全 文 ：·药剂与工艺·
育英颗粒剂的质量标准研究
陈玉祥
(中南大学湘雅医学院 制剂实验室 ,湖南 长沙　 410078)
摘　要: 目的　为了控制育英颗粒剂的质量。 方法　采用薄层色谱法对其中的白芍、甘草和枳壳进行了鉴别 ,并建
立薄层扫描法对其中主药黄芪中的黄芪甲苷进行定量。结果　显示鉴别项下的阴性对照品无干扰 ,专属性强 ,含量
测定黄芪甲苷在 1～ 6μg间有良好的线性关系 ( r= 0. 999 7) ,回收率 98. 32% , RSD为 1. 38%。 结论　本质量标准
可有效地控制育英颗粒剂的质量。
关键词: 育英颗粒 ;黄芪甲苷 ;白芍 ;甘草 ;枳壳 ;薄层层析 ;薄层扫描法
中图分类号: R927. 11　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 03 0208 03
Studies on quality standard of YUYING GRANULE
CHEN Yu-x iang
　　 ( Depa rtment o f Pharmaceutics, Xiangya Medical Colleg e, Cent ral South Univ ersity , Changsha Hunan 410078, China )
Abstract: Object　 To formula te a standard fo r the quali ty cont rol o f the ready-made Chinese herbal
preparation YUYIN G GRANU LE. Methods　 The presence of Radix Paeoniae Alba, Radix Glycyrrhizae
and Fructus Auranti i was veri fied by TLC and the content of ast rag aloside A, the activ e principle o f the
main component of Astragalus membranaceus ( Fisch. ) Bge. in the prepa ra tion w as determined quantita-
tiv ely by TLCS. Results　 The TLC spots w ere highly specific, clear and concentrated, without interfer-
ence by the presence o f negativ e contro ls. Concentration curv e o f ast rag aloside A show ed lineari ty over the
range of 1～ 6μg, co rela tion coef ficient r= 0. 999 7, av erage recovery rate= 98. 32% and RSD= 1. 38% .
Conclusion　 This standard can be used effectiv ely fo r the quali ty control of YUYIN G GRANU LE.
Key words: YUYIN G GRANU LE; ast ragaloside A; Radix Paeoniae Alba; Radix Glycy rrhizae;
Fructus Aurantii ; T LC; T LCS
　　世界卫生组织提倡母乳喂养婴儿 ,据文献统计 ,
我国每年约有 2 000万孕妇生产 ,其中 75%以上的
产妇缺乳或少乳。 研制一种高效、无毒副作用、口感
好、易携带、方便贮存的催乳中成药具有较大的意
义。目前国内此类药从数量上来看不多 ,质量上也有
待提高。育英颗粒剂原方源于《古今中医效验秘方宝
典》之“玉露饮”方 ,后经李卫民妇产科副主任医师多
年的临床观察 ,加减研制而成。该药主治缺乳病气血
亏虚证 ,临床疗效显著 [1 ]。 该方由黄芪、白芍、甘草、
枳壳等 13味纯中药组成。为了控制其质量 ,我们采
用薄层色谱法对其中的白芍、甘草、枳壳进行了鉴
