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壳聚糖用于部分单味中药浸提液澄清效果的研究



全 文 :表 2 3 种工艺 比较
工 艺 步 霖
工艺 工艺醇沉 回收 乙醉 冷藏静里 灭菌
生产周期
( h )
醇沉法
吸附澄清法
吸附澄清 一高速离心 一微滤 法
9 6
4 0
1 2
连续性
不连续
不连续
连续生产
有无有无 有无有无
5
.
1 研究结果表明 : 吸附澄清 一高速离心一微
滤法工艺生产营蒲益智 口 服液 , 能够提 高制
剂的有效成分含量 。
5
.
2 采用吸附澄清 一高速离心 一微滤法生产
中药 口服液 ,可 以 实现连续化生产 , 简化了工
艺 , 缩短 了生产周期 , 降低了生产成本 。
5
.
3 吸附澄清 一高速 离心 一微 滤法工艺可 以
更有效地除去杂质 , 选择性地保 留有效成分 ,
提高 中药 口服液制剂的稳定性 。
致谢 : 承蒙天津药物研 究 院官利 民老师
对 实验研究给予指 导 , 天津 医药集团李朝兴
教授审阅文稿 , 谨致衷心谢意 。
参 考 文 献
1 唐青华 , 等 . 中成药 , 2 9 9 7 , 19 ( 6 ) : 5 8
2 杜成安 , 等 . 中成药 , 19 93 , 15 (l 1 ) : 2
3 奉建芳 , 等 . 中成药 , 19 9 6 , 18 (l 2) : 7
4 刘洪谦 , 等 . 中草药 , 1 9 96 , 2 7 ( 4 ) : 2 0 9
5 姚 燕 . 等 . 中草药 , 1 98 9 , 2 0 ( 2 ) : 13
6 王 统宽 . 中国博 士后论文集 . 北 京 : 清华大学 出版社 ,
1 9 9 0 : 1 0 4
7 周祖康 , 等 . 胶 体化 学基础 . 北京 : 北京大学 出版 社 ,
1 9 9 6
:
1 6 4
8 R au te nb ac h R (王乐夫 ,译 ) . 膜工艺 一组件和装置设计基
础 . 北京 : 化学工业出版社 , 19 9 8 : 2 1 5
( 1 9 9 9

