟果实。
均购自成都市中药材公司 ,经华西医科大学制药厂
质检科傅文峰鉴定 , ZTC1+ 1天然澄清剂Ⅱ及预处
理剂 B(天津正天成澄清技术有限公司 )。
LC-6A高效液相色谱仪 , SPD-6AV紫外检测
器 (日本岛津 ) , C-R4A数据处理机 ;芍药苷、原儿茶
醛 (中国药品生物制品检定所 ) ,丹参素钠 (上海医科
大学药学院 ,纯度为 98%以上 ) ;所用试剂均为分析
纯 ;硅胶 G为青岛海洋化工厂出品。
2　方法和结果
2. 1　原溶液的制备:按药典处方称取 7味药材共 1
kg ,加水煎煮 3次 ,每次 1 h,滤过 ,合并滤液 ,减压
浓缩至 2 000 mL,备用。
2. 2　天然澄清剂溶液的配制:按产品使用说明 ,将
ZTC1+ 1天然澄清剂Ⅱ A组分 ,加水配成 1%溶液 ;
B组分加 1%醋酸溶液配成 1%溶液 ,备用。
2. 3　纯化方法
2. 3. 1　醇沉法:取原溶液 ,搅拌下加乙醇至含醇量
达 50% ,静置过夜 ,滤过 ,减压回收乙醇 ,浓缩液加
水至处理前体积。
2. 3. 2　澄清剂法:取原溶液 ,按 0. 4%加入预处理
剂 B, 50℃保温 4 h后 ,煮沸 15 min灭酶 ,降温至 80
℃左右 ,按 8%加入 ZTC1+ 1天然澄清剂 B组份 ,
混匀 ,再降温至 60℃左右 ,按 4%加入 A组份 ,混
匀 ,静置过夜 ,滤过。 滤液调整至处理前体积。
2. 4　定性比较
2. 4. 1　点样液的制备:分别取上述两种方法制备的
口服液各 30 mL,置分液漏斗中 ,加乙醚 40 mL,振
摇 3 min,静置分层 ,取乙醚层 ,用水 40 mL分两次
洗涤 ,取乙醚层加无水硫酸钠约 2 g ,振摇 ,滤过 ,挥
干 ,残渣用乙醚 1 mL溶解 ,作为供试品溶液。 另取
原儿茶醛对照品 ,加乙醇制成 0. 5 mg /mL的溶液 ,
作为对照品溶液 ;取川芎对照药材粉末 1 g ,加乙醚
30 mL,超声提取 5 min,滤过 ,滤液挥干 ,残渣加乙
醚 1 mL溶解 ,作为川芎对照药材溶液 ;取木香对照
药材粉末 1 g ,加乙醚 10 mL,超声提取 5 min,滤过 ,
滤液作为木香对照药材溶液。
2. 4. 2　丹参的定性比较:吸取上述两种供试品和原
儿茶醛溶液各 5μL,分别点于同一用 0. 5% CMC-
Na制成的硅胶 G板上 ,以氯仿 -丙酮 -甲酸 ( 8∶ 1∶
1 )为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,先置氨气中熏 5
min,再置碘蒸气中放置到薄层板变成黄色。色谱图
·715·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 8期 2003年 8月
收稿日期: 2002-11-20作者简介:龚　涛 ,男 ,工程师 ,现为四川大学华西药学院在读博士生 ,主要从事药物新制剂的研究。
* 现在科创制药公司工作　* * 现在华西医科大学制药厂工作