全 文 ：如意金黄巴布剂中小聚碱经皮渗透研究
上 海市中药研究所 ( 2 0 01 7 2 )
成都中医药大学药学院
王建新 .
李令媛 都 力
摘 要 采用改 良 F a rn: 扩散池法和 人体剩余量法 ,研究如意金黄 巴布剂中小果碱的经皮渗透特
性 , H P L C 法检测透过 的小粟碱 。 结果表明 : 小粱碱可 以透过皮肤而被吸收 ,其经皮渗透过程符合
iH g cu ih 方程 , 而且两 种透皮试验方法具有 良好 的相关性 。 提示 如意金黄 巴布剂经皮渗透效果 良
好 ,适于经皮给药 。 体外透皮试验在一定程度上可以反映药物透皮吸收的真实情 况 。
关扭词 如意金黄 巴布剂 经皮渗透 小果碱 改良 F ar nz 扩散池法 人体剩余量法
S t u d i e s o n P e r c u t a n e o u s A b s o r P t i o n o f B e r be
r i n e f r o m R u y i j i n h u a n g A d h e s i v e T a p e
W
a n g Ji a n x i n
,
L i l in g y u a n a n d G u o li ( S h a n g h a i I n s t it u t e o f C h in e s e M
a t e r i
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M
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,
S h a n g h a i 2 0 0 1 2 7 )
A加 t r a e t P e r e u t a n e o u s a b s o r p t io n o f b e r b e r in e f r o m R u y i ji n h u a n g a dh e s iv e t a p e w a s s t u d ie d b y im -
p r o v e d F r a n z d if f u s in g e e l ls a n d r e s id u a l d o s a g e m e t h o d s
.
T h e p e r m e a t e d b e r b e r i n e w a s d e t e r m in e d b y
H P L C
.
T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t b e r b e r in e in R u y iji n h
u a n g a dh e s iv e t a p e e o u l d p e n e t r a t e t h r o u g h s k in a n d b e
a b s o r b e d
.
T h e p r o e e s s o f P e n e t r a t i o n c o u ld b e d e s e r i b e d b y H i g u e h i e q u a t i o n
.
T h e t w o p e r e u t a n e o u s t e s t
m e t h o d s s h o w e d a s i g n i fi e a n t e o r r e la t i o n s h i P s u g g e s t in g t h a t R u y ij in h
u a n g a d h e s i v e t a P e 15 s u i t a b le f o r a d m in
-
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·
K e y w o r ds R
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n h u a n g a d h e s iv e t a p e p e r e u t a n e o u s a b s o r p t i o n b e r b e r i n e im p r o v e d F r a n z d if
-
f u s i n g e e l l s m e t h o d r e s id u a l d o s a g e m e t h o d
如意金黄巴布剂是对古方如意金黄散进 酸 小梁 碱对照 品 ( 中国 药品 生物制 品检 定
行剂 改而 成的外用 中药新制剂 , 由姜黄 、 黄 所 ) ;所用试剂均为分析纯 。
柏 、 大黄等药物组成 , 具有消肿止痛 、 清热解 1 . 2 动物 : 家兔 (华西 医科大学实验动物 中
毒之功效 , 对疮疡肿痛 、跌打损伤等症具有显 心 ) 。
著而确切的疗效 。 我们将药材 中有效成分进 1 . 3 仪器 : G ils o n 高效液相色谱仪 (法 国 ) ;
行提取纯化后 ,制成以 氮酮和丙二醇为透皮 改良 F ar nz 扩 散池 (华西医 科大学仪器修造
促进剂的巴布剂 , 有药物容量高 ,透皮性 、 贴 厂 ) ; C S 5 01 型超 级恒 温 器 (重 庆试 验设 备
敷性 、 保湿性好等优点 , 临床疗效显著 。 为研 厂 ) , 7 8一 1型磁力搅拌器 (杭州仪表电器厂 ) 。
究其透皮吸收情况 ,采用体外扩散池法和人 2 盐酸小桑碱的 H P L C 测定方法
体剩余量 法 , 对其 主药黄柏中有效成分 小聚 2 . 1 标准曲线制备 : 精密称取干燥至恒重的
碱的经皮渗透进行了研究 ,并探讨两种 试验 盐酸小聚碱对照品 .7 l m g , 置 50 m L 量瓶
方法的相关性 。 中 , 加甲醉溶解并稀释至刻度 , 再精密吸取 1
1 材料 m L 置 10 m L 量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至刻
1
.
