全 文 ：R1峰与相邻峰分离度分别为 1. 60和 2. 0,且阴性样
品在相同位置没有干扰。
1-三七皂苷 R1 , 2-样品 , 3-阴性对照
图 1　样品的 HPLC图
2. 3　线性关系: 分别精密吸取对照组品溶液 20,
40, 60, 80, 100, 120, 140μL置 1 mL容量瓶中 ,甲醇
稀释至刻度。 分别注入 10μL,按上述色谱条件测
定 ,以峰面积为纵坐标 ,标准品量为横坐标 ,绘制标
准曲线 ,求得回归方程 Y= 302 387 X+ 1 867, r=
0. 999 4,线性范围 0. 516～ 3. 612μg。
2. 4　样品测定: 精密吸取供试品溶液 10μL,按上
述色谱条件测定 ,用外标法计算金森脑泰粉针剂中
三七皂苷 R1含量 ,结果见表 1。
表 1　金森脑泰粉针剂中三七皂苷 R1含量
批号 毫克 /支 R SD% (n= 5)
970901 3. 50 1. 75
970910 2. 84 1. 37
970920 2. 68 1. 04
2. 5　仪器精密度和样品稳定性、重复性试验: 在相
同色谱条件下 ,精密吸取三七皂苷 R1标准品溶液
10μL,重复 6次 ,测定标准品溶液峰面积积分值 ,
RSD= 0. 66% 。取同一供试品溶液 10μL,每隔 40
min进样 ,测定 6次 ,RSD= 0. 99% ,表明样品在 4 h
内稳定。取同一批样品测定 5次 ,三七皂苷 R1含量
为 3. 50毫克 /支 , RSD= 1. 75% 。
2. 6　回收率测定 ,精密称取已知三七皂苷 R1含量
的金森脑泰粉针剂若干份 ,分别加入一定量的三七
皂苷 R1对照品 ,按样品溶液制备和测定方法项下操
作测定 ,结果平均回收率 97. 00% , RSD= 1. 60% 。
3　讨论
3. 1　流动相的选择: 实验结果表明 ,甲醇 -水 ( 55∶
45)分离最为理想。
3. 2　三七皂苷一般提取方法为 0. 1 mol /L氢氧化
钠或水饱和正丁醇提取 ,实验中我们发现氢氧化钠
饱和正丁醇提取其残留物呈碱性 ,会影响色谱柱的
寿命 ;水饱和正丁醇提取时 ,振摇后有乳化现象 ,不
易分层。 为此 ,我们改用氨试液饱和正丁醇提取 ,由
于氨容易挥发 ,这样既延长了色谱柱的使用寿命又
避免了振摇时产生的乳化现象。
湿疹喷雾剂提取工艺的研究
何　群 ,郭国华 ,郭　昱 ,赵碧清 ,陈文谊
(湖南中医学院 ,湖南 长沙　 410004)
摘　要: 目的　为确定湿疹喷雾剂的最佳提取工艺条件。 方法　建立了丹皮酚、黄芩苷的定量方法并用于评价工
艺 ,采用正交实验设计优选该制剂的最佳提取方案。结果　用 80%乙醇回流提取两次 ;加醇量分别为药材量的 10,
8倍 ;回流时间分别为 1. 5, 1. 0 h;回流水浴温度控制在 ( 90± 2)℃左右。结论　按此条件操作 ,提取效率最高 ,提取
工艺最为合理。
关键词: 湿疹喷雾剂 ;提取工艺 ;正交实验设计 ;丹皮酚 ;黄芩苷
中图分类号: TQ461　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 06 0503 04
·503·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 6期
收稿日期: 2000-08-23作者简介:何　群 ( 1958-)女 ,湖南长沙人。 1982年毕业于沈阳药科大学药学系药学专业 ,理学士学位。 1987年调入湖南中医学院药剂教研室任教 , 1988年定级为药剂学讲师 ; 1998年晋为药剂学副教授。长期以来主要从事药物制剂工艺、质量、剂型与疗效方面的研究。曾主持湖南省中医管理局计划科研课题 1项 (待鉴定 ) ;参与湖南省教委计划科研课题 1项 (在研 )。发表学术论文共 18篇 ,其中第一作者 14篇 (国家级 12篇 ,省级 2篇 ) ;出版著作 1部 (“不要乱吃药”共 50万字 ;第一主编 )。 Tel: 5686164( O)　
5381365( H)
* 本院药学系 94级实习生
Studies on extraction process for preparation of ECZEMA SPRAY
HE Qun, GUO Guo-hua , GUO Yu, ZHAO Bi-qing , CHEN Wen-yi
　　 ( Hunan Co lleg e of TCM , Chang sha Hunan 410004, China)
Abstract: Object　 To optimize the pro cess fo r the ex traction of the o riginal recipe used in the treat-
ment of eczema to giv e a new ECZEMA SPRAY dosage form.Methods　 The ex traction process was stud-
ied by o rthogonal experimental design as guided by determining the content of paeonol and baicalin in the
ex t ract. Results　 The optimal ex traction process w as to ref lux the o riginal recipe wi th 80% ethanol twice
a t a ba th tempera ture of about 90℃ for 1. 5 and 1. 0 h respectiv ely. The amount of ethanol used fo r each
ex t raction w as 10 and 8 times of the o riginal recipe respectiv ely. Conclusion　 The above ex t raction process
g ave the most rational and satisfacto ry results.
