全 文 ：·药理实验与临床观察·
保心微丸中肉桂酸大鼠体内的药代动力学研究
阳长明 ,侯世祥 ,孙毅毅 ,李超英
(华西医科大学药学院 ,四川 成都　 610041)
摘　要: 目的　研究保心微丸中肉桂酸在大鼠体内的药代动力学。 方法　采用高效液相色谱法测定肉桂酸血药浓
度 ,色谱柱: Hyper sil ODS C18 , 150 mm× 4. 6 mm, 5μm,柱温 30℃。流动相:甲醇 -1%醋酸 ( 45∶ 55):流速: 0. 5 mL /
min;检测波长 273 nm;进样量 10μL。 结果与结论:建立了用高效液相色谱法测定肉桂酸血药浓度的方法 ,肉桂酸
的峰面积 ( Y )与浓度 (X )之间的回归方程为 Y= 4 973. 534 8+ 42 867. 966 78X ,相关系数 r= 0. 999 8。肉桂酸在血
浆中的回收率为 97. 5% , R SD为 1. 33%。检测限为 0. 15 ng ,大鼠血浆中最低检测浓度为 75 ng /mL。肉桂酸口服
吸收在大鼠体内的药时过程为线性动力学过程 ,符合一级吸收一级消除的开放式室模型 , t1 /2 (K a )为 7. 12 min, tmax
为 53. 29 min, Cmax为 0. 20μg /m L, t1/2 (Ke )为 340. 74 min。该药代动力学参数可能是保心微丸中肉桂酸及有关成分
等多种成分在大鼠体内的综合体现。
关键词: 保心微丸 ;肉桂酸 ;药代动力学 ;高效液相色谱法
中图分类号: R285. 61　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 07 0616 03
Pharmacokinetics of cinnamic acid of BAOXIN PILL in rat
Y ANG Chang-ming , HOU Shi-xiang , SUN Yi-yi, L I Chao-ying
　　 ( Schoo l of Pha rmacy , West China Univ er sity o f Medical Sciences, Chengdu Sichuan 610041, China)
Abstract: Object　 To study the pha rmacokinetics of cinnamic acid in BAOX IN PILL* in ra t. Methods
Plasma concentration of cinnamic acid was determined by HPLC under the following condi tions: co lumn:
Hypersil O DS C18 ( 150 mm× 4. 6 mm, 5μm) ; column temperature 30℃ ; mobile phase methano l-1%
acetic acid ( 45∶ 55) ; f low rate 0. 5 mL /min; detection w aveleng th 273 nm; aliquot injected 10μL. Results
A method fo r the determination of plasma cinnamic acid concentra tion by HPLC was established. Reg res-
sion equa tion o f cinnamic acid peak area ( Y ) and plasma concentration ( X ) was found to be: Y =
4 973. 534 8+ 42 867. 96 678 X ; cor relation facto r r= 0. 999 8; ra te of cinnamic acid recovery f rom plasma
= 97. 50% and RSD= 1. 33% ; detection limit= 0. 15 ng; minimal dectable concentra tion in ra t plasma= 75
ng /mL. Absorption pat tern o f cinnamic acid af ter ig does show ed linearity, co rresponding to a fi rst order
abso rption and elimination of open chamber model. The t1 /2 (K a )= 7. 12 min; tmax= 53. 29 min, Cmax= 0. 20
μg /mL, and t 1 /2 (Ke )= 340. 74 min. Conclusion　 The pharmacokinetic parameters obtained in this study
may be at t ributed to the combined action of cinnamic acid and other constituents in the compound prepara-
tion of BAOXIN PILL.
Key words: BAOXIN PILL ( hea rt pro tecting pill ) ; cinnamic acid; pha rmacoknetics; HPLC
*
BAOXIN PILL ( heart protecting pil l) is a compound TCM drug dosage fo rm containing musk, cin-
namon, storax and dried to ad venom for the treatment o f co rona ry heart diseases and angina pectoris.