1 药品 : 如意金黄巴 布剂样品 ( 自制 ) ; 盐 度 ,摇匀 ,作为对照品溶液 。分别精密吸取上述
,
A d d r e s s
:
W
a n g J ia n x in
,
S h a 雌h a i I ns t i t u t e o f C h in e s e M a t e r ia M e di e a , S h a n g h a i王建新 男 , 1 9 9 3 年毕 业于河南中医学院中药系 , 1 9 9 6 年于成都中医药大学获药剂学硕 士学位 , 1 9 9 9 年于华西医科大学获药荆学博 士学位 。 先后从事过 中药新荆型 、 药物动力学和花 向给药侧 荆的研究 。 巳公 开发表论文 n 箱 。 现就职于上海
市中药研究所 , 主耍从事 中药新 制剂 、 新荆型的研究 。
( 中草药 ) 1 9 9 9 年第 3 0 卷第 9 期 6 7 7
对照 品溶液2 , 4 , 6 , 8 , 1 0 , 1 2 拼L 注入高效液
相色谱仪中测定 , 以盐酸小聚碱峰面积积分值
( Y )对进样量 ( X ) 进行回归 , 得回 归方程为 Y
= 1 1 8 8 8 1 6
.
1 4X 十 5 7 8 9 . 8 7 , r = 0 . 9 9 9 9 。 表明
在进样量 0 . 03 一 .0 17 产g 范围内 ,盐酸小聚碱
峰面积与进样量线性关系良好 。
2
·
2 色谱条件 : 色谱柱 : S y n e h r o m 5 1柱 , 5 1
预柱 , 检测波长 : 3 4 6 n m , 流动相 : 甲醉 一乙酸
乙醋 一 甲酸 ( 7 0 , 2 5 : 5 ) , 流速 : 1 . 0 m L /m i n 。
以盐酸小聚碱为对照品 ,进样后测定峰面积 ,
外标法定量 。 本法的加样 回收率为 98 . ” %
( R S D = 1
.
1 7 % )
。
3 改良 F ar n z( 体外 ) 扩散池 法经皮渗透测
定
3
.
1 离体兔皮制备 : 取健康 家兔 , 用电刮刀
脱去腹部 毛 , 2 4 h 后 剥取腹部皮 肤 , 分离皮
下脂肪及组织 , 选用无损伤皮肤 ,浸泡于生理
盐水中 , 置冰箱一 15 ℃保存备用 。
3
.
2 经皮渗透实验 : 将皮肤固定于扩散池的
给药室与接受室之 间 , 真皮一侧与接受液接
触 , 排净气泡 。 取一定面积 (4 . 5 。 m , )的巴布
剂样品贴在给药室皮肤上 , 使之 与皮肤密切
接触 。 接受液为约 3 0 m L p H 7 . 4 的磷酸盐缓
冲液 , 磁力搅拌 速度约 为 1 0 r / m in 水浴温
度为 (3 7士 l) ℃ 。 于 7 2 h 内间隔一定时间倾
取全部接受液 , 然后立即补充等体积接受液 。
取出的接受液置于干燥蒸发皿 中 , 水浴蒸干
后加 甲醇溶解定容于 l m L 量瓶中 , 取 10 产L
注人高效液相色谱仪 ,测定 , 并计算其累积透
过量 , 结果见表 1 。 以时间 t 为横坐标 ,各时刻
小粟碱平均累积透过量 Q 为纵坐标 , 绘制 其
经皮渗透曲线 ,见图 1 。
裹 1 体外扩散池法侧定如意金黄 巴布剂
中小桑孩的经皮渗透试验 (n ~ 5)
4 h 8 h 12 h 24 h 36 11 4 8 h 72 h
0
.
9
0
. `
0
.
