全 文 ：表 2　综合评分及方差分析表
因素 A B C D 煎出水量
(系数) 0. 1
水煎出率
0. 2
芍药苷
0. 3
乙醇浸出物
0. 2
多糖
0. 2
得分 -45
1 A1 B1 C1 D1 68. 75 40. 39 44. 04 44. 84 40. 25 45. 17 0. 17
2 A1 B2 C2 D2 37. 50 53. 90 44. 57 55. 52 52. 53 49. 51 4. 51
3 A1 B3 C3 D3 6. 25 59. 80 48. 86 57. 77 58. 58 50. 50 5. 50
4 A2 B1 C2 D3 75. 00 47. 23 41. 23 41. 33 40. 96 46. 12 1. 12
5 A2 B2 C1 D1 50. 00 53. 55 50. 00 49. 01 57. 00 51. 91 6. 91
6 A2 B3 C3 D2 25. 00 54. 94 67. 71 51. 69 56. 44 55. 46 10. 46
7 A3 B1 C3 D2 81. 25 39. 30 42. 86 42. 00 39. 89 45. 22 0. 22
8 A3 B2 C1 D3 62. 56 47. 95 51. 14 49. 54 46. 94 50. 48 5. 48
9 A3 B3 C2 D1 43. 75 57. 02 58. 28 55. 46 57. 38 55. 83 10. 83
Ⅰj 10. 18 1. 51 16. 11 17. 91 G= 2Yi= 41. 45
Ⅱj 18. 49 16. 9 16. 46 15. 19 Si= 2 / 3- ( 2Yi) 2/ 9
Ⅲj 16. 53 26. 79 12. 63 12. 10 Fi= Sj/ S e　Se= Sd(空列)
f 2 2 2 2 FA= 2. 23( P> 0. 05)
p * FB= 19. 20( P < 0. 1)
FC= 0. 53( P > 0. 05)
　　　　加权综合考察的结果表明只有煎煮次数对各项考察指标有影响
理作用[ 3～5] ,也作为考察指标; 由于处方药味多, 其
所含活性成分复杂, 水提取物与乙醇提取物在一定
程度上代表了制剂所含的活性成分,故亦将其定为
考察指标。上述 4 项指标比较全面、合理、科学地考
察了功血饮的提取工艺。
6. 2　从单项指标考察及综合评分考察各因素, 加水
量( A )对水溶性浸出物、醇溶性浸出物、芍药苷含
量、多糖含量 4项指标影响均不明显,从节能因素考
虑,因选择 A3,即加 6倍水提取(提取前应预先测定
药材的吸水率,首次提取时应加药材的吸水量) ;煎
煮次数( B)对各项指标影响显著, 故选择B3, 即煎煮
3 次; 煎煮时间( C )仅对水溶性浸出物有一定影响,
从节能因素考虑,应选择 C1,即每次提取 1 h。因此,
最佳提取工艺为:加 6 倍水,提取 3 次,每次 1 h。
参 考 文 献
1　金　芳 . 中国中药杂志, 1999, 24( 10) : 608
2　戴俐明,陈学广,徐淑云 . 中国药理学通报, 1993, 9( 6) : 449
3　廖一民 . 华西药学杂志, 1992, 7( 3) : 174
4　陈元耀 . 广西中医药, 1994, 17( 4) : 45
5　李曼玲 . 中国中药杂志, 1994, 19( 8) : 504
( 2000-02-15收稿)
解热抗炎Ⅰ号口服液质量控制方法的研究
天津医科大学药学院( 300203)　　房志仲X　杨金荣　王学丰* * 　李　璐　张庆伟
天津市和平中医医院　　　　　　刘茂军
