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Assay of Estradiol and Testosterone in Pilose Antler

中药鹿茸性激素的含量测定



全 文 :4结论
4
.
1 用超 临界 C O: 从黄 花篙 草萃 取青 篙
素 , 其质量传递是受植物细胞 的内部扩散控
制的 。 因此 , 对黄花篙草必须进行粉碎或预浸
泡 。
4
.
2 萃取操作条件对青篙素收率有很大影
响 ,在一定萃取温度下 , 提高萃取压力 , 收率
提高 。 同样 ,在一定萃取压力下 , 提高萃取温
度 ,青篙素收率亦提高 。 即改变萃取压力 、 温
度可 以得到较高的收率 , 但有个极 限值 。 本研
究在最佳萃取工艺条件下 , 青篙 素收率大于
9 5%

4
.
3 超临界 C O : 对青篙素具有 良好 的溶解
性 ,萃取周期短 。 通过改变超临界 C O : 萃取
工艺条件 , 可提高青篙素的溶解选择性 ,使提
纯精制 青篙素简单 、 容易 , 青 篙素产 品纯度
高 、 质量好 。
参 考 文 献
1 青篙素结构研究协作组 . 科学通报 , 1 97 , 2 : 14 2
2 王京燕 . 中草药 , 19 9 4 , 2 5 ( 3 ) : 1 52
3 王存志 , 等 中草药 , 19 9 6 , 2 7 ( 4 ) : 2 5 3
( 1 9 9 8

1 1

1 6 收稿 )
S t u d i e s o n E x t r a c t i o n o f A r t e m i s i n i n f r o m S w e e t W
o r m w o o d ( A rt e m i s i a a n n u a )
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H e C h u n m a o a n d L i a n g Z h o n g y u n ( R e s e a r e h I n s t i t u t e o f C h e m i e a l P r o e e s s i n g a n d U t il i z a t i o n o f F o r e s t
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,
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.
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中药鹿茸性激素的含量测定
海军总 医院药剂科 (北京 1 0 0 0 3 7) 凌 云 斑 罗方成 关 关 李秋侠 鲍燕燕 张永林
摘 要 用放射免疫法测定 了 中药鹿茸雌二醉和皋酮 的含量 。 结果显示澳鹿茸雌二 醇含量 (l 5 . 3
士 1 · 8 2 ) n g / m L , 梅花鹿茸的含 量为 ( n . 4 士 1 . 2 6) n g / m L 与鹿角镑 (l . 96 士 0 . 2 6) n g /m L 相 比有
极 显著性 差异 (尸 < 0 . 0 1 ) , 鹿茸伪品和鹿 角胶 的雌二醇 含量与鹿 角镑相 比没有显著性差异 (尸 >
0
.
0 5 )
, 提示雌二醇是鹿茸治疗宫冷不孕 的物质基础 ,测定鹿茸中雌二醇的含量可作 为评价鹿茸品
质的依据 ;鹿茸中皋酮的含量低 ,提示肇酮不是鹿茸壮 阳的有效成分 , 进 一步研究鹿茸中促雄激素
样物质 , 必将为鹿茸的壮 阳作用提供依据 。
关键词 鹿茸 雌二醇 辜酮 放射免疫法测 定
鹿茸是著名的壮 阳药 , 为鹿科动物梅花
鹿 eC vr u s n ip on T e m m i n e k 或马 鹿 C . e l*
P h u : L
. 雄鹿未骨化密生茸毛的幼骨 。 具壮肾
阳 、 益精血 、 强筋骨和调冲任 之功 效 , 主治阳
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A d d r e s s
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a r tm e n t o f P h a r m a e y
,
N a v y g e n e r a l H o s p i t a l
,
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, , 海医 校 98 届药学专业
《中草药 》 1 9 9 9 年第 3 0 卷第 7 期 . 4 9 9 .
萎滑精 、 宫冷不孕 、 赢瘦和神疲等 药理实验
表明 , 鹿茸具有对循环 、 神经 、 代谢等 系统有
兴奋作用 ; `」。 从鹿茸分离 出雌二醇闭 ,但未见
其含量测定报道 , 目前鹿茸 亦缺乏特异性 的
品质评价指标 。
激素是具有高度生物活性 的物质 , 在极
低的浓度下就可起作用川 。 其含量一般分析
方法如紫外法 、 毛细管色谱法和高效液相色
谱法难以测定 。 本文利用放射免疫法测定鹿
茸 中雌二醇和皋酮 的含量 , 为鹿茸 的有效成
分和品质评价提供依据 。
1 材料与方法
1
.
1 材料 : 澳鹿茸购 自同仁堂参茸公 司 , 经
鉴定为澳鹿 C e二 “ 、 “ u st ar il ic `m 的未骨化 幼
骨 ; 梅花鹿茸 由吉林敖东延边制药厂生产 , 经
鉴定为梅花鹿 C . n i P o n 的未骨化幼骨 ; 伪鹿
茸 购 于 河 北 安 国 药 市 , 经 鉴 定 为 梅 花 鹿
C
.
in P on 已骨化角 ; 鹿角胶为河 南老君堂制
药有限公司的产 品 ; 鹿角镑购 于白塔寺药店 ,
经鉴定为 .C n i PP o n 梅花鹿的已骨化角 。 所有
试剂均为分析纯 。
雌二醇和皋酮的放射免疫盒 由北京北方
生物技术研究所提供 ,雌二醇抗体与雌三醇 、
辜酮和孕酮均无交叉反应 , 检测范围为 1 0一
10 gP /m L
; 皋酮抗体与雌 一二醇 、 雌三醇和胆
固醇 均无 交叉 反 应 , 检测 范 围为 0 . 5 一 20
n g /m L