2
0
ǎ“后、梦í口
16 2 4 3 2 40 铭 5 6 64 7 2时间 t (面n )
圈 1 体外扩散池法侧定 如宜金黄巴布荆中
小桑碱的 . 积透过 , 一时间 曲线 伽 ~ 5)
4 , 8
,
1 2 , 2 4 , 3 6
,
4 8
, 7 2 和 9 6 h 各取一块 , 并
将皮肤上残 留部分用酒精棉球擦下 , 待测 。
4
.
2 透过小梁碱的测定与计算 :将各时间取
下的片材及棉球置具塞锥形瓶 中 , 加甲醇 25
m L
, 浸渍 12 h , 超声处理 30 m in , 滤过 , 滤液
浓缩后转移并定容于 10 m L 量瓶 中 , 作为供
试品溶液 。 精密吸取供试品溶液 10 拜L 注人
液相色谱仪 ,计算样品中小聚碱剩余量 。 另取
未使用的同样规格片材同法提取测定 , 作为
小聚碱未经吸收的空 白值 , 以 空白值和剩余
量计算各时间间隔小粟碱经皮渗透量 , 结果
见表 2 。 并绘出体内透过量经时变化曲线 , 见
图 2 。
表 2 人体刹余一法洲定如宜金黄巴布荆
中小桑喊的经皮洽饭试验 (n ~ 5)
4 h 8 h 12 h 24 h 36卜 48 h 72 h 96 h
累积透过量
(滩 /em Z ) 3
.
51 5
.
85 6
.
68 7
.
34 7
.
89
SR D (%) 11 0
.
94 0
.
71 0
.
64 0
.
66
8
.
56
0
.
68
9
.
63 10
.
62
0
.
79 0
.
94
习 _
:只.、 、 * 初 、 ; ; * ; ` .*
时间 t 《侧。 》
ǎ飞ul夕若
圈 2 人体刹余 , 法侧定如宜金黄巴布荆中
小架碱的 . 积退过一时间曲钱 (n 一 5)
爪权透过 t
(陀 /em Z)
SR D (% )
0
.
1154 0
.
20 79 0
.
3680 0
.
4539 0
.
5641
`一 6200 0 . 76 54
0
.
0386 0
.
0478 0
.
0472 0
.
0438 0
.
0543 0
.
04 20 0
.
0528
4 人体剩余 t 法经皮渗透测定
4
.
1 给药 : 取如意金黄 巴布剂 1/ 4片 , 贴于
5 名男性健康受试者背部 ,每人 8 块 。 分别于
.
6 7 8
-
5 两种透皮试验方法结果的相关性
为探讨两种 透皮试验方 法结果 的相 关
性 ,对改 良 F ar n : 扩散池法和人体剩余量法
测得的小粟碱累积释放百分率的结果进行 比
较 , 见表 3 。
表 3两种透皮试验方法测定结 果比较
攀积透过百分率( % ) 线性回
归方程
相关系数
( h)体外扩散池法人体剩余量法
4 6
.
8 7 3
.
66
81 2
.
1 1 2 3
.
77
1 2 1 2
.
8 014
.
5 8
24 2 6
.
89 1 6
.
0y 3二 一 2 0
.
7 5+ 3
.
04X 0
.
97 08
36 33
.
4 2 7 !
.
2 3
4 8 36
.
7 1 9 8 3 6
7 24 5
.
34 1 2
.
0 3
9 2 6 3
.
2 3
由表 3可见 , 两种方 法结果 r ~ 0 . 9 7 0 8
> or
. 。 1 , 。一 0 . 8 74 ,说 明二者极显著相关 。
6 讨论
6
.
1 巴布剂为外用中药新剂型 ,是 以水溶性
高分子化合物或亲水性物质为基质 , 与中药
提取物制成的中药外用贴膏剂 。 它可 以在很
大程度上克服 目前常用的中药外用剂型的许
多缺点 , 同时具有药物容量 高 , 透皮性 、 贴敷
性 、 保湿性好 ,应用方便舒适等优点 ,被 认为
是一种具有广阔发展前景的外用新剂型 。 因
此 , 我们将原方剂改为巴布剂 , 并以其中有效
成分小 聚碱 为指标 ,对 其透皮吸收特性进行
研究 。
6
.
