全 文 ：℃。 [α]20D = - 4. 5°( c, 0. 5, CHCl3 )。 EIM S m /z(% ):
412( M
+ , 46) , 397( 13) , 369( 17) , 351( 6) , 273( 23) ,
271 ( 76) , 255 ( 56) , 229 ( 22) , 81( 84) , 55( 100) , 43
( 84)。 IR( KBr) cm- 1: 3 450, 2 958, 2 867, 1 638,
1 458, 1 382, 1 156, 1 098, 1 040, 971, 939, 846,
830。1 HNMR( 300 MHz, CDCl3 )δ: 0. 55, 0. 80, 0. 82,
0. 84, 0. 86, 1. 03, 1. 14, 1. 23, 1. 29, 1. 34, 1. 39,
1. 50, 1. 53, 1. 59, 1. 99, 2. 01, 3. 59, 5. 00, 5. 10,
5. 20。13 CNMR( 100 MHz, CDCl3 )数据见表 2。
化合物Ⅱ : 白色针晶 (甲醇 ) , mp 146℃～ 148
℃。 [α]20D = - 2. 2°( c, 0. 5, CHCl3 )。 EIM S m /z(% ):
414 ( M
+
, 46) , 399 ( 10) , 353 ( 17) , 273 ( 10) , 255
( 100) , 231( 18) , 229( 22) , 81( 56) , 55( 84) , 43( 76)。
IR( KBr ) cm- 1: 3 450, 2 958, 2 867, 1 638, 1 458,
1 382, 1 156, 1 098, 1 040, 939, 846, 830。1 HNMR
( 300 MHz, CDCl3 )δ: 0. 53, 0. 80, 0. 82, 0. 84, 0. 86,
1. 03, 1. 14, 1. 20, 1. 29, 1. 34, 1. 39, 1. 50, 1. 53,
1. 59, 1. 99, 2. 01, 3. 55, 5. 00。13 CNMR ( 100 MHz,
CDCl3 )数据见表 2。
致谢: 质谱由本所于殿成老师测定 ,红外光谱、
核磁共振谱等均在沈阳药科大学测试中心测定。
参考文献:
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( 2): 195-200.
中国粗榧果实和枝叶中三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱分离方法的研究
何洪源
(中国人民公安大学 ,北京　 100038)
中图分类号: R284. 1　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 03 0201 02
　　三尖杉生物碱 (cephalotaxine)具有显著的抗癌
作用 ,由于它的使用价值和经济价值 ,近年来国内外
都在争相开发 ,已从三尖杉属植物中提取分离出了
三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱供临床应用。 但由于三
尖杉植物资源有限 ,其中有抗癌活性的酯类生物碱
的含量又极低 ,所以远不能满足临床需要。
目前 ,我国主要是用海南粗榧 Cephalotaxus
hainanensis Li. 或中国粗榧 C . sinensis Li. 和三尖
杉 C . fortunei这几种树为原料 ,从中提取有效成分
供临床使用。由于树木的大量采伐 ,导致树种濒临枯
危 ,而且严重破坏生态平衡。考虑保护生态平衡 ,开
发一种新药源 ,我们对中国粗榧的果实和枝叶进行
了开发研究 ,从中提取出药用有效成分三尖杉总生
物碱 ,分离出三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱。 按生药
计 ,三尖杉酯碱得率为 0. 09%左右 ,高三尖杉酯碱
得率为 0. 03% 。在研究过程中发现生物碱的分布非
常奇妙 ,即果实中三尖杉酯碱的分布绝对的多 ,大于
0. 15% ,而根、茎、叶中高三尖杉酯碱的分布绝对的
多 ,大于 0. 06% ,这样就利于较好的分离两个难分
