全 文 ：中草药 C h in e s e T r a d i t io n a l a n d H e r b a l D r u g s 2 0 0 0 年第 3 x 卷第 2 2 期 9 1 1
痛经一贴灵散中九龙藤的薄层色谱鉴别
广西药品检验所 (南宁 5 3。。 21) 桑 形
九龙藤为云实科 (或豆科 )植物龙须藤 B a u hi ?ln a
c h a n功 i o n i i ( B e n t h · ) B e n t h · 的干燥藤茎 。 功能祛风
除湿 , 活血止痛 , 健脾理气 , 用 于风湿关节炎 、 腰 腿
痛 、 跌打损伤 、 胃痛 、 痢疾 、 月经不调 、 胃及十二指肠
溃疡 、 老人病后虚弱和小儿疮积等 (广西中药材标准
. 第二册 ) ,是痛经一贴灵散的主要成分之一 。 为 了
对痛经一贴灵散进行有效的质量监控 , 我们在工作
中经过反复试验 ,建立 了薄层色谱法 , 能有效地检出
痛经一贴灵散 中的九龙藤 , 取得了的满意的效果 。
1 仪器与试药
1
.
1 三用紫外线分析仪 , 9 39 型薄层制板器 , 定量
毛细管 ,硅胶 G (青岛海洋化工厂 ) ,其他试剂为分析
纯 ;痛经一贴灵散由广西源安堂制药厂提供 ,九龙藤
对照药材 : 由广西药品检验所提供 。
2 实验方法与结果
2
.
1 九龙藤对照药材溶液的制备 : 取九龙藤对照药
材 1 9 , 加乙醚 1 5 一 m L ,冷浸 3 0 m i n , 时时振摇 , 弃去
乙 醚 , 残渣挥干乙醚 。 加 乙醇 25 m L , 浸泡过夜 , 滤
过 , 滤液蒸干 ,残渣加醋酸乙醋 Z m L 使溶解 , 作为
对照药材溶液 。
2
.
2 阴性对照溶液的制备 : 按处方量 ,取去除九龙
藤 的其余药材 , 照痛经一贴灵散制备缺九龙藤 的阴
性对照液 。
2
.
3 供试品溶液的制备 :取痛经一贴灵散 4 9 ,照对
照药材制法 同法制得供试溶液 。
0八甘0
0心
.....:`O
2
.
4 薄层 色谱条件 及结 果 : 按
《 中华人 民共 和国药典 》 1 9 9 5 年
版一部附录 V I B 试验 。 吸取对照
药材溶液 5 拼L 及供试品溶液 10
拌L , 分别点于 同一 以梭甲基纤维
素钠为粘合剂 的硅胶 G 薄层 板
上 , 以石 油 醚 ( 60 ℃一 90 ℃ )一氯
仿一醋酸 乙醋 一甲醇 (1 5 , 8 , 3 :
1
.
5) 为 展 开 剂 , 展 开 , 取 出 , 晾
干 , 置 紫 外 光灯 ( 3 6 5 n m ) 下 检
视 。 供试 品色谱中 ,在 与对 照药
材色谱相 应的位 置上 , 显相同颜
色蓝色的荧光斑 点 , 阴性对照溶
液无干扰 (图 1 ) 。
2 3
1一痛经一贴灵散
2一九龙藤对照药材
3一阴性对照
图 l 样品薄层 图
致谢 : 生 药样品 均由本所黄燮才主任技师鉴定 。
( 2 0 0 0
一
0 1
一
3 1 收稿 )
高效液相色谱法测定澄清剂处理黄柏水提液中小璧碱的含量
南京军 区南京总医院 ( 2 1 0 0 0 2)
上海中医药大学
王曙东 宋炳 生
陶建生
中药制剂过程中 ,现多采用乙醇作为澄清剂 , 以
除去醇不溶性成分而达到澄清 目的 , 这样极易造成
有效成分的丢失而影响药物疗 效 , 同时需耗用大量
酒精 。本文以肾舒冲剂 (黄柏为例 ) ,采用水煎液壳聚
糖澄清处理 , H P L C 法测定小璧碱的含量 ,并与水醇
法作 比较 。
1 药品 、 试剂和仪器
中药购 自上海市药材公司 , 小聚碱对照品购于
中国药品生物制品检定所 ,壳 聚糖购于华东理工大
学理学院华凯科技贸易公司 (用 1 %醋酸溶液配成
1 %壳聚糖溶液 ) 。 所用试剂均为 A R 。
色谱仪系 统包 括 U V 2 0 紫外 可变 波 长检 测
器 , P 20 。 高压恒流泵 (大连化物所 ) , G J一 60 5 型高压
六通进样 阀 (进样杯体积 20 拌L ; 。 数据采集及处理
采用 W D L 一 95 色谱工作站 ( 国家色谱 中心 ) , 在 4 86
微机上实现 。 色谱柱 : S p h e r i s o r b C , 。 5拜m 4 · 6 m m 大
2 5 0 m m (大连化物所 ) 。
2 小聚碱的含 t 测定方法
2
.