0 2

9 收稿 )
壳聚糖用 于部分单味中药浸提液澄清效果的研究
上海 中医药大学 ( 2 0 0 0 3 2 ) 张 形 ’ 徐莲英 陶建生 唐青华 ’ ` 周 听 “ 王曙东”
摘 要 探 讨 了壳 聚糖 絮凝澄 清剂用于 精制部分单 味中药浸提 液的澄 清效果 , 选择 了 8 0 味常用
中药 , 对其澄 清效果作 了定 性考察 。 其 中部 分单味药材进行 了 T L C 鉴 别及含量测定 , 并将絮凝液
与醇沉液 、 水煎 液作 比较 。 结 果表明 : 壳 聚搪絮凝剂用于大多数单味 中药浸提液均起到一定 的澄清
作用 , 能有效保 留其中大部分有效成分 。 但对水溶性较小的靛玉红有所影 响 。
关健词 壳聚糖 絮凝 澄清剂 水提醇沉 法
中药浸提液精制过程主要 目的是去除杂
质 ,保 留药材中具有生理活性的有效成分 。 常
用的精制方法有水醇法 、 萃取法 、 超滤 法 、 分
子筛法 、 离子交换法等 ,其中水提醇沉法在中
药的制药工艺中被广泛的应用 。 但水醇法生
产成本高 、 安全性差 , 且在保 留药物有效成分
方面 有一定 的局限性月 。 近年来出现的絮凝
沉淀法因其使用简便 、 成本低 、 有效成分损失
少而越来越受到人们的重视 。 甲壳素类絮凝
澄清剂 资源丰富 、 成本低 、 应 用方便 , 具有广
阔的前景 。 国 内也有 了将其作为中药澄清用
絮凝剂的报道沁 3〕。 我们从化学成分人手 ,选
择 了主含有机酸 、 生物碱 、 黄酮 、 多糖等成分
的 8 0 味单味中药 ,涉及不同的药用部位 。 考
察了不同成分 、 不同质地药材的澄清范围 , 对
其中部分单味药材进行 了 T l一 C 鉴别及含量
测定 , 并将絮凝液与醇沉液 、 水煎液作 比较 。
通过本课题的研究 , 希望进一步充实絮
A d d r e
5 5 :
Z h
a n g T o n g
,
S h a n g h a i U n i
v e r s i t y o f T r a d i t i o n a l C h i n e s e M
e d ie i n e a n d M
a t e r i a M e d i e a S h a n g h a i
· ` 本校 9 8 届 硕士生
·
7 4 4
·
凝工艺的研究内容 ,总结出一些规律 , 促进絮
凝工艺在中药行业的推广 。
1 材料和仪器
药材 : 单味药材购于上海徐汇饮片厂 , 并
经鉴定符合《 中国药典 》 1 9 9 5 版有关标准 ; 对
照品 和对照药材 : 均购于 中国 药品生物制品
检定所 ; 壳聚糖 : 购于华东理工大学华凯科技
贸易公司 , 用 1%醋酸溶液配成 1写溶液后使
用 ; 硅胶 G , 硅胶 G F 25 4 : 购 于青 岛海 洋化工
厂 ; 主 要 仪 器 : 超 声 波 提 取 器 S B 2 2 0 o ,
H P l l 0 O 液相色谱仪 , U V 一 7 54 紫外可见分光
光度计 。
2 部分单味中药浸提液澄清效果的考察
2
.
1 药材 : 陈皮 、 红花 、 篇蓄 、 菊花 、 木瓜 、 白
鼓 、 车前草 、 大青 叶 、 黄 琴 、 紫苑 、 补骨脂 、 槐
米 、 降香 、 桑 枝 、 桑 白皮 、 板 蓝根 、 忍冬藤 、 石
韦 、 葛根 、 淫羊霍 、 黄蔑 、 人参 、 白茅根 、 虎杖 、
玉竹 、 猪荃 、 获菩 、 黄精 、 积雪草 、 牛膝 、 贯众 、
地肤子 、 马鞭草 、 决 明子 、 白芍 、 秦皮 、 当归 、 金
银花 、 木瓜 、 乌梅 、 山植 、 覆盆 子 、 金樱子 、 茵
陈 、 川芍 、 地骨皮 、 大黄 、 番泻叶 、 广防己 、 马兜
铃 、 关木通 、 青木香 、 山豆根 、 马钱子 、 升麻 、 石
解 、 白鲜皮 、 半边莲 、 半枝莲 、 百部 、 百合 、 北沙
参 、 元胡 、 吴茱英 、 附子 、 粉防 己 、 青篙 、 苦参 、
革羞 、 草乌 、 钩藤 、 秦芫 、 浙 贝母 、 益母 草 、 黄
连 、 黄柏 、 麻黄 、 龙胆 草 、 续 断 、 稀签草 , 共 8 0
味中药 。
2
.
2 实验方法及结果 : 称取上述单味药材各
60 9
, 以 1 0 倍量 、 8 倍 量水 煎煮 2 次 , 每次 1
h
, 合并煎液 ,滤过 , 浓缩 。 浓缩至药液体积 :
生药 克数 为 6 : 1 , 4 : 1 , 2 : 1 , 1 , 1 时 , 按
1 9 9 5 版 《中国 药典 》一部附 录测 定其相对 密
度及 p H 值 。 取各不同浓缩 比例的药液 (均含
1 9 生药 ) , 设 10 个 梯 度 , 依 次 加 人 0 . 05 ,
0
.
1
,
0
.
2
,
0
.
4
,
0
.
6
,
0
.
8
,
1
.
0
,
1
.
2
,
1
.
6
,
2
.
0
m L 体积的壳聚糖溶液 。 摇匀 ,置 S O C恒温水
浴 中 , 放 置 2 4 h , 并 于 0 . 5 , 1 . 5 , 3 . 0 , 6 . 0 ·
1 2
.
0
,
2 4
.
O h 时观察 。 以醇沉上清液 为阳性
对照 , 水煎液 为阴性对 照 。 “ 十 ” 表示 澄清 ,
“ 一 ” 表示浑浊 。 “ 士 ” 表示介于二者之 间 。 以
《 中草药 》 1 9 9 9 年第 3( ) 卷第 1() 期
补骨脂为例 , 结果如表 1 所示 。
2
.
3 讨论
2
.
3
.
1 壳聚糖絮凝剂对所选 8 0 味单味药材
浸提液均能起到一定的澄清作用 , 但澄清范
围 、 澄清条件各不相同 , 有一定的特异性 。
2
.
3
.
2 所选 中药浸提液的 p H 值均小于 7 ,
壳聚糖 絮凝澄清剂应在酸性条件下应用 。 壳
聚糖是含胺基基团的高分子长链化合物 。 在
酸性条件下 , 可很好地伸展其长链 ,成为阳离
子型絮凝剂 , 同时发挥吸附架桥和 电中和作
用闭 , 以达到澄清的目的 。
2
.
3
.
3 澄清效果与壳聚糖加入量有关 ,加人
太多或太少 , 药液均不澄清 。
2
.
4 药液浓缩比例对澄清范围有一定的影
响 。 当药液质量体积 比增加到一定程度 , 澄清
范围有缩小趋势 。
2
.
5 放置观察 , 一般 1 ~ Z h , 药液可澄清 ,
时间过短澄清不完全 。
3 T L C 定性比较
3
.
1 药材 : 大青叶 、 紫莞 、 葛 根 、 补骨 脂 、 槐
米 、 降香 、 黄茂 、 虎杖 、 决 明子 、 当归 、 金银花 、
大黄 、 番泻叶 、 广防己 、 马兜铃 、 关木通 、 青木
香 、 马钱子 、 益母草 、 黄连 、 黄柏 、 麻黄 , 共 2 2
味中药 。
3
.
2 实验方法与结果 : 见表 1 。
加人 1%壳
水煎液一 三加人 乙醇放置 . 冷
一 , 放置过夜~ 滤过 ~ 上清液
按 上清液制备流程取得上清液 , 再用有
机溶剂萃取或水浴蒸干后超声提取制备供试
液 。 按 19 95 版 《中国药典 》一部相应单味药材
“ 鉴别 ” 条 目下所载方法选择对照品或对照药
材 ,并按其层析条件进行展开 ,拍照 。 部分结
果如图 l 。
3
.
3 讨论 : 葛根等 2 味中药经 T L C 鉴别表
明 : 絮凝液 、 醇沉液 、 水煎液的供试 品三者斑
点基本一致 , 在与对照品相当的位置上均显
示相同颜色的斑点 。 初步说明壳聚糖澄清剂
能有效保 留中药水煎液中大部分成分 。
.
7 4 5
.
表 1 补骨脂药液漫清 实验结果
生药 /药液 p H 质量 /体积 加人壳 聚搪 的量 ( m L )
0
.
4 0
.
6 0
.
8 1
.
0 1
.
2 1
.
6 2
.
0
一士+一士+十一土+十士+一十
5502420.0L36.122放置时间)(h2 5 6 1
.
0 7 3
放置时间)(h2 5
.
7 1
.
0 4 0
5024以1..3612放置时间)(h4 5
.
7 1
.
0 2 2
亡d户JCO.…n1nj66 5 . 7 1 . 0 15 放置时