离的同系物 ,即三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱。使用本
方法可以容易得到高纯度的产品 ,经高压液相检测 ,
纯度可达 97%以上。
·201·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 3期
收稿日期: 2000-03-21
1　中国粗榧的枝叶中三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱
的分离和提取
1. 1　试验材料:中国粗榧的干燥枝叶 ,粉碎。试剂:
乙醇、氯仿、乙醚均为化学纯 ,柠檬酸、磷酸氢二钠。
标准品购于中国药品生物制品检定所。
1. 2　实验方法
1. 2. 1　回流提取: 将粉碎枝叶用 90%乙醇浸没 ,加
热回流提取 3次 ,提取液合并置浓缩器中 ,减压浓缩
回收乙醇至流浸膏。
1. 2. 2　梯度萃取 [1 ]: 将流浸膏用 5%醋酸溶解 ,浓
氨水调节 pH值。用氯仿在 pH= 3, 6, 9时梯度萃取。
pH= 3, 9的萃取物为杂质 ,另浓缩 ; p H= 6的氯仿
萃取液减压浓缩至膏 ,为所要总生物碱。
1. 2. 3　逆流分布法分离三尖杉酯碱和高三尖杉酯
碱:用柠檬酸和磷酸氢二钠配制 pH= 4左右的缓冲
液为固定相 ,流动相为氯仿 ,二相互相饱和。用流动
相把 pH= 6获得的样品溶解 ,放在分离器中进行逆
流分布。用薄层跟踪检查各分离器的上、下层溶液 ,
至获得三尖杉酯碱或高三尖杉酯碱的单一成分的粗
制品时分别收集 ,待精制。
1. 2. 4　精制——吸附柱层析法 [2 ]:用 Al2O3作吸附
剂 ,将三尖杉酯碱 (或高三尖杉酯碱 )抽松后的粗品
用适量二氯甲烷溶解上柱 ,用乙醚洗脱 ,等量收集流
出液 ,流出液用薄层检查 ,所得三尖杉酯碱 (或高三
尖杉酯碱 )即为纯品。
1. 2. 5　薄层层析检测: 硅胶 G加 1% NaOH,湿法
制板 ,晾干过夜。展开剂:乙醚 -丙酮 ( 2∶ 1)。显色剂:
改良碘化铋钾试液 ,呈红色棕色。结果见图 1。经质
谱和红外光谱鉴定 ,所分离样品与标准品一致。
1, 2-标准品　 3-中国粗榧枝叶
a-三尖杉酯碱　 b-羟基粗榧碱
c-高三尖杉酯碱　 d-异三尖杉
酯碱　 e-桥氧粗榧碱　 f-三尖
杉碱
图 1　提取液 TLC图谱
2　中国粗榧的果实中三
尖杉酯碱和高三尖杉酯碱
的分离和提取
2. 1　生药处理:将果实脱
去果肉、果壳 ,取果仁榨去
油 ,残渣用石油醚脱去残
存油脂 ,挥发去溶剂 ,得果
仁脱脂粉末。
2. 2　提取总生物碱 [3 ]: 用
95%乙醇冷浸果仁粉末 ,
渗滤至渗漉液无生物碱沉
淀反应 ,渗漉液减压浓缩
回收乙醇至流浸膏。
2. 3　 梯 度 萃 取: 同
1. 2. 2。
2. 4　逆流分布法分离三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱:
同 1. 2. 3。
2. 5　精制—— 吸附柱层析法:同 1. 2. 4。
2. 6　薄层层析检测:同 1. 2. 5。
三尖杉酯碱和高三尖酯碱的质谱图和红外光谱
图与标准品相同 ,此处不再重复。
致谢:实验所用中国粗榧系西北大学杨教授鉴
定 ,从秦岭采集。
参考文献:
[ 1 ]　北京医学院 . 中草药成分化学 [M ]. 北京: 中国科学出版社 ,
1985.
[ 2]　马广恩 ,陆春娥 ,范广进 .三尖杉种子中三尖杉酯碱和其它生
物碱的分离及鉴定 [ J ]. 药学通报 , 1982, 17( 4): 205-207.
[ 3 ]　沙世炎 ,徐礼 .中草药有效成分分析 [M ] . 北京:人民卫生
出版社 , 1981.
敬　告　读　者
　　《中草药》杂志编辑部尚存部分过刊合订本 ,包括: 1974～ 1976年 , 1978年 , 1979年 , 1985年 , 1986年 , 1988～ 1990年 ,
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刊 ( 45元 ); 1998年增刊 ( 55元 ); 1999年增刊 ( 70元 ); 2000年增刊 ( 70元 )。 欢迎来函来电订购 ,电话: ( 022) 27474913;
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