Key words: ECZEMA SPRAY; ex t raction process; o rthogonal experimental design; paeonol; baicalin
　　湿疹喷雾剂由汤剂改剂型制得 ,处方来源于湖
南中医学院著名皮肤专家欧阳恒教授几十年治疗慢
性湿疹的外用经验方。原方由徐长卿、黄柏、苦参、黄
芩等 8味中药组成。药效实验证明本制剂具有较好
的抗炎、抗菌、止痒及免疫抑制作用。 临床用于治疗
慢性湿疹疗效显著 ,总有效率达 93. 2% ,痊愈与显
效率达 66. 0%。 原方一般是制成汤剂趁热外洗 (洗
浴 ) ,需临时煎煮 ,极不方便。经剂型研究发现喷雾剂
效果好 ,工艺研究实验中发现本方提取工艺对疗效
影响显著 ,根据方中大多数药材有效成分易溶于乙
醇 ,而且乙醇本身有防腐、易穿透皮肤等特点 ,我们
采用乙醇回流提取工艺 ,并与汤剂制备中采用的水
提取工艺比较药效差异 ,结果醇提工艺优于水提工
艺。在此基础上应用正交设计实验对乙醇提取工艺
条件进行了优选 ,以丹皮酚、黄芩苷为评价指标。
1　仪器、药品与试剂
　　 UV-265FW型紫外分光光度计 (日本岛津 )。
药材购于湖南中医学院中医门诊部 ,经鉴定符
合《中国药典》 1995版一部规定 ,丹皮酚、黄芩苷标
准品由中国药品生物制品检定所提供。石油醚、乙醇
等为分析纯试剂。
2　实验方法与结果
2. 1　湿疹喷雾剂提取方法: 处方中各味药材除冰
片、薄荷脑外 ,其余混合 ,适当碎断 (约 5目 ) ,加入药
用乙醇浸泡 60 min,水浴回流提取两次 ,过滤 ,合并
回流液 ,加入冰片、薄荷脑溶解 ,稀释至规定浓度。
2. 2　丹皮酚含量测定:丹皮酚系方中君药徐长卿的
主要有效成分 ,作为本制剂提取工艺的评价指标之
一 ,尚无规定的含量测定方法。 徐长卿单味药材
1995年版《中药典》一部收载的丹皮酚定量方法是
药材水蒸气蒸馏提取后 ,用紫外分光光度法测定含
量 ,但本制剂处方中其它药材的阴性对照液在紫外
区有吸收 ,不能直接用紫外分光光度法 ,经反复试验
选用一阶导数光谱法测定本制剂中丹皮酚的含量。
实验结果表明 ,用一阶导数光谱中波长 ( 297± 1
nm)和 ( 331± 1 nm )的振幅 (D )作为测定样品中丹
皮酚含量的定量依据 ,可以消除阴性对照液的干扰 ,
样品不经分离可直接测定丹皮酚的含量。 D= △ A /
△λ= ( A296 - A298 ) - ( A330 - A332 ) ,通过绘制标准曲
线可知 ,在 3～ 20μg /mL范围内 , D与 C呈现良好
的线性关系 ,回归方程为 C= 61. 676 2D+ 0. 158 7,
r= 0. 999 9(n= 6) ,加样回收率测定结果回收率为
98. 02% , RSD= 1. 67% (n= 5) ,稳定性实验表明样
品在 45 h内含量分析结果稳定 , RSD= 0. 87%。 通
过比较各种提取丹皮酚的方法 ,选择蒸馏法 ,用正交
设计实验优选该法的最佳分析条件 ,方法为: 精密吸
取湿疹喷雾剂 20 mL, 40℃水浴挥干乙醇 ,加 100
mL蒸馏水 ,移至挥发油提取器中 ,加 3 mL石油醚
提取 1. 0 h,取石油醚层 ,用 0. 4 g无水 Na2 SO4脱
水后加石油醚定容至 25 mL,摇匀 ,测定其一阶导数
光谱 ,得到振幅 D ,根据回归方程计算浓度 C ,再求
得样品中丹皮酚含量。
2. 3　黄芩苷含量测定研究:黄芩苷亦是本制剂中的
主要有效成分 ,作为评价提取工艺的另一指标 ,我们
研究了黄芩苷定量的一阶导数光谱法 ,选择 ( 308±
2 nm)和 ( 332± 2 nm )的振幅 (D )作为测定样品中黄
芩苷含量的定量依据 ,样品不经分离即可消除干扰
组分的影响。 通过制备标准曲线得知 ,线性范围