1 色谱条件 : 流动相为乙睛 一 0 . 04 m ol 八 J H 3 P 0 4
( 4 2
: 5 8 )
,检 测波长 3 4 9 n m , 流速 1 . 0 rn I J / m i n ,柱
·
9 12
· 中草药 C hi ne e sTr adi tio n al an H dr e b al Dr u g s2o ) 0 (年第 1 3卷第 12期
的特点以及实际应用的情况 , 影响澄清效果的相关
因素主要包括 : 壳聚糖加人量 、 药液浓度 、 药液的 p H
值 , 利用 L 。 ( 34 )正交表进行试验 。
因 素 A 壳 聚糖加 入 量 : A , ~ .0 4 m L , A : 一 .0 8
m L
,
A
3
= 1
.
6 m L ;
因素 B 药液浓度 ( g /m l , ) : B l = 2 . 0 , B Z = 1 · o ,
B 3 = 0
.
5 ;
因素 C 药液的 p H 值 : C , 一 4 , C Z = 5 , C 3 = 6 。
4
.
2 结果与分析 : 按 L g ( 3 ` ) 正交设计表所设定的工
艺条件试验 ,结果见表 2 、 表 3 。
表 2 壳聚糖澄清工艺的正 交试验结果
A B C
试验号— 峰面积1 2 3 4 浓度( 拜g /m L )091846J斗ù乃j4。J4J住i八j任八」2 13 l4 25 26 27 38 39 31 1 4 . 0 8
皿 1 1 . 9 2
皿 1 1 . 8 6
1 4 6 9
1 3
.
9 7
班 3 . 9 5
R 0
.
7 4
R j 4 8 0
.
9 9
S J= Ri /3
一
C T 1
.
0 7
l
2
3
1
2
3
l
2
3
1 2 2 0
1 3
。
5 0
1 2 1 6
4
。
0 7
4
.
5 0
4
。
05
0
.
4 5
4 7 8
。
9 6
0
.
3 9
1 2 8 6 0 0
1 3 1 3 0 0
1 0 9 5 0 0
9 0 0 9 0
1 16 4 0 0
1 0 6 0 0 0
1 0 1 2 0 0
1 0 6 4 0 0
1 0 3 40 0
213323…28430895
13儿H..430
峨 .n`乙j,白O1J自,`
038铭31托132车.4.4
0
.
2 0
4 78
.
0 1
0
.
0 8
4 9 7 1 9 R J = 1 2 + 酉 2 + . 2
CT = (艺X ) 2 /n = 159 . 26
表 3 壳聚糖澄清工艺的方差 分析
变异来源
0
.
5 3 5
0
.
1 9 5
0
.
0 4 0
0
.
2 3 5
2
.
2 8
0
.
8 3
0
.
1 7
9é,2勺
口
Oó8
内了0八JOA`.…1几0
温 : 室温 。
2
.
