全 文 ：量 ,所 以对丹参培养物应及时测定 。
表 2 长期放 t 对丹参细胞物 中迷迭香
酸和紫草酸 B 含 t 的影响 (n 一 3)
放t 时间
(月 )
迷迭香酸
(%干重)
紫草酸B
(%干重 )
迷迭香酸
损失率(% )
紫草酸B
损失率(% )
5
.
8536二 0
.
72 16 6
.
5449士 0 . 1412
3
,
] 474土 0 . 4 530 5 . 2 153士0 . 7460 4 6. 23 20 . 31
参 考 文 献
张白嘉 , 等 . 中草药 , 1 9 9 6 , 2 7 ( 1 0 ) : 6 5改
刘 平 , 等 . 中国医 药学报 , 19 9 3 , 8( 增 ) : 5
胡之璧 ,等 . 上海 中医 药大学上海 中医 药研究 院学报 ,
19 9 7
,
1 0 ( 2 )一 1 1 ( l ) : 9 4
李 静 , 等 . 药学学报 , 1 9 9 3 , 2 8 ( 7 ) : 5 4 3
( 1 9 9 9
一
0 4
一
0 6 收稿 )
毛 白杨叶中酚普类成分含量测定方法的研究
中国医学科学 院
中国协和医科大学
药物研 究所 (北京 1 0 0 0 5 0) 丁 永胜 . 何丽一
摘 要 采用 高效薄层预制板 , 用二次展 开的方法分离测定 了毛 白杨叶 中的特里杨昔等三种酚昔
类 化合物 。 以二氯 甲烷 一乙 酸乙 酷 一甲醇 一水 (2 , 1 . 5 , 0 . 5 , 0 . 0 5) 为展开剂 , Q 蔡酚一硫酸试液为显色
剂 , 用 C S 一 9 3 0 薄层扫描仪 八 ~ 5 2 0 n m 波长处线性扫描 。 方法简便 、快 速 、 准确 。
关健词 H P T L C 毛 白杨 酚昔类 含量测定
S e P a r a t i o n a n d D e t e r m i n a t i o n o f P h e n o l i e G l y e o s i d e s i n C h i n e s e W h i t e P o P l a r L e a v e s
(尸口p u l u s t o m e n t o s a ) b y H P T L C
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P e k in g U n i o n M
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A b s t r a e t A d
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b l e d e v e l o p m e n t t h in l a y e r e h r o m a t o g r a p h ie m e t h o d w a s e s t a b l is h e d t o s e p a r a t e a n d
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K e y w o r d s
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, r a P id a n d a e e u r a t e
·
P oP
u l u s t o m e n t o s a p h
e n o lie g l y e o s i d e H P T L C
毛 白杨 P oP u l u s t o m e n t o s a C a r r . , 又称
杨构花 , 系杨柳科杨属植物 , 在我国主要分布
于华北等地区 。 《本草纲 目 》中记载 : 毛白杨苦
寒无毒 , 主治扑损痕血 , 有续筋骨 , 止痛止痢
等作用 。 民间用其叶煮水洗 、 敷 ,控制陈 旧性
软组织感染及化脓性骨髓炎疗效较好 。 毛白
杨叶中主要含有酚昔类化学成分 〔`一 3〕 。 为了
充分利用这一丰富的 自然资源 , 我们对植物
中的有效成分进行 了含量测定方法的研究 。
1 仪器与试药
薄层 扫描 仪 岛津 C S 一 93 0 , 定量 毛细 管
( D r u m m o n d S e i
·
C o
·
U S A )
, 高效 硅胶 薄 层
预制板 (烟台化工研究所 ) , 双槽薄层展开槽
( C A M A G 1 2 e m X 5 e m X 1 2 e m )
, 浸板槽
( 自制 1 1 e m X I e m X l l e m ) ,超声波清洗器
(无锡超声 电子设备厂 ) , 离心机 8 0一 1 型 (上
A d d r e s s
:
D i n g Y o n g s h e n g
,
I n s t i t u t e o f M a t e
r
i a M e d i e a
,
C h in e s e A e a d e m y o f M e d i e a l cS ie n e e s a n d P e k in g U n io n
丁永胜 男携蟹伙粼l辈翠斜背蒙古 医学院药学系 , 获学士学位 ; , 9。。 年毕业于 中国医学科学院中国协 和医科大学药物研究所 ,获硕 士学位 ; 1 9 91 一 19 96 年在 内策古 医药 总公司乌海分公司从事药 品质 t 检验及管理工作 , 现为主管药师 ,
具有执业药师资格证书 ;现 主要 从事 中草药中有效 成分分 析和药 品的质 t 控制 与检 验工作 。
.
6 5 6
.
海手术器械厂 ) ,所用试剂均为分析纯 。 3 种
对照 品水杨昔 (sa h ic n , M 一 1 ) , 2 ’ 一苯甲酞水杨
昔 ( t r e u l o id in , M 一 4 ) , 特里杨昔 ( t r e m u l a e i n ,
M
一
5 )
, 由中国 医学科学院药物研究所林茂研
究员提供 ,植物样 品自采 。
2 实验样品的制备
2
.