16～ 80μg /mL,标准曲线的回归方程为 C= 109. 9D
+ 0. 049 75, r= 0. 999 9(n= 5) ,加样回收率测定结
果回收率为 99. 5% , RSD= 1. 10% (n= 5) ,样品在
48 h内含量分析结果稳定。通过研究确定了湿疹喷
雾剂中黄芩苷含量测定方法为:精密吸取湿疹喷雾
剂 25 mL,于 80℃水浴挥干乙醇 ,加 50%乙醇微热
使之溶解 ,放冷后抽滤 ,滤液转移至 100 mL量瓶
中 ,加 50%乙醇至刻度 ,摇匀 ,再精密吸取此液 1. 0
·504· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 6期
m L,置 25 mL量瓶中 ,加 50%乙醇至刻度 ,测定其
一阶导数光谱 ,同法求得样品中黄芩苷的含量。
2. 4　湿疹喷雾剂提取工艺正交实验设计方案及结
果分析:针对上述乙醇回流提取工艺中影响较大的
四个因素:乙醇浓度、加醇量、回流时间、回流水浴温
度进行考察 ,每个因素取 3个水平 ,见表 1,用 L9 ( 34 )
正交表安排实验 ,以丹皮酚、黄芩苷二者一阶导数光
谱振幅 (D)为评价指标 ,见表 2、表 4。
方差分析表明 ,因素的主次为 A> C> D> B,由
表 2, 3可见最佳条件为 A2 B2 C3 D1 ,即分别为 10, 8
倍量 80%的乙醇 , 90℃水浴回流提取两次 ,回流时
间分别为 1. 5, 1. 0 h。在此条件下丹皮酚含量最高。
表 1　湿疹喷雾剂提取工艺因素水平 [1]
水平 A
(醇浓度% )
B
(醇体积 )
C
(回流时间 h)
D
(回流温度 ℃ )
1 95 8; 6 2. 5; 2. 0 90
2 80 10; 8 2. 0; 1. 5 80
3 65 6; 4 1. 5; 1. 0 100
　　注:加醇体积为药材量的倍数 ,回流温度为水浴温度
表 2　以丹皮酚为指标正交设计试验 [2]
试验号 因素 试验结果 (丹皮酚 D值 )
A B C D Y1 Y2 Y3 Y合计
1 1 1 1 1 0. 151 0. 145 0. 148 0. 444
2 1 2 2 2 0. 147 0. 032 0. 036 0. 115
3 1 3 3 3 0. 105 0. 094 0. 102 0. 301
4 2 1 2 3 0. 082 0. 077 0. 078 0. 237
5 2 2 3 1 0. 267 0. 255 0. 257 0. 779
6 2 3 1 2 0. 137 0. 131 0. 132 0. 400
7 3 1 3 2 0. 068 0. 064 0. 066 0. 198
8 3 2 1 3 0. 026 0. 027 0. 022 0. 075
9 3 3 2 1 0. 034 0. 033 0. 032 0. 099
Ⅰ j 0. 860 0. 879 0. 919 1. 322 SSt= EY2- (EY ) 2· (m n )- 1
Ⅱ j 1. 416 0. 969 0. 451 0. 712 　 = 0. 393 2- 0. 259 7= 0. 133 5
Ⅲ j 0. 372 0. 800 1. 278 0. 613 　 v t= m n- 1= 26
Ⅰ 2j 0. 740 0. 773 0. 845 1. 748 ESSg= 0. 133 1
Ⅱ 2j 2. 005 0. 939 0. 203 0. 508 　 vg= 3- 1= 2
Ⅲ 2j 0. 138 0. 640 1. 633 0. 376 Evg = 18
Rj 2. 883 2. 352 2. 681 2. 632 SSe= 0. 133 5- 0. 133 1= 0. 000 4
