全 文 ：三棱总黄酮抗血小板聚集及抗血栓作用研究
南 京中医药大学 ( 2 10 02 )9 陆兔林 命 叶定江 毛春芹 刘 雪松 ` ’
摘 要 采用血小板 聚集 功能测定法 、 小 鼠体 内血栓形成法对三棱 总黄酮进行抗 血小板聚集 及抗
血栓作用研究 。 结 果表明 : 三棱总 黄酮具较强 的抗血 小板聚集及抗 血栓作用 ,提示三 棱中总 黄酮为
其活血化旗的有效活性部位 。
关钮词 三棱 总黄 酮 抗血小板聚集 抗血栓
三棱具破血散癖 、 止痛功效 。 临床常用于
治疗肿瘤 、 肝脾肿大 、 胁肋疼痛 、 产后癖血 、 盆
腔炎等症 。 文献记载其成分有挥发油 、 奋醇
类 、 黄酮类等 l[ 一 3〕 。 我们以抗血小板聚集及抗
血栓为指标 , 对三棱 中相对含量较高的总黄
酮进行化癣作用研究 , 为筛选三棱的活性成
分或有效部位及其临床用药提供理论依据 。
1 材料
1
.
1 药材 : 三棱购 自南京市药材公司 , 经本
校鉴定教研组陈建伟副教授鉴定为黑三棱科
植 物 黑 三 棱 SP a 嗜a n i u m : t o l o n 1’fe r u m
B u “ h一H a m . 削去外皮的干燥块茎 。
1
.
2 仪器 : S P A 一 4 型 多功 能血小板 聚集仪
(上海科达测试仪器厂 ) 。
1
.
3 动物 : 昆明种小鼠 ,体重 18 一 2 9 , 由本
校实验动物中心提供 。 S D 大鼠 ,雄性 , 18 0一
2 2 0 9
, 由中国药科大学实验动物中心提供 。
2 方法与结果
2
.
1 三棱总黄酮制备 : 取药材适量 , 加乙 醇
回流提取 , 回收乙醇 , 石油醚脱脂 , 样品进行
聚酞胺柱层析 。 分别用蒸馏水 、 乙醇洗脱 。 将
乙醇洗脱液回收乙醇 , 真空干燥 ,得三棱总黄
酮 。 将制得总黄酮用无水乙醇 、 吐温 一 80 及蒸
馏水配成乳化剂 ,备用 。
2
,
2 三棱总黄酮抗血小板聚集作用研究闭 :
取健康雄性 S D 大鼠 , 随机分为 5 组 ,每组 10
只 。 以阿司匹林为阳性对照 , 空白溶剂为阴性
对照 ,分别给药 。 每天 19 1 次 ,连续给药 7 d ,
最后 1 次给药 l h 后 , i p 0 . 2%戊巴 比妥钠麻
醉 , 用事先置有拘椽酸钠的硅化注射器刺人
大鼠心尖部 , 抽取 s m L 血液 , 置于硅化离心
管中轻轻振摇混匀 。 s o o r /m i n 离心 4 m i n ,
吸 取 上 层 米 黄 色悬 液 即 为 富血 小 板 血 浆
( P R P )
。 将余下的血液以 3 0 0 0 r /m i n 离心 8
m in
, 吸取上清液 即为贫血小板血 浆 ( P P P ) 。
以 P P P 稀 释 P R P 至血小板 数为 2 X 10 5 ~
2
.
2 X 1 0 5 /m m
3 。 同时加人 A D P ( 2 拜m o l / L ,
以 0 . 2 m ol / L 磷酸缓 冲液 为溶剂 ) , 描记 3
m in 聚集曲线 。 各样品同法操作 。 从曲线上算
出 1 、 2 、 3 m i n 的聚集率 〔A g g ( t )〕、 最大聚集
率〔A g g ( m )〕、 达到最大聚集率时 间 ( t m ) , 结
果见表 1 。 三棱水煎剂及总黄酮均具较强的
抑制大鼠血小板聚集作用 。 与三棱水煎剂相
比 ,三棱总黄酮仍具较强的抑制作用 。
.2 3 三棱 总黄酮抗血栓作用研究闭 : 取 18
一 2 9 雄性小 鼠 , 随机分组 。 对照组给等量
的空白溶剂 , 以阿司匹林为阳性对照组 ,按表
2 所示剂 量 19 给药 。 l h 后尾 iv 胶 原蛋 白
( 2 2 5 雌 /只 ) 与肾上腺素 (9 拌g /只 ) 的混合诱
导剂 ,注射后观察 15 m in 内小鼠偏瘫的未恢
复数 ,计算药物对小鼠脑血栓的保护率 ,结果
见表 2 。 三棱水煎剂及总黄酮对胶原蛋白一肾
上腺素诱导的小鼠体 内血栓有显著的保护作
用 , 同时与水煎剂相 比三棱总黄酮具较强的
A d d r e s s
:
L u T u li n
,
N
陆兔林 男 ,讲 师 ,硕士 。
n i v e r s i t y o f T r a d i t io n a l C h i n e s e M e d i e i n e a n d M a t e r i a M e d i e a
,
N a n jin g
业于南京 中医药大学中药 系 。 主要从事中药炮制学理论教学和 中药饮 片质量标准及新药开发研制工作 。 主持 或承担多项科研课题 ;发 表科研论文 10 余篇 。
, , 本校 药理 93 级实习生
《中草药 》 1 9 9 9 年第 3 0 卷第 6 期 . 4 3 9 .