　　保心微丸由麝香、苏合香脂、肉桂、蟾酥等组成 ,
用于治疗冠心病、心绞痛。 研究表明 ,肉桂有抑制血
小板聚集和抗血液凝固作用 ,并能增强冠脉流量 ,扩
张血管、脑血管和外周血管 [1 ]。苏合香脂具有明显抗
血小板聚集作用 [2 ]。肉桂酸是肉桂和苏合香脂的有
效成分 [3, 4] ,体内外实验表明 ,肉桂酸都能明显对抗
由 ADP和胶原诱导的血小板聚集 [1, 2 ]。抗血小板聚
集有利于减轻心绞痛发作 ,因此 ,保心微丸在治疗冠
心病、心绞痛方面的效果与其成分肉桂酸抗血小板
聚集作用有关。 本文建立了用高效液相色谱法测定
保心微丸中肉桂酸的血药浓度的方法 ,并对其在大
鼠体内的药代动力学进行了研究。
1　仪器与实验材料
保心微丸 ,自制 ;肉桂酸 ,中国药品生物制品检
·616· 中草药　 Ch inese Tradi tional and Herbal Drugs　 2001年第 32卷第 7期
收稿日期: 2000-02-07基金项目:国家自然科学基金资助课题 ,批准号 39870918作者简介:阳长明 ,湖南益阳人 ,讲师 ,博士。 主要从事中药新药开发与新型给药系统的研究。
定所 ;超纯水 ;其它化学试剂均为分析纯。
DLC-20高效液相色谱仪 , DVW-10 Variable
Waveleng th UV-Vis Detecto r, D-Sta r Inst ru-
ments; TGL-16G离心机 ,上海安亭科学仪器厂 ;
YKH-Ⅱ型液体快速混合器 ,江西医疗器械厂。
Wista r大鼠 ,体重 ( 220± 10) g ,由华西医科大
学实验动物中心提供。
2　方法与结果
2. 1　给药方法及样品的采集: 实验前经适应性喂
养 ,禁食 12 h后给药 ,全程不禁饮水。将保心微丸配
成混悬液 , Wista r大鼠随机分组 ,使每个时间点均
有 3只动物。 po 112. 5 mg /kg (相当于给予肉桂酸
约 0. 33 mg /kg ) ,给药后于不同的时间点股动脉取
血 ,肝素抗凝 ,分离血浆 ,血浆于 - 20℃ 冰箱保存。
2. 2　 HPLC测定方法的建立
2. 2. 1　色谱条件:色谱柱: Hypersil ODS C18 , 150
mm× 4. 6 mm, 5μm,柱温 30℃。流动相: 甲醇 -1%
醋酸 ( 45∶ 55) ;流速: 0. 5 mL /min;检测波长 273
nm;进样量 1μL。
2. 2. 2　色谱行为:空白血浆及含定量肉桂酸的血浆
样品色谱图 ,如图 1所示。肉桂酸 tR= 21 min,无杂
质干扰 ,表明方法的特异性强 ,检测限为 0. 15 ng,
大鼠血浆中最低检测浓度为 75 ng /m L。
2. 2. 3　线性关系:取空白血浆 0. 5 m L,加入 100μL
图 1　 HPLC图谱
0. 075, 0. 15, 0. 75, 1. 5, 7. 5, 15, 30μg /mL肉桂酸
甲醇溶液 ,旋涡混合 ,用甲醇提取 ( 1 mL× 2) ,旋涡
混合 2 min,离心 ( 5 000 r /min) 5 min,合并甲醇提
取液 ,于氮气流下减压吹干 ,残留物用 100μL甲醇
溶解 ,旋涡混合 2 min,离心 ,取上清液 10μL进样 ,
测定肉桂酸的峰面积 ( Y ) ,并计算 Y对肉桂酸浓度
( X )之间的回归方程 , 得 Y = 4 973. 534 8+
42 867. 966 78 X ,相关系数 r= 0. 999 8,说明线性
关系良好。
2. 2. 4　空白血浆回收率:取空白血浆 0. 5 mL,分别
加入 30, 7. 5, 1. 5μg /mL肉桂酸甲醇液 100μL,按
血浆样品处理法处理并测定 ,用标准曲线计算肉桂
酸浓度 ,求得回收率为 97. 50% (n= 5) , RSD为
1. 33% (n= 5)。
2. 2. 5　加样回收率: 取 po保心微丸后已知含量的
大鼠血浆 0. 5 mL,分别加入 30, 7. 5, 1. 5μg /mL肉
桂酸甲醇液 100μL,按血浆样品处理法处理并测
定 ,用标准曲线计算肉桂酸浓度 ,求得回收率为
100. 67% (n= 5) , RSD为 5. 17% (n= 5)。
2. 2. 6　精密度: 日内精密度 , 30, 7. 5, 1. 5μg /mL
肉桂酸 RSD (% ,n= 5)分别为 1. 08, 2. 26, 0. 75,表
明方法的日内精密度高。日间精密度 3种浓度 RSD
(% , n= 5)分别为 1. 96, 2. 72, 0. 23,表明方法的日
间精密度也高。
2. 2. 7　样品处理:取血浆 0. 5 m L,用甲醇提取 ( 1
mL× 2) ,旋涡混合 2 min,离心 ( 5 000 r /min ) 5
min,合并甲醇提取液 ,于氮气流下减压吹干 ,残留物
用 100μL甲醇溶解 ,旋涡混合 5 min,离心 ,即得。
2. 3　测定与结果:按上述样品处理方法处理样品 ,
取上清液 10μL进样测定。 血药浓度以均值表示 ,
用“实用药代动力学计算程序 ( 3P87)”拟合 ,得大鼠
po给药的药代动力学参数见表 1,统计矩结果见表
2。结果表明 ,肉桂酸 po吸收在大鼠体内的药时过程
为线性动力学过程 ,符合一级吸收一级消除的开放
式室模型 , R2值为 0. 992 9,说明拟合度较好。 t1 /2
( K a )为 7. 12 min, tmax为 53. 29 min, Cmax为 0. 20