SSg 0. 060 6 0. 001 6 0. 038 2 0. 032 7 　 ve= 8
　　根据上述试验结果进行方差分析见表 3。
表 3　以丹皮酚为指标正交试验结果方差分析
方差来源 离均差平方和 自由度 均方 F P
A 0. 0606 2 0. 0303 606 < 0. 01
B 0. 0016 2 0. 0008 16 < 0. 01
C 0. 0382 2 0. 0191 382 < 0. 01
D 0. 0327 2 0. 0164 327 < 0. 01
误差 E 0. 0004 8 0. 0005
　　查 F值表 , F0. 05( 2, 8)= 4. 46　 F0. 01( 2, 8)= 8. 65
上述是以丹皮酚为指标得到的结果 ,黄芩苷测
定结果及数据处理见表 4,表 5,由于黄芩苷测定没
有空白列 ,又没有进行重复试验 ,故只能取方差最小
的 B列作为误差 E,从而求得 F值。方差分析表明 ,
影响最大的因素为醇浓度 ,其它因素无显著性影响。
由表 5可见最佳条件 A为 A3 ,而 B, C, D可取任意
水平 ,即取上述丹皮酚的实验结果 B2 C3 D1。 A项经
综合平衡为 A2最好。
3　小结与讨论
3. 1　经正交实验及结果综合分析 ,最终得出最优工
艺路线是采用 80%乙醇 ,回流提取两次 ,加醇量分
别为 10, 8倍 ,回流时间分别为 1. 5, 1. 0 h,回流水浴
表 4　以黄芩苷为指标正交设计试验
试验号 因素 试验结果
A B C D 黄芩苷 D (Y )
1 1 1 1 1 0. 216
2 1 2 2 2 0. 202
3 1 3 3 3 0. 184
4 2 1 2 3 0. 357
5 2 2 3 1 0. 337
6 2 3 1 2 0. 307
7 3 1 3 2 0. 319
8 3 2 1 3 0. 341
9 3 3 2 1 0. 353
Ⅰ j 0. 602 0. 892 0. 864 0. 906
Ⅱ j 1. 001 0. 880 0. 912 0. 828
Ⅲ j 1. 013 0. 844 0. 840 0. 882
Ⅰ 2j 0. 362 0. 796 0. 746 0. 821
Ⅱ 2j 1. 002 0. 774 0. 832 0. 686
Ⅲ 2j 1. 026 0. 712 0. 706 0. 778
Bj 2. 390 2. 282 2. 284 2. 285
SSg 0. 0363 0. 0003 0. 0009 0. 0013
表 5　以黄芩苷为指标正交试验结果方差分析
方差来源 离均差平方和 自由度 均方 F P
A 　　 0. 0363 2 　 0. 01815 135. 9 < 0. 01
B 0. 000267 2 0. 0001335 ※
C 0. 000933 2 0. 0004665 3. 494
D 0. 00127 2 0. 0006350 4. 757
·505·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 6期
　　查 F值表 , F0. 05( 2, 2)= 19　　 F0. 01( 2, 2)= 99
※由于黄芩苷测定没空白列 ,又没有进行重复试验 ,故只能取方
差最小的 B列作为误差 E,从而求得 F值。
温度控制在 90℃左右 ,按此条件操作 ,提取效率最
高 ,提取工艺最为合理。
3. 2　每次试验中其它因素如药材粉碎度、浸泡时
间、计时方法及其它操作均统一 ,以减少操作误差。
3. 3　不能回流提取的药材如冰片、樟脑 ,根据它们
的性质恰好均能溶解于 80%乙醇中 ,故将它们直接
溶解在回流提取的溶液中。
参考文献:
[1 ]　齐彦敏 . 用正交实验法优选清肺止泻冲剂的制备工艺 [ J ]. 中
国中药杂志 , 1995, 20( 11): 675.