摘　要　目的:利用 T LC 和 HPLC 对解热抗炎Ⅰ号口服液中有效成分大黄素进行定性、定量分析。方法: 用 TLC
法对成分大黄素和薄荷进行定性分析, 以 HPLC 法在 ODS-C18柱上以甲醇-0. 1%高氯酸( 20∶80)为流动相测定其
含量。结果: 大黄素回收率为 96. 89% ( RSD= 0. 96% ) ,检测范围为 0. 05～0. 8 Lg/ mL , r= 0. 999 5,可以作为该制剂
的质控方法。结论: 所用定性、定量方法快速简便、灵敏度高、重现行好。
关键词　大黄素　薄荷　薄层层析法　高效液相色谱法
　　中药解热抗炎Ⅰ号口服液是天津市和平区医院 制剂,处方由大黄、薄荷、黄芩等多种中药提取精制
·747·中草药　Chinese T raditiona l and Herbal D rugs　2000 年第 31 卷第 10期
X Address : Fang Zhizhong, College of Pharmacy, Tianjin U nivers ity of M edical Scien ces , T ianjin房志仲　男,天津医科大学副教授,教研室副主任, 1982年毕业于北京中医药大学(原北京中医学院)中药学院,学士学位。1988～1989年以访问学者身份赴日本东北药科大学研修一年。在校所任教学课为药剂学、生物药剂学和药学发展史。主持的科研工作主要有血栓溶解酶剂型及药效学研究(天津市教委课题,第一作者) ;芽孢乳酸菌制剂的研究( 天津轻工业学院协作课题,第一作者) ;肤康、耳康制剂的研究(天津德森保健公司协作课题,第一作者) ;中药降脂灵片质量控制研究(天津森山保健品公司协作课题,第一作者) ;复方单硝酸异山梨酯缓释制剂的研究
(天津太河药业公司协作课题,第一作者)等。发表多篇学术论文,致力于药物剂型开发和中药提取、分离和质量控制研究。1994年研究广谱型农药增效剂获天津医科大学朱宪彝医学奖(第一作者) , 1998年度市级优秀教师(天津市教委、人事局)。
* * 本校 99届毕业生
而成,具有清热解毒、抗炎等作用。主要用于流行性
感冒引起的头痛、发烧、咳嗽等疾病。我们对其进行
了质量控制的研究,以 TLC 法对大黄、薄荷进行了
定性分析; 以 HPLC 法测定大黄素的含量, 同时对
色谱系统的选择、样品预处理进行了研究。
1　仪器与药品
各种中药材均由天津市药材公司提供。日本岛
津 LC-10AT 高效液相色谱仪, LC-6A 恒流泵,
SPD-10A 紫外检测器, CR-6A 数据处理机, ODS-
C18色谱柱。
大黄素对照品由中国药品生物制品检定所提
供,样品由天津市和平区医院制剂室提供, 所用试剂
均为色谱纯或分析纯。
2　方法与结果
2. 1　大黄的薄层层析法鉴别试验[ 1～4]
2. 1. 1　提取:取口服液 30 mL 加 HCl 调 pH 至 2,
加氯仿 30 mL 回流 30 m in, 分取氯仿液浓缩至 5
mL 备用;同法处理阴性对照;取大黄 1 g 水煮, 同样
品法制备阳性对照。
2. 1. 2　层析条件:以石油醚( 30 ℃～60 ℃) -乙酸乙
酯-甲酸( 15∶5∶1)为展开剂, 点样量 10 LL, 展距
10 cm。
2. 1. 3　结果分析:置紫外灯( 365 nm )下检视, 样品
色谱中,与对照品相同位置上有相同颜色的斑点,阴
性对照无此斑点(如图 1)。
2. 2　薄荷的薄层层析法鉴别试验
2. 2. 1　提取: 取口服液 100 mL 水蒸气蒸馏, 取前
50 mL 馏出液加石油醚 20 mL 萃取,低温挥去石油
醚至 2 mL, 供试;同法处理阴性对照。取薄荷脑配成
2 mg / mL 的乙醇液备用。
2. 2. 2　层析条件:硅胶 GF 254薄层析, 以正己烷-乙