( h )
l:
. . . 曰 . . . . . . . . . . . . . . . . .
… 司 .. 口 . .
. - 二
~ 川 . ` ~ .冲 ~ . 卜 ~口` -
口`二 ,
心,
~ .卜. 一
3
金 . 花
一 , . 尸 ~ 一 ~ 一 一 一
. ,
口, 二
二~ ~ 闷. ~ 一 . 卜 曰 . 冲 ~
. 口. . . . . . . 门 . . . . . . . . . . . . . . . . . 口 . . . . . .
…口 二…一 ~ ` . ~ ` 一 , ~ . .月 ` -
公兑
(阴性 )
2 3
大青叶
《阴性 〕
1一对照品或对 照药材 2一絮凝 液供 试液
3
一醇 沉供 试液 4一水煎供试液
图 1 T L C 图
紫苑 T L C 供试液 1 为对照药材的石油
醚提取物 , 其絮凝供试液在某些相应位置上
无斑点 ; 大青叶絮凝供试液如点样量少时 ,结
果也为阴性 。 说明澄清剂可能对水溶性较小
的成分有所影响 。
4 定 t 研究
4
.
1 药材 : 金银 花 、 当归 、 黄蔑 、 白茅根 、 麻
黄 、 黄柏 、 淫羊霍 、 大青叶 , 共 8 味中药 。
4
.
2 实验方法与结果 : 按工艺流程取得上清
液 ,其 中醇沉浓度根据文献报道选择 40 % ~
65 %
, 絮凝剂条件根据正交试验优选 。根据需
要选择 H P L C 、 U V 等方法 ,对其中指标成分
进行含量测定 , 并以水煎液含量为基准计算
转移率 。含量测定的方法学研究从略 , 测定结
果见表 2 。
5 讨论
就本实验而言 , 壳聚糖澄清剂用于单味
中药水煎液的精制能有效保留其中大部分成
分 。 与醇沉工艺比 ,能明显提高多糖和有机酸
的含量 。但对水溶性较小的靛玉红有所影响 。
提示我们 当药液中指标成分水溶性较小时 ,
使用壳聚糖澄清剂应谨慎 。
大青 廿卜的三种提取精制方法中 , 靛玉红
的含量高低如下 : 水煎醇沉 > 水煎> 絮凝闭 。
·
7 4 6
.
表 2含 .侧定结果
含 t ( % ) 转移率 ( % )药材 成分 类别 絮凝液 醉沉液
7958 14 0634 76.29521 0
4
,.三9é月任亡J,口巴C月r9白月JOù丹了Ugn舀0l
.…óa夕一比b产O八巧亡J`工J任,七OéQóǎ了袄ùJ任金银花当 归黄 蔑
白茅根
麻 黄
绿原酸
阿魏酸
黄蔑多糖
多 搪
麻黄碱
伪麻黄碱
小粟碱
靛玉 红
淫 羊毯普
有机酸
有机酸
多 糖
多 糖
生物碱
生物碱
生物碱
生物碱
黄酮昔
絮凝液
2
.
08 2
0
.
0 4 8
1 4
.
6 3
醉沉 液
1
.
4 12
65 7
0 6 0 3
黄 柏
大青叶
淫羊获
0
.
0 2 6 8
0
.
0 7 3 4
0
.
0 0 0 8 8
0
.
0 7 7
0 0 2 9
4
.
9 1
4
.
4 6 7
0
.
0 60 9
0
.
0 2 75
0
.
0 7 56
0
.
0 0 24
0
.
0 8
水煎液
2
`
1 8 6
0
.
0 5 2
1 9
.
0 2
6
.
5 9 8
0
.
0 6 1
0
.
0 2 8 1
0
.
0 8
0
.
0 0 2
0
.
0 8 3
参 考 文 献
王燕 伟 , 等 . 浙江中医 学院学报 , 1 9 95 , 1 9 ( 2 ) : 30
唐青华 , 等 . 中成药 , 19 9 7 , 19 ( 6 ) : 3 8
张文青 , 等 . 华 东理工大学学报 , 1 9 9 6 , 2 2 ( l ) : 1 0 8
4 伊凡 . 海耳布伦 . 汉译海 氏有机化合物辞典 . 第三册
北京 : 科学出版社 , 1 9 65 : 14
( 1 9 9 8