[2 ]　贺石林 . 中医科研设计与统计方法 [M ] . 长沙:湖南科学技术
出版社 , 1989.
安多霖质量标准的研究 (Ⅰ )
林　绥 1 ,邓思珊 1 ,刘　韧 2
( 1. 福建省医学科学研究所 ,福建 福州　 350001;　 2. 福建省卫生学校 ,福建 福州　 350001)
摘　要: 目的　研究安多霖胶囊的质量标准及制剂的质量控制。 方法　采用薄层色谱法对安多霖胶囊中的黄芪甲
苷进行含量测定。 结果　线性范围 1～ 5μg ,平均回收率 97. 82% , R SD为 3. 56%。 结论　该法简单 ,重现性好 ,可
作为安多霖质量控制标准。
关键词: 安多霖胶囊 ;黄芪甲苷 ;薄层扫描
中图分类号: R927. 11　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 06 0506 02
Studies on quality standard of ADUOLA FUZHENGLIN CAPSULE(Ⅰ )
L IN Sui1 , DENG Si-shan1 , L IU Ren2
　　 ( 1. Fujian Institute of Medica l Science , Fuzhou Fujian 350001, China; 2. Fujian Hea lth School, Fuzhou Fujian 350001,
China)
Abstract: Object　 To specify a standard fo r the quali ty cont rol o f ADUO LA FU ZHENGLIN CAP-
SULE* .Methods　 The content of ast rag alosideⅣ in ADUOLA FUZHENGLIN CAPSU LE was deter-
mined by TLCS. Results　 The method show ed lineari ty wi thin the range of 1μg to 5μg, the average re-
covery rate w as 97. 82% , and RSD was 3. 56% . Conclusion　 This method is simple and highly repro-
ducible, and may be used fo r the quali ty contro l of the CAPSULE.
Key words: ADUO LA FUZHENGLIN CAPSU LE; ast rag alosideⅣ ; TLCS
* ADUOLA FUZHENGLIN CAPSU LES is a pr epar ation o f Chinese medicine used to enhance human immun o lo gical
func tion.
　　安多霖胶囊 ( ADUO LA FUZHENGLIN CAP-
SULES)是由黄芪、鸡血藤等药用植物配方组成的
一种纯中药口服制剂 ,具有提高机体免疫功能、提高
机体的抗应激能力 ,与现有的抗肿瘤药物及放、化疗
药物合用能提高治疗效果 ,减轻放、化疗的毒副反
应 ,升高白细胞 [ 1, 2]。该药中的君药黄芪 ,其中所含黄
芪甲苷类具有抗炎与降压作用 ,并可升高家兔血浆
中 cAMP量与促进小鼠再生 DNA的合成 ,提高机
体的免疫功能。黄芪甲苷的含量测定方法有比色
法 [3 ]、薄层扫描法 [4 ] ,我们采用氢氧化钾甲醇溶液及
索氏提取的方法 ,其中氢氧化钾不但可以使大部分
杂质皂化而溶于水 ,而且可使部分带有乙酰基的黄
芪甲苷类成分脱乙酰化反应 ,可能转化为黄芪甲苷 ,
再经氯仿 -正丁醇 ( 2∶ 1)萃取 ,萃取液再用 1%磷酸
二氢钾溶液洗涤 ,洗去碱性成分 ,既可以达到纯化的
目的 ,又可提高黄芪甲苷检测的灵敏度。
1　实验仪器与材料:
1. 1　仪器与试剂:薄层扫描仪: 岛津 CS-930;微量
定量点样管 ( 1～ 5μL, Drummond) , 硅胶 G板 (青
岛海洋化工厂 ) ,黄芪甲苷 ( ast rag alosideⅣ )对照品
由中国药品生物制品检定所提供。试剂均为分析纯。
1. 2　材料: 安多霖胶囊 ,由福州天地高技术新技术
研究开发部提供。
2　实验方法与结果
·506· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 6期
收稿日期: 2000-10-26作者简介:林　绥 ,女 , 40岁 ,副研究员 ,从事天然产物化学的研究。 Tel: 013605948318. E-mail: sjs 12345@ 21cn. com