别 ,并建立了薄层色谱法对其中的主药黄芪中的黄
芪甲苷进行定量。
1　仪器材料
1. 1　仪器: CS-930双波长薄层扫描仪 (日本岛津 ) ,
薄层器 CAMAG,定量毛细管 (美国 Drummand公
司 )。薄层层析用硅胶 G(青岛海洋化工厂 ) ;芍药苷、
橙皮苷及黄芪甲苷对照品 (中国药品生物制品检定
所提供 )。 正丁醇、甲醇、氯仿、氨水等均为 AR级试
剂。 育英颗粒剂 (长沙育英科技实业公司提供 )。 黄
芪、白芍、甘草、枳壳等药材均为市售 ,经湖南省药检
所鉴定符合 1995年版中国药典规定。
2　薄层鉴别
2. 1　白芍: 取含量测定项下的溶液 ,作为供试品溶
液。 制备缺白芍样品液 ,作为阴性对照液 ;另取芍药
苷对照品 ,加甲醇制成每 1 mL中含 2 mg的溶液 ,
作为对照品溶液。 吸取上述 3种溶液各 5μL,分别
点于同一硅胶 G薄层板上 ,以氯仿 -醋酸乙酯-甲醇-
甲酸 ( 40∶ 5∶ 10∶ 0. 2)为展开剂 ,展开 ,取出 ,晾干 ,
喷以 5%香草醛硫酸溶液 ,在 105℃烘约 5 min,供
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收稿日期: 2000-07-25基金项目: :湖南省科委重点项目 (编号: 02-961-01)作者简介:陈玉祥 ,男 ,博士 ,教授 ,国家教育部派出赴丹麦留学 (1998-1999)回国 ,主要从事新药及基因工程药物研究 ,近几年在国内外杂志发表论文 20余篇。
试品色谱中 ,在与对照品色谱相应的位置上 ,显相同
的蓝紫色斑点 ,而阴性样品中无此斑点。薄层色谱图
见图 1-1。
2. 2　甘草:取本品 5 g ,加乙醚 40 mL,置水浴上加
热回流 30min,滤过 ,弃去滤液 ,残渣加甲醇 50 mL,
置水浴上加热回流 30 min,滤过 ,滤液置水浴上蒸
干 ,残渣加水 40 mL使溶解 ,加水饱和的正丁醇提
取 2次 ,每次 20 mL,合并正丁醇液 ,置水浴上蒸干 ,
残渣加甲醇 5 mL使溶解 ,作为供试品溶液 ;取甘草
对照药材 0. 5 g与缺甘草样品 5 g ,同法制成对照药
材溶液与阴性对照液。吸取上述 3种溶液各 5μL,
分别点入同一硅胶 G薄层板上 ,以醋酸乙酯 -甲酸 -
冰醋酸 -水 ( 30∶ 2∶ 2∶ 4)为展开剂 ,展开 ,取出晾
干 ,喷以 10%硫酸乙醇溶液 ,在 105℃烘约 5 min。
供试品色谱中 ,在与对照药材色谱相应的位置上 ,显
相同颜色的斑点 ,而阴性样品中 ,无此斑点。 薄层色
谱图见图 1-2。
2. 3　枳壳: 取含量测定项下的溶液 ,作为供试品溶
液。另取橙皮苷对照品加甲醇制成饱和溶液 ,作为对
照品溶液。吸取供试品溶液 5μL、对照品溶液 2μL,
分别点于用 0. 5%氢氧化钠制备的硅胶 G薄层板
上 ,以醋酸乙酯-甲醇 -水 ( 100∶ 17∶ 13)为展开剂 ,
展开约 3 cm ,取出晾干 ,再以甲苯 -醋酸乙酯 -甲酸-
水 ( 20∶ 10∶ 1∶ 1)的上层溶液为展开剂 ,展开约 8
cm ,取出晾干 ,喷以三氯化铝试液 ,置紫外光灯 ( 365
nm)下检视。供试品色谱中 ,在与对照品相应的位置
上 ,显相同颜色的荧光斑点。 薄层色谱图见图 1-4。
3　黄芪甲苷的含量测定
芍药　 1, 2-样品
3-芍药苷　 4-阴
性对照
甘草 (日光检测 )
1-样品　 2-对照
药材　 3-甘草酸
氨　 4-阴性对照
甘草 (365 nm)
1-样品　 2-对照
药材　 3-甘草酸
氨　 4-阴性对照
枳壳　 1, 2-样品
3-橙皮苷　 4-阴
性对照
黄芪　 1-样品 ( 5
μL)　 2-样品 ( 2
μL)　 3-黄芪甲
苷　 4-阴性对照
黄芪甲苷含量测
定　 1, 2, 7, 8-黄
芪甲苷　 3, 4, 5,
6, 9, 10-样品　
11-阴性对照
图 1　样品 TLC图
3. 1　供试品及对照品溶液的制备:取本品约 4 g,精
密称定 ,置索氏提取器中 ,加甲醇 40 mL浸渍过夜 ,
再加甲醇适量 ,加热回流 4 h,提取液置水浴上蒸
干 ,残渣加水约 10 mL微热使溶解 ,加水饱和的正
丁醇振摇提取 4次 ( 20 m L× 4) ,合并正丁醇提取