表 1三棱 总黄酮对大 鼠血小板聚集功能的影响 ( x士 s, n 一 1 0)
场(s)组别 剂量
(m g / kg )
Ag g ( l ) Ag g (2) Ag g ( 3) Ag g ( m )
(% )
对照组
三棱水煎液
三棱总黄酮 ;:
`
阿司匹林
3 1
.
0 9士10 . 45
15
.
03士7 . 79 禅 .
10
.
94士10 42 甘 “
l飞. 魂3土11 . 24 “ 书 .
13
.
39士11 . 8 , 苗 居
35
.
40士 7. 25
12
.
16士 10 . 03 ” . 朴
9
.
92士 11 . 94铃 哥 铸
14
.
G4士 11 . 82苍 母
10
.
86士 10 . 0 1“ , 份
29
.
74士7 . 25
12
.
75士6 . 45 份 甘 资
5
.
86士9 . 4 1件 势 每
9
,
75士12 . 5 爷 爷 份
4
.
94士3 . 右4 “ “ 书
36
.
9 3士8 . 0 6
15
.
9 8士8 . 43 奋 . 价
12
.
48士10 , 5 各 菩 卡
11
、
4 0士12 4 份 转 价
15
.
67士10 , 7 ` 公 妥
129
.
56士35 . 99
73
.
67土 17 . 3 1 . 译 甘
4 7 67士 35, 96 圣 份 特
7 2
.
53土58 . 2魂件 . 件
53
.
10士37. 36怪 ` 拼
队50
与对照组比较 : “ ` P ( 0 . 01 ” “ P ( 0 . 001
表 2 三搜总黄酮对小鼠体内血栓形成的影响
组别 剂量
( rn g / k g )
动物数
(只 )
1 5 m i n 内恢
复数 (只 )
恢复率
( 纬 )
0ùa,
.
Qù85
行沙Od又é
对照组
三棱水煎液
三棱总黄酮
阿 司匹林
抗血栓作用
一 1 0
2 0 9 1 0
8 4 1 0
1 68 1 0
8 0 1 0
3 讨论与小结
实验采用抗血小板聚集和抗血栓两种实
验方法 对三棱总黄 酮进行活 血化痪 作用研
究 。 结果表明 : 与三棱水煎剂及空白组 比较 ,
三棱总黄酮具较强的抗血小板聚集及抗血栓
作用 。 按文献川法对提取总黄酮进行纯度分
析 ,结果显示本品纯度达 90 % 以上 。 本实验
结果为进一步筛选三棱有效成分提供了理论
依据 。
参 考 文 献
1 陈耀祖 , 等 . 药物分 析杂志 , 1 9 89 , 8( 5) : 2 70
2 张卫东 ,等 . 中国中药杂志 , 1 9 9 5 , 2 0 ( 6 ) : 3 5 6
3 陆兔林 , 等 . 中成 药 , 1 9 9 8 , 2 0 ( 3 ) : 23
4 陈 奇 , 等 中药 药理研究方法 学 . 北京 : 人民 卫生 出
版社 , 1 9 9 4 : 5 8 1 , 5 7 9
( 1 9 9 8
一
1 0
一
1 9 收稿 )
S t u d i e s o n A n t i P l a t e l e t A g g r e g a t i o n a n d A n t i t h r o m b o s i s A e t i o n o f OT t
a l F l a v o n o i d s
o f C o m m
o n B u r r e e d (助 a r g a n i u m s t o l o n ife r u m )
L u T u Hn
,
eY D i
n g ji a n g
,
M a o C h u n q in
,
et a l
·
( N a n ji n g U n ive r s i t y o f T C M
,
N a n ji n g
, 2 1 0 0 2 9 )
A加t ar e t A n t ip la t e l e t a貂 r e g a t j o n a n d a n t i t h r o m bo t i e a e t io n o f t o t a l f la v o n o id s o f SP a Z沼 12。勿 , st ol n ife ur m B u e h一
H a m
.
in m i e e w e r e s t u d i e d b y p h a r m a e o l o g i e a l s e r e e n in g
.
T h e e x p e r一m e n t a l r e s u l t s s h o w e d t h a t t o t a l f l a v o n o id s o f s
·
s t of o n ife
r u m B u e h一 H a m · e a n i n h i b i t p la t e l e t a g g r e g a t i o n , p r e v e n t t h r o m b o s 王5 in r a t , p r o v i n g i t s e f f e e t s in p r o m o t in g b lo o d
e i r e u la t i o n a n d r e s o l v i n g b l o o d s t a s i s a s d o e u m e n t e d in a n e玉e nt C h 、n e s e m e d i e a l l i t e r a t u r e s ·
K e y , o r d s SP
a r卯 n i u m s t o l o二 lfe r u , B u e h一壬I a m . t o t a l f l a v o n o id s a n t ip l a t e l e t a g g r e g a t i o n a n t i t h r o m bo s i s
厂令 , 令 .令·~ ·令一~ · 奋·令 “奋一令 ` ~ 一~ .令 “ 小一夺一令 `幸一今 ’ 令一令一奋 `令 “令一今一今’ 令一令一奋 一令` 令` 令一奋户令 一今一今 . 令’ ~ 一今 . 今一令一令、 .甲盗-已`,*二.人自``V丫山。.*止.舀了,人-直
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《中草药 》杂志编辑部
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.
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