μg /mL, t1 /2 (K a )为 340. 74 min,说明肉桂酸在大鼠
体内口服吸收快 ,消除较慢。
·617·中草药　 Ch inese Tradi tional and Herbal Drugs　 2001年第 32卷第 7期
表 5　大鼠口服保心微丸后血浆中肉桂酸的药代动力学参数
参数 单位 数值 参数 单位 数值
A μg /m L 　　　 0. 227 8 T ( peak ) min 　　　 53. 292 1
K e 1 /min 0. 002 5 C ( max ) μg /mL 0. 202 1
K a 1 /min 0. 101 0 AUC (μg /m L)× min 98. 627 9
Lag t min 12. 967 8 CL /F( S) m L /min 0. 771 9
t 1/2( K a ) min 7. 121 1 V /F( c) (μg ) / (μg /mL) 346. 490 3
t 1/2 (K e ) min 340. 738 4
表 6　统计矩结果
AU C( SO) (μg /mL)× min AUM C( S1) S2 M RT( min) V RT( min× min)
Area ( 0-inf ini te) 89. 085 5 31 336. 298 8 0. 159 1E+ 08 349. 622 4 52 717. 988 0
Area ( 0-T〔n〕 ) 86. 807 0 29 014. 732 4 0. 134 7E+ 08 332. 753 1 42 397. 910 0
3　讨论
3. 1　有关肉桂酸的含量测定方法 ,已见报道的有紫
外分光光度法 [5 ]、薄层扫描测定法 [6, 7 ]、高效液相色
谱法 [4, 8 ]及极谱法 [9 ]等。 Yuan J H等 [1 0]建立了高效
液相色谱法测定血浆中肉桂酸。 但对复方中肉桂酸
在血浆中的测定及其药代动力学研究尚未见报道。
本文所建立的血浆中肉桂酸的高效液相色谱测定法
具有用血量少、灵敏度高、重现性好以及回收率高等
优点 ,因此适用于肉桂酸的药代动力学研究。
3. 2　选择甲醇作为血浆样品的提取溶剂 ,曾与乙酸
乙酯、乙醚等溶剂作比较 ,发现甲醇提取方法最好 ,
对肉桂酸有较高的回收率 ,且提取物中也无杂质干
扰肉桂酸峰。 对提取次数考察表明 ,用甲醇提取两
次 ,提取比较完全。
3. 3　所得血药浓度 -时间曲线图上出现两个血药浓
度峰 ,可能存在肠肝循环 ,也可能是因为保心微丸中
成分复杂 ,其中肉桂、苏合香中除含有肉桂酸外 ,尚含
有肉桂醛等成分 ,其中肉桂醛在体内可氧化成肉桂
酸 [ 11] ,因此血浆中所测得的肉桂酸 ,一部分是由处方
中所含有的肉桂酸以原型吸收而来 ,另一部分可能是
由于处方中所含有的肉桂醛在体内氧化所得。 因此 ,
对于中药复方中有关化学成分的药代动力学研究 ,应
考虑复方中所含有的其它成分在体内的转化 ,所得药
代动力学参数可能是复方保心微丸中肉桂酸及有关
成分等多种成分在大鼠体内的综合体现。
参考文献:
[1 ]　陈　一 ,钟正贤 ,黄凤娇 . 中药肉桂的药理研究 -对血液和心血
管系统的影响 [ J] .中药通报 , 1981, ( 5): 32-34.
[2 ]　张文惠 ,张林根 . 苏合香抗血小板聚集活性成分的研究 [ J ].
中草药 , 1985, 16( 3): 16-18.
[3 ]　王本祥 .现代中药药理学 [M ]. 天津:天津科技出版社 , 1997.
[4 ]　陈发奎 . 常用中草药有效成分含量测定 [M ]. 北京:人民卫生
出版社 , 1997.
[5 ]　杨庆隆 ,朱　力 ,尤　肪 ,等 .柱分配层析 -紫外分光光度法测
定苏合香油中桂皮酸的含量 [ J ]. 中成药研究 , 1988, ( 6): 13.
[6 ]　罗光明 ,杨武亮 ,赖学文 ,等 . 苏合香质量控制方法的比较研究
[ J ]. 药物分析杂志 , 1996, 16( 5): 338-340.
[7 ]　张　玲 . 双波长薄层扫描测定肉桂中肉桂酸的含量 [ J ]. 药物
分析杂志 , 1997, 17( 6): 408-410.
[8 ]　罗光明 ,杨蓉修 ,赖学文 ,等 . 高效液相色谱法测定苏合香及原
植物中桂皮酸的含量 [ J ] .中国中药杂志 , 1996, 21( 12): 744-
745.
[ 9]　过　玮 ,宋俊峰 ,李焕妮 .肉桂中肉桂酸的单扫描示波极谱法
测定 [ J ]. 药物分析杂志 , 1995, 15( 4): 3-5.
[10 ]　 Yuan J H, Buch er J R, Goehl T J, et al . Qun ti tation of cin-
namaldeh yde and cin namic acid in blood by HPLC [ J ]. J Ana-
ly tical Toxicology, 1992, 16( 9 /12): 359-362.
[11 ]　 Yuan J H, Dieter M P, Bucher J R, et al . Toxicokinetics of
cinnamaldeh yd e in F344 Rats [ J] . Fd Ch em Toxic, 1992, 30
( 12): 997-1004.
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