液 ,加氨试液提取 2次 ( 20, 20 mL) ,弃去氨液 ,正丁
醇液再用正丁醇饱和的水洗涤 2次 ( 20, 20 mL) ,弃
去水层 ,正丁醇液置水浴上蒸干 ,残渣加甲醇 3～ 6
m L使溶解 ,置已处理好的氧化铝柱 (内径约 1. 5
cm,中性氧化铝 10 g ,湿法装柱 ,用 40%甲醇 40 mL
洗脱 )上 ,用 40%甲醇 100 mL洗脱 ,收集洗脱液 ,置
水浴上蒸干 ,残渣用甲醇溶解并转移至 2 mL量瓶
中 ,并加甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,作为供试品溶液。另
取黄芪甲苷对照品约 10. 78 mg ,精密称定 ,置 10
m L容量瓶中 ,加甲醇制成每 1 mL含 1 mg的溶液
作为对照品溶液。
3. 2　展开条件: 展开剂为氯仿 -甲醇 -水 ( 65∶ 32∶
10, 10℃以下放置过夜 )的下层溶液为展开剂 ,展距
15 cm。显色剂为 10%硫酸乙醇溶液 ,薄层板经浸板
法处理后 100℃加热 5～ 7 min至斑点显色清晰 ,覆
盖玻板 ,胶带固定。 见图 1-5。
3. 3　扫描参数:采用双波长反射锯齿形扫描法 ,测
定波长 λS= 530 nm ,参比波比 λR= 700 nm ,线性参
数 SX= 3,狭缝为 1. 25 mm× 1. 25 mm,灵敏度中。
3. 4　线性关系考察: 精密吸取浓度为每 1 m L含
1. 078 mg的黄芪甲苷对照品溶液 1, 2, 3, 4, 5, 6μL,
分别点于同一薄层板上 ,展开 ,显色 ,按上述色谱条
件测定 ,以浓度为横坐标 ,峰面积积分值为纵坐标 ,
得回归方程 A= 5 420. 76C+ 106. 29, r= 0. 999 7(n
= 6) ,表明黄芪甲苷在 1～ 6μg浓度范围内具有良
好的线性关系。
3. 5　精密度试验: 取同一浓度的供试品溶液 6份各
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5μL,分别点在同一块薄层板上 ,展开 ,取出 ,晾干 ,
显色后依法操作 ,薄层扫描测定吸光度峰面积积分
值 , RSD为 2. 26% 。
3. 6　稳定性试验: 取供试品溶液 ,点样 ,依法操作 ,
对同一斑点每隔 30 min扫描 1次 ,记录峰面积积分
值 ,结果表明在 2 h内基本稳定 , RSD为 1. 03% 。
3. 7　重现性试验:取同一批号的样品 6份 ,按上述
测定条件重复测定 6次 , RSD为 2. 26%。
3. 8　回收率试验: 采用加样回收法 ,精密称取已知
含量的育英颗粒样品 6份 ,分别精密添加一定量的
黄芪甲苷对照品 ,按 3. 1项制备样品溶液。 吸取 5
μL点样 ,按上述色谱条件测定黄芪甲苷含量 ,结果
表明 ,回收率为 98. 32% , RSD= 1. 37% 。
3. 9　样品测定:精密吸取供试品溶液 5μL,对照品
溶液 2μL与 4μL分别交叉点于同一硅胶 G薄层板
上 ,依法展开和测定 ,薄层色谱图见图 1-6。 共测定
样品 5批 ,结果见表 1。
4　讨论
测定制剂中黄芪甲苷含量的薄层扫描法有报
道 [2～ 5 ] ,本文对古典方“玉露饮”的改进方中主药黄
芪所含黄芪甲苷建立薄层扫描定量方法 ,该方法简
便、准确、重现性好、稳定性强。
表 1　样品测定结果
批　号 含量 (% ) (n= 3) R SD%
970801 0. 026 1. 7
970802 0. 027 2. 1
980101 0. 029 2. 3
980102 0. 031 2. 5
980103 0. 031 2. 1
　　本实验在育英颗粒样品溶液的制备中 ,采用了
中性氧化铝处理 ,消除了其它杂质的干扰。在展开剂
的选择中 ,试用 1995年版中国药典第一部黄芪药材
项下黄芪甲苷含量测定的展开剂 [ 6] ,在此基础上选
用氯仿 -甲醇 -水 ( 65∶ 32∶ 10, 10℃以下放置过夜 )
的下层溶液 ,经过 TCL比较 ,后者比前者好。
参考文献:
[1 ]　李卫民 ,陈玉祥 . 补血生乳颗粒剂治疗缺乳病临床疗效观察
[ J] .中国现代医学杂志 , 1998, 8( 4): 73-74.