2 由图 l , 2 可以看出 , 如意金黄巴布剂中
小聚碱可 以经皮渗透 , 且透过量随时间的延
长而增加 ,表 明如意金黄 巴布剂中有效成分
可以 透过皮肤而发挥作用 ,适于经皮给药 。两
种试验方法 的 Q 一 t 曲线均为非线性过程 , 说
明小粟碱通过皮肤的渗透不是零级过程 。 分
别将两种方法的平均累积透过量 Q 对 lt/ 2进
行 回 归 , 所得方 程分 别为 Q - 一 。 . 0 3 7 2 9 +
0
.
0 9 6 9 7 t
` / 2 , r = 0
.
9 8 6 3 大 于 r o . 。 1 . 5 = 0 . 8 7 4
和 Q = 0 . 2 0 6 6 + 2 . 5 0 X 1 0 一 3 t ` 2 , r = 0 . 9 1 9 6
大于 r o . 。 1 , 。 ~ 0 . 8 3 4 , 即 Q 与 r ’ / ,极显著相关 ,
说明经皮渗透过程符合 H i g uc il 方程 。
6
.
3 目前常用的在体透皮试验方法有血药
浓度法 、 放射性 同位素示踪法和人体剩余量
法等 lj[ , 因一般中药制剂成分复杂 ,且有效成
分含量较低 , 用血药浓度法检测其在体 内的
吸收情况难度很大 ,放射性同位素示踪法研
究 中药制剂只适用于动物和体外试验 , 一般
不宜用于人体 ; 因此人体剩余量法虽然存在
一定误差 , 但仍有其实用价值 。离体透皮实验
多采用扩散池法 ,具有简单 、 易于重复 、 可以
控制环境以考察药物透皮吸收的特定影响因
素等优点 , 因此有人认为透皮试验的体外数
据 比体 内数据更有意义 2j[ 。 由表 3 可见 ,体外
扩散池法和人体剩余量法的试验结果虽然有
一定的差异 ,但二者有显著的相关性 ,说明体
外试验可以在很大程度上反映药物透皮吸收
的情况 , 同时也表明了试验结果的可靠性 。
6
.
4 本文参考有关文献阎制定 了样 品中小
粟碱的测定方法 , 选用正相色谱条件 , 在 3 46
n m 波长处进行测定 ,不仅灵敏度高 , 而且可
以 使样 品中小聚碱 型生物碱得到很 好的分
离 ,保证 了试验结果的准确性 。
参 考 文 献
1 孙考祥 ,等 . 中国药学杂志 , 1 9 9 6 , 3 1 ( 1 ) : 13
2 R o b e r l L B
, e t a l
.
T o x i e o l A p p li P h a r m a e a l
, 1 98 2
, 6 2 :
4 7 4
3 沙世炎 主编 . 中草药有效成分分析法 (下册 ) . 北京 : 人
民卫生 出版社 . 1 98 2 : 2 9 9
( 1 9 9 9
一
0 1
一
0 4 收稿 )
《国外医药 · 植物药分册 》 20 0 0 年征订启事
《 国外 医药 · 植物药分册 》杂志是 由国 家药品监督管理局 主管 , 中草药信息中心站 和天津药物研究院主
办 , 国内外公开发行 的医药科技专业期 刊 。
本刊以综述 、 编译 、 文摘 、 信息 、题录等形式向读者提供植物药有效成分的分离提取 、 结构鉴定 ;生产 工艺
和质 量控制 ; 生化药理活性与临床研究 ;组织培养与生物技术工程 ;各 国民间药物的开发与植物药专利 ; 市场
贸易与各国 的药政管理 。 此外 , 与植物 相关的保健食品 、 化妆 品 、 兽药 、 农药 、 饲料 、 调料等亦 属本刊的报道范
围 . 信息来 源涉及十几个国家 出版发行 的一百多种期 刊 ,每年 向读者提供约 50 万字新 、 特 、 快信息 。
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( 中草药 ) 1 9 9 9 年第 3 0 卷第 9 期 · 6 7 9 ·