1
.
2 方法 : 将样品粉碎过 8 0 目筛 ,精密称取
0
.
5 9
,置 5 0 m L 的烧瓶 中 ,精密加人 3 0 m I J
甲醇 , 回流 l h ,冷却 。 精密吸取上清液 Z m L ,
吹干 ,测定时加含白蛋 白的磷酸缓冲液复溶 。
所有数据以 t 检验进行显著性差异比较 。
2 结果
澳鹿茸 的雌 二 醇 含量 最 高 为 ( 15 . 3 士
1
.
8 2) n g / g
,为鹿胶镑的 8 倍 , 其次梅花鹿茸
含量 为 ( n . 4 士 .1 2 6 ) n g / g , 为 鹿 角镑 的 6
倍 , 两者与鹿角镑相 比有极显著性差别 ( P <
0
.
0 1 )
;伪鹿茸和鹿角胶雌二醇含量较低 , 与
鹿角镑相 比没有 显著性差异 ( P > 0 . 0 5 ) ; 皋
酮的含量低且差别不大 ,样 品之间没有显著
.
5 0 0
.
性差别 。 结果见表 1
表 1 鹿茸中雌二醇和寨酮 的含量 、 n g堆 生药 )
样 品
澳鹿茸
梅花鹿
伪鹿 茸
鹿 角胶
鹿角镑
雌二二醇
1 5
.
3士 1 . 8 2 普
l ]
.
4士 1 . 26 茶
1
.
73土 0 . 28 ’ “
2
.
14士 0 . 3 1 祖 “
1
.
9士 O ` 2 6
辜丸酮
0
,
4 4 土 0 . 1 0
0
.
2 3士 0 . ( ) 8
0
.
6 6士 0 . 0 2
0
.
1飞士 0 . 0 5
0
.
2 4土 0 . 0 6
与鹿角镑相 比 二 尸< 。 . 01 ’ ` P > 0 . 05
3 讨论
临床上雌二醇用于治疗绝经期综合征 ,
卵巢功能不全和 闭经症闭 。 本文测定鹿茸的
雌二 醇 达 到 了 n g 水 平 , 在 澳 鹿 茸 中达 到
1 5 3 n g / g 水 平 , 说明 了雌 二醉为鹿茸 雌激
素的主要活性成分 , 也为鹿茸治疗宫冷不孕
提供了科学依据 。 提示鹿茸作为妇女绝经期
雌激素的替代疗法 , 副作用小 , 可长期使用 。
鹿茸 中翠酮的含量不高 , 翠酮在体内 n g
水平才起生物活性 ,提示皋酮不是 鹿茸 壮阳
的有效成分侧 。 进 一步研究鹿茸 中促雄激素
样物质 , 必将为鹿茸的壮阳作用提供依据 。
结果表明正品鹿茸 中雌 二醇含量高 , 与
鹿角镑相 比差异明显 , 伪鹿茸 为作者从安国
药市购得 ,虽然大小与真品一样 , 但没有密生
茸毛 , 经鉴定为鹿角 ,含量测定表明其雌二醇
含量亦明显低于真品 。 推断测定鹿茸 中雌二
醇的含量高低为评价鹿茸品质的依据 。
放射免疫测定法为测定生物体内微量物
质的一种分析方 法 , 具有 高度特异 性 、 灵敏
性 , 使得那些 曾认为是无 法分析的极微量而
又具有重要 生物学意义 的物 质得 以 精确定
量 , 在临床此法广泛用于疾病的诊断6[] 。 目前
中药材中微量活性物质用一般分析方法难以
测定 , 本文为测定 中药材含的微量活性成分
提供一个依据 。
参 考 文 献
1 阴 健 ,等 . 中药现代研究与 临床应 用 ( 1 _ 北京 : 学苑
出版社 , 1 9 9 3 : 60 7
2 毛凤之 ,等 . 中成药研究 , 1 98 3 , 12 : 2 8
3 陈次青主编 . 生 理学 . 北京 : 人 民卫生 出版杜 , 19 91 :
2 9 9
4 江 明性主编 . 药理 学 . 第三 版 北京 : 人 民卫生出版
社 , 1 9 9 5 : 2 7 2
高云瑞 ,等 . 中药药理与临床 , 1 9 90 , 6( 2) : 23
伊伯元 . 放射免疫分析在医学 中应用 . 北京 : 人 民卫生
出版社 , 1 9 9 1 : 3 1 0
( 1 9 9 8
一 0 6
一 0 1 收稿 )
A s s a y o f E s t r a d i o l a n d T e s t o s t e r o n e i n P i l o s e A n t l e r
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A b s t r a e t T h e C h in e s e t r a d i t io n a l d r u g