[2 ]　王兰霞 ,张伯崇 ,高建帮 ,等 . 贞芪扶正冲剂中黄芪甲苷的薄层
扫描测定 [ J] .中成药 , 1992; 14( 11): 16-17.
[ 3]　李　玲 ,苏　健 ,王宝琴 .黄芪及其复方制剂中黄芪甲苷的薄
层扫描法测定 [ J ]. 中成药 , 1993, 15( 6): 10-11.
[4 ]　崔东滨 ,徐雅娟 ,黄恩喜 ,等 . 荨麻安冲剂中黄芪甲苷的薄层扫
描测定 [ J] .中成药 , 1994, 16( 8): 41-42.
[5 ]　常增荣 ,张小茜 ,周富荣 ,等 . 薄层扫描法测定黄芪及制剂中黄
芪甲苷的含量 [ J] .中国中药杂志 , 1995, 20( 8): 482-483.
[6 ]　中国药典 1995年版 [S ] .一部 .
甘草提取工艺的初步研究
吴伟康 ,奉建芳 ,黄小蕊* ,吴子杰
(中山医科大学 中西医结合研究所 ,广东 广州 , 510089)
摘　要: 目的　研究甘草酸粗品的提取工艺。 方法　采用正交试验法 ,以甘草酸粗品收率及 251 nm处紫外吸光度
值为指标 ,考察加水量 ( A )、煎煮时间 ( B)和酸沉 p H值 ( C) 3个因素 ,并采用单因素试验考察加水量及药材粉碎度
对甘草酸粗品收率的影响。结果　优化的甘草提取工艺条件为 A1 B2C1。加水量≥ 24倍甘草能得到较完全提取。不
同粉碎度提取所得的甘草酸粗品收率依次为: 最粗粉≌粗粉> 细粉> 饮片。结论　加水回流 2次 ( 15倍 , 1. 25 h, 12
倍 , 1 h) ,酸沉为 p H 1。 加水量≥ 24倍基本能提取完全。 提取时以最粗粉或粗粉作为原料 ,较饮片及细粉好。
关键词: 甘草 ;提取工艺 ;正交试验 ;单因素试验
中图分类号: TQ461　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 03 0210 03
Preliminary study on extraction process of Glycyrrhiza uralens is
W U Wei-kang , FENG Jian-fang , HU ANG Xiao-rui, WU Zi-jie
　　 ( Institute o f Integ ra ted Traditiona l Chinese and Weste rn Medicine , Sun Ya t-sen Univ ersity of Medical Sciences,
Guang zhou Guangdong 510089, China )
·210· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 3期
收稿日期: 2000-07-18基金项目: “ 211工程”重点建设项目课题 ,项目号: 98176,广东省高教厅资助作者简介:吴伟康 ( 1947-) ,男 ,浙江省宁波市人 ,教授 ,医学硕士。 1983-1985年中山医科大学病理生理学教研室助教 , 1985-1991年任讲师 , 1991年 9月晋升为副教授 , 1994年 12月破格晋升教授。 1992年开始担任硕士研究生导师 , 1996年 2月起担任博士研究生导师。 1997年 7月～ 1999年 2月赴美国 UCLA、 Univ ersi ty of M ichigan进修 ,现任中山医科大学中西医结合研究所所长、病理生理学教研室主任。 主要从事心血管病中西医结合防治研究 ,与指导的学生 (博士后、博士生、硕士生 )多角度、多层次地对中医经典古方四逆汤进行了深入、系统的研究。电话: ( 020) 8733-1624　传真: ( 020) 8733-1779　 E-mail: pwlatet@ g zsums.
edu. cn
* 广东药学院 2000届毕业生