2 标准曲线 : 精密称取 1 05 ℃干燥至恒重的小聚
碱 2 . 4 m g 于 10 m L 容量瓶中 ,加 甲醇溶解至刻度 ,
得 24 0 拌g / m L 对照溶液 。 加 甲醇配成 1 20 拌g /m L 溶
液 ,分别取 0 . 1 , 0 . 2 , 0 . 4 , 0 . 5 , 1 · 6 m L 于 1 0 m L 容
量瓶中 ,加 甲醇至刻度 , 进样量 10 产L 测定 。 以对照
品浓度为横坐标 , 峰面积为纵坐标 , 绘制标准 曲线 ,
回归方程为 : Y = 2 6 3 0 9 . 6 OX 一 3 5 5 . 4 2 , r = 0 . 9 9 9 8 。
小聚 碱在 1 . 2一 19 . 2 产g /m L 范 围内峰 面积与进样
浓度呈线性关系 。
2
.
3 精密度试验 : 精密 吸取小聚碱对照品液 (0 . 36
陀 /m I J ) 0 . 5 m L 于 10 m L 容量瓶 中 , 加醇至刻 度 ,
连 续 进 样 5 次 , 每 次 2 拌L , 得 平 均 峰 面 积值 为
4 8 1 2 2
,
R S D 为 0 . 6 0 % 。
2
.
4 重现性试验 : 平行取处方水煎液 10 m L (相当含
黄柏 2 9 )5 份于三角瓶中 , 水浴挥干 ,依法测定峰面
积 , 得小聚碱面积均值为 4 0 2 3 2 0 ,尺 S D 为 2 . 5 0 % 。
2
.
5 回收率试验 : 精密吸取 已知含量的水煎液 , 精
密 加 人小 聚 碱 对 照 品 , 依法 测 定 , 结 果 回收率为
8 9
.
9 9 %
,
R S D 一 3 . 9% ( n = 4 ) 。
3 不 同澄清剂澄清工艺的比较
3
.
1 不同澄清剂 的澄清工艺 : 取处方水提液 10 m L
(相当含黄柏 2 9 )各 3 份 ,按 下述方法分别处理 。 1
号 : 5。% 乙 醇沉淀 , 滤过 , 滤 液水 浴挥干 ; 2 号 : 40 %
壳聚糖溶液沉淀 , 80 C 水浴加热片刻至澄清 , 滤过 ,
滤液水浴 挥干 ; 3 号 : 未经任何 澄清处理 , 直接水浴
挥干 。
3
.
2 样品处理与测定结果 : 取上述样 品分别加 人
1 0 m L 氯 仿 , 超声提取 10 m in , 过滤 , 挥干氯仿 , 残
渣 甲醇溶解并定容 10 m L 。 取 50 拜L 甲醇混匀 ,注人
液相色谱仪 ,进样量 20 拌L 。 结果见表 1 。
表 1 不 同澄清方法的肾舒冲剂样品的含 t 测定
A
B
C
误差
编号 R S D %
1 峰面积
浓度 (拜/ m L )
2 峰面积
浓度 (户 / m L )
3 峰面积
浓度 (拜 / m L )
4 0 0 0 0 0
1 5
.
2 2
3 9 4 70 0
1 5
.
0 2
4 20 9 0 0
1 6
.
0 1
4 0 9 0 0 0
1 5
。
5 6
3 7 8 1 0 0
14
.
3 8
4 3 3 6 0 0
16
,
4 9
38 3 5 0 0
1 4
。
5 9
38 4 9 0 0
1 4
.
6 4
4 2 0 2 0 0
15
.
9 8
平 均值
3 9 7 50 0
1 5
。
1 2
3 8 5 90 0
1 4
.
6 8
4 2 4 9 0 0 1
.
7 5
1 6
。
1 6
4 正交设计优选 壳聚糖最佳澄清工艺
.4 1 试验因素与因素水平 的确定 : 根据壳聚糖本身
F
o
.
o` ( 2 . 2 ) = 19 . 0
实验结果表明 , 壳聚糖处理的样品含量较醇沉
法略低 , 都低于未处理样品 , 正交试验方差分析表
明 , 壳聚糖加人量 、 药液浓度 、 药液 的 p H , 在所选择
的 3 个水平中对样品含量的影响无显著性差异 。 直
观分析可知因素主次关系为 A 、 B 、 C ,较好的方案为
A
I
B
2
C
I 。
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一
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一
1 0 收稿 )
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