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·
T h e e o n t e n t s o f e x t r a d i o l a n d t e s t o s t e r o n e i n p i lo s e a n t le r w e r e d e t e r m in e d b y r a d io m m u n o a s s a y
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0 1 ) a s e o m p a r e d w i t h o s s i fi e d a n t le r ( 1
.
9 0士 0 . 26 ) n g / 9 .
T h e e o u n t e r f e i t p i lo s e a n t le r a n d a n t l e r g l u e e o n t a i n e d lo w le v e ls o f e s t r a d i o l
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c r u d e d r u g s m e n t io n e d a b o v e
.
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e r u d e d r u g
.
K e w wo
r d s P i lo s e a n t le r e s t r a d io l t e s t o s t e r o n e r a d i o im m u n o a s s a y
H P L C 法测定石刁柏中的蜀葵氨酸含里
中国林业科学院森林环境与保护研究所 (北京 1 0 0 0 91) 刘惠文 . 韩振秦
摘 要` 采用 Z or b a xr x 一 lC 。色谱柱 , 以 0 . 05 m ol /L 醋酸钠一甲醇 (8 O : 20) 为流 动相 ,邻苯二甲醛 一 2
琉基 乙醇做柱后衍生剂 , 利用荧光检测器 的高效液相 色谱法对石 刁柏中的蜀 葵氛酸进行了直接分
离分析 , 方法简便 、 快速 、 重现性好 , 回收率为 96 . 4 % 。
关镇词 H P L C 蜀葵氨酸 石 刁 柏 柱后衍生
存在于棉花 、 置草 、 百合等植物体内的蜀
葵 氨酸 a( lht ie n e) 在 中草药物 中所发 挥的药
学作用早 已被人们所重视 , 这种成分 在医疗
上具有很显著的止 咳平喘功效 。 石刁 柏 A *
P a ar g u : 刃关` in a l t’s 俗 称 “ 芦笋 ” 、 “ 龙须 菜 ” ,
属多年生宿根草本的百合科植物 ,实验证 明 ,
该植物体 内含有较 为丰富的蜀葵氨酸成分 。
笔者采用 R P 一 H P L C 法 ,邻 苯二 甲醛 一 2 琉基
乙醇柱后衍生 , 成功地进行 了对石刁 柏 中蜀
葵 氨 酸 的 分 离 与 检 测 , 得 到 回 收 率 为
9 6
.
4 %
, 标准偏差为 0 . 0 0 4 2% 的良好结果 。
1 仪器与试剂
仪器 : 美 国 W at er s 公 司 高效 液相 色谱
仪 : 包 括 M 一 5 10 高 压泵 , M 一 7 1 0 B 自动 进样
器 , M 一 47 0 荧光检测器 , M 一 7 30 数据处理机 ,
柱温控制系统 。
试剂 : 甲醇 、 无水醋酸钠 、 硼酸 、 氢氧化钾
为分析纯 ; 邻苯二 甲醛 、 2一琉 基乙 醉 、 蜀葵氨
酸标准品为优级纯 ; 水为重蒸水并经过 0 . 45
拜m 滤膜过滤 。
A d d r e s s
:
L iu H u iwe
n , I n s t i t u t e o f F o r e s t E n v
刘惠文 女 , 1 9 8 0 年毕业于 清华大学化学工程系事仪器化学和分析化学研究与试 验工作 。 19 9 4 年 以编 委出版专著《现代实用 仪器分析方法 》 , 先后在 《分析化学 》 、 《色甭》 、《中草药 》 、 《氛基酸与生物资源 》等杂志上发表论文 14 篇 。
示石最蚕下两丽百落乃万再丽万1丽 · 5 0 1 ·