酸乙酯 ( 17∶3)为展开剂, 点样量 10 LL, 展距 10
cm。
2. 2. 3　结果分析:喷以茴香醛-硫酸试液, 于 105 ℃
烘 10 m in显色,样品在与薄荷脑相同位置上( Rf=
0. 4)有紫红色斑点,阴性对照则无此斑点(如图 2)。
2. 3　HPLC 法测定口服液中大黄素的含量[ 4～8]
2. 3. 1　色谱条件:流动相:甲醇-0. 1%高氯酸( 20∶
80 ) , 流速: 1 mL/ m in, 色谱柱: ODS-C18 , 灵敏度:
0. 01AUFS, 柱温: 室温, 检测波长: 365 nm ,纸速: 5
mm / min, 进样量: 20 LL,在此色谱条件下, 大黄素
的保留时间平均为 15. 212 m in, 如图 3 所示。
2. 3. 2　标准曲线的绘制:精密称取大黄素对照品 5
mg ,置 5 mL 容量瓶中,甲醇定容至刻度,摇匀, 浓度
A-样品　B-大黄
C-阴性对照
图 1　大黄薄层层
析图谱
A-样品　B-薄荷脑　
C-阴性对照
图 2　薄荷薄层层
析图谱
A-样品　B-对照品　C-阴性对照品
a-峰为大黄素色谱峰
图 3　大黄素 HPLC色谱图
为 100 Lg / mL,作为储备液备用。取储备液以甲醇配
成 0. 05, 0. 2, 0. 4, 0. 6, 0. 8 Lg / mL 的系列对照溶
液, 经 HPLC 进行分析。以大黄素对照品峰高为纵
坐标,对照品浓度为横坐标绘制标准曲线。在0. 05～
0. 8 Lg / mL 范围内, 线性关系良好, 回归方程为:
Y = 34. 06+ 5 391X , r= 0. 999 5。
2. 3. 3　样品测定:精密量取口服液 30 mL 加 HCl
调 pH 至 2, 加氯仿 30 mL 回流 30 m in, 分取氯仿,
水浴挥干氯仿,加甲醇 30 mL 溶解备用。同法平行
操作 3 份,分别取 20 LL 进样两次测得样品中大黄
素含量。样品的含量测定结果如表 1。
表 1　样品的含量测定结果
峰 1 峰 2 平均峰高 样品浓度
( Lg/ mL )
平均浓度
( Lg/ mL)
RSD ( % )
1609 1648 1628. 5 29. 57
1618 1628 1623　 29. 41 29. 41 0. 44
1538 1639 1611　 29. 25
2. 3. 4　回收率试验: 精密量取解热抗炎Ⅰ号 30
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mL, 加入大黄素对照品 1 mg, 处理方法同上,供测
定大黄素之用。回收率测定结果为96. 89%, RSD=
0. 96% ( n= 3)。
3　讨论
3. 1　提取溶剂的选择:分别用氯仿、乙醇、石油醚作
为口服液的提取溶剂提取大黄素, 其中以氯仿效果
最佳,其优点是提取效率高而且杂质含量少,其中与
大黄素极性相近的成分少,薄层层析展开后斑点清
晰,易于分离。对于薄荷的定性采用水蒸气蒸馏法提
取挥发油,方法简便易于分离。
3. 2　展开剂的选择:在大黄素的定性中分别用展开
剂¹ 石油醚( 30 ℃～60 ℃) -乙酸乙酯-甲酸( 15∶5
∶1) , º正己烷-乙酸乙酯-甲酸( 30∶10∶1)展开于
硅胶 GF254薄层层析,其中以¹ 展开剂效果最佳,杂
质斑点与大黄素完全分离, Rf值适中。
3. 3　盐酸量的影响:在口服液调酸性过程中,以 pH
值为 2最佳, pH 过高影响苷的水解,影响大黄素的
收率。
3. 4　HPLC 测定样品时,开始以甲醇-0. 1%高氯酸
( 10∶90, 15∶85)为流动相,发现在大黄素峰前有难
以分离的杂峰干扰, 最后改用甲醇-0. 1%高氯酸