0 8

2 0 收稿 )
H P L C 法测定克尔迈口服液中甘草酸的含量
正大青春 宝药业 有限公司 (杭 州 31 0 0 13)
浙江省医 学科 学院
邵 国 良 ’
毛丽珍
傅 君
徐世芳
摘 要 采用反相高效液相色谱法 和离子 抑制技术测定 克尔迈 口 服液中甘草酸 的含量 , 方法 简
便 , 数据稳定 , 重现性好 , 平均 回收率为 9 8 . 72 环 。
关键 词 克尔迈 口 服液 甘草酸 高效液相色谱 法
克尔迈 口服液是根据传统医学临床实践
经验组方 , 以牡砺 、 甘草 、 构祀子 、 山药等中药
为主要原料 ,用科学合理的工艺加工制成 。 具
有抗疲劳和免疫调节作用 ,适合易疲劳者 、 体
质虚弱者及免疫功能低下者 , 特别适用于防
治男 、 女更年期综合征 。 为了控制产品质量 ,
选以处方中甘草的有效成分甘草酸为质控指
标 , 探讨 了高效液相 的定量方法压 2〕 , 结果满
意 。
l 仪器与试药
仪器 : W at er s 高效液相色谱仪 , 包括 5 10
高压泵 , U 6 K 进样器 , 48 4 紫外检测器 , S hi -
m a d z u

R ZA 数据处理机 。
试剂 : 色谱纯甲醇 , 分析纯 36 %醋酸 ,二
次蒸馏水 。
对照品 : 甘草酸单钱盐由中国药品生物
制 品检定所提供 (高效液相归一化测得含量
为 9 5 . 1 4 % ) 。
克尔迈 口 服液及不含甘草的阴性对照样
品由正大青春宝药业有限公司提供 。
2 色谱条件
色谱柱 : 大连依利特公 司装 S p h er i so br
C
I :
( 5拌)不锈钢柱 , 1 5 0 m m x s m m 。
流 动相 : 甲醇 一水一 36 %醋 酸 ( 6 8 : 32 :
0
.
5 )
, 流速 1 m L /m i n , 检测波长 2 5 4 n m , 检
测灵敏度 0 . O4 A U F S ,纸速 2 m m /m in ,柱温
3 O C
。 经测定 ,柱效为 3 0 0 0 以 上 ,在供试 品
色谱中 , 甘草酸峰同邻近的杂质峰 已达到基
A d d
r e s s : S
a o G u o l i
a n g
,
Z h
e n g d
a
Q i
n g e h u n b a o P h a r m a e e u t i e a l C o
.
I t d
. ,
H u a n g
z
h o
u
《 中草药芳19 9 9 年第 3 0 卷第 10 期 · 7 4 7