( 20∶80) 为流动相, 分离效果好, tR 适中。在用
HPLC 法进行分析时,在阴性对照液色谱图中大黄
素位置处无峰存在,在阳性对照液的色谱图中大黄
素 tR 与样品液中大黄素 t R 近似相等,说明在大黄素
吸收峰位置处无其它成分的干扰, 此分析方法可靠。
参 考 文 献
1　王雪峰,郑俊华,陈青云 . 中国中药杂志, 1995, 32( 12) : 719
2　黄偌嘉,郑剑红 . 中成药, 1996, 18( 2) : 13
3　王宝琴 . 中成药质量标准与标准物质研究 . 北京:中国医药科技
出版社, 1994: 158
4　何丽一 . 药学学报, 1980, 15( 9) : 555
5　曹爱民,沙　明,张振学,等 . 中国中药杂志, 1997, 22( 2) : 107
6　罗文敏 . 药物分析杂志, 1989, 9( 5) : 259
7　洪有坤 . 中成药, 1996, 18( 4) : 38
8　杨梓懿,易卫峰 . 中成药, 1991, 13( 12) : 19
( 1999-12-19收稿)
双波长薄层扫描法测定痹通宁冲剂中黄芪甲苷的含量
北京中医药大学药厂( 100029)　　马桂荣　古　梅　薄少英
　　痹通宁冲剂是由黄芪、丹参、当归等8 味中药材
精制而成。具有益气、活血、化瘀之功效。为保证该
产品质量,以君药黄芪中主要有效成分黄芪甲苷为
质控指标,采用双波长薄层扫描法测定该方中黄芪
甲苷的含量, 结果满意。
1　仪器与试药
岛津 CS-930薄层扫描仪(日本) ;硅胶 G(青岛
海洋化工厂) ;黄芪甲苷对照品(中国药品生物制品
检定所) ;痹通宁冲剂(本厂研究室提供) ; 其它试剂
均为AR级。
2　实验条件
2. 1　薄层层析条件:硅胶 G板,展开剂: 醋酸乙酯-
丁酮-甲酸-水( 6∶1∶1∶1) ; 显色剂: 10%硫酸乙醇
液( 105 ℃烘约 10 min)。
2. 2　扫描条件: 选用双波长反射法锯齿型扫描。
Ks= 530 nm , KR= 700 nm, 狭缝宽度 1. 2 mm×1. 2
mm , Sx= 3,灵敏度 2。
3　方法与结果
3. 1　对照品溶液的制备:取在 60 ℃真空干燥的黄
芪甲苷对照品适量,精密称量,加 80%乙醇制成 0. 5
mg/ mL 的溶液,作为对照品溶液。
3. 2　标准曲线的制备:用定量毛细管吸取黄芪甲苷
对照品 2. 0, 4. 0, 6. 0, 8. 0, 10. 0 LL,分别点于同一
薄层板上,按上述条件展开,显色, 扫描。以峰面积积
分值为纵坐标, 以点样量为横坐标绘制标准曲线。计
算回归方程为 Y = 969. 60X + 998. 91, r= 0. 999 7。
黄芪甲苷的线性范围 1～5 Lg。
3. 3　样品溶液的制备:取样品约 5 g ,精密称量, 置
具塞大离心管中,加水 15 mL 使溶解,加乙醚提取 2
次, 每次 15 mL, 离心, 弃去乙醚液, 水液挥去乙醚,
用水饱和的正丁醇提取 4次,每次 15 mL,合并正丁
醇液, 用 5%碳酸氢钠溶液洗涤 2 次, 弃去水层, 正
丁醇液用水洗 2次, 置水浴上蒸去正丁醇,残渣加水
5 mL 溶解, 加于已处理的中性氧化铝柱上, 用 70%
乙醇 80 mL 洗脱, 收集洗脱液, 置水浴上蒸干,残渣
加 80%乙醇使溶解,定量转移至 5 mL 量瓶中并稀
释至刻度。
3. 4　样品测定:精密吸取上述样品溶液 10 LL, 对
照品液 8 LL, 分别点于同一薄层板上,展开,显色,
扫描测定。结果见表 1。
·749·中草药　Chinese T raditiona l and Herbal D rugs　2000 年第 31 卷第 10期