1 供试 品溶液 : 取毛白杨 的干叶粉末 (4 O
目筛 ) 约 1 0 0 m g ,精密称定 , 置 10 m L 具塞试
管中 , 精密加人 80 % 甲醇水溶液 Z m L , 超声
提取 30 m in , 离心 s m in ,上清液作为供试品
溶液 。
2
.
2 对照品溶液 : 取 3 种酚昔的对照 品 ,加
甲醇溶解 ,制成 l m g /m L 的溶液 , 作为对照
品溶液 。
3 实验条件
3
.
1 薄层分离条件 : 固定相为高效硅胶薄层
预制板 1 0 c m X 10 c m , 以二 氯 甲烷 一乙 酸乙
醋 一甲醇 一水 (2 : 1 . 5 : 0 . 5 : 0 . 0 5) 为展开剂 ,
进行二次 展开 , 每次展开前需饱 和 30 m in ,
展 开 、 取 出 、 吹 干 , 浸 入 a 禁 酚 一硫 酸 试 液
( 1 5% a 蔡 酚 乙 醇 溶 液 21 m L 、 浓 硫 酸 13
m L
、 乙醇 8 1 m L 与水 8 m L 相混合 ) [6〕 , 立即
取出 , 用滤纸吸去过量的试液 , 置 10 ℃烘约
3 ~ s m in 至呈 桃红色斑点 , 取出 , 在薄层板
上筱 盖同样大小 的玻璃板 , 周围用胶带 密封
固定 。 结果见图 1 。
3
.
2 扫描条 件 : 单波长反射法线性扫描 , 光
源 : 钨 灯 , 入s = 5 2 0 n m , S x = 厂一一- - - ,
上 ,点同样量的斑点 7 个 , 依法操作进行扫描测
定 , 3 种被测物质 M 一 1 , M 一 4 , M 一 5 的 R S D 分
别为 1 . 4 2 % , 3 . 3 2% 和 2 . 7 5% 。
4
.
3 线 性关系 : 精密吸取对照品溶液 1 , 2 ,
3
,
4
,
5 拜L , 点于同一块薄层板上 ,依法操作 ,
测定峰面积值 。 以点样量为横坐标 , 峰面积为
纵坐标 , 绘制标准曲线 ,结果 :
M
一
I Y = 1 4 1 0
.
7 + 3 6 6 8
.
4X
r = 0
.
9 9 1 9 ( 0
.
4 0 0~ 4
.
0 0 0 产g )
M
一
4 Y = 6 1 8
.
9+ 1 5 6 7
.
6X
r
= 0
.
9 9 6 6 ( 0
.
6 7 3~ 6
.
7 3 5 产g )
M
一
S Y = 4 8 4
.
3+ 1 0 9 3
.
SX
犷一 0 . 9 9 7 2 ( 0 . 7 1 5一 7 . 1 5 0 产 g )
4
.
4 回 收率实验 : 精密称取样 品粉末 (过 4 0
目筛 ) 10 0 m g 4 份 , 其 中 3 份加人 定量的对
照品溶液 ,按供试品溶液制备项下操作 ,依法
展开 、 显色 、 测定 , 用随行外标法计算 , 结果 回
收率如下 :
M
一
1 9 8
.
6 6%
,
R S D = 1
.
4 0 %
M
一
4 9 8
.
1 1%
,
R S D = 3
.
2 3 %
M
一
5 9 8
.
3 0 %
,
R S D = 2
.
5 7 %
3
。
4 方法考察
4
.
1 稳定性实验 : 精密吸取
对照 品溶 液 点 样 于 薄 层 板
上 , 依 法展 开 , 显 色 , 每 隔一
定时间扫描一次 。 结果表明 ,
显色后 4 h 内峰面积值基本
不 变 , M 一 1 , M 一 4 , M 一 5 的
R S D 分别为 0 . 9 6 % , 1 . 1 6%
和 1 . 2 3% 。
4
.
2 精密度实验 : 取 同一份
样品溶液 , 在 同一块 薄层 板
《中草 药 》 1 9 9 9 年第 3 0 卷第 9 期
弓 ,
O
` ) 心急
仁 ,
` )
` ,
O
口…2 3 4
卜 M 一 l ; 2一 M 一 4 ; 3 -
M
一
5 ; 4
一样 品溶液
圈 1 毛 白杨样
品的薄层
色谱圈
5 样品测定
精 密称取不 同生长时期 的样 品粉末各
1 0 0 m g
, 依法测定 ,结果见表 1 。
结果表 明 , 毛 白杨中主要有效成分特里
杨 昔在植物 中的含 量 比较高 , 并且 在 n 月
时 ,含量达到最高 , 这时采收 , 正值落叶 , 可 以
不损害植物的生长 。
6 结果与讨论
6
.
1 本文建立了毛 白杨叶中有效成分 的含
量测定方法 ,方法简便 、快速 、 准确 。
6
.
2 酚昔类均具有紫外 吸收 , 但 M 一 4 、 M 一 5
的最大吸收为 24 0 n m , 而 M 一 1 则在 2 7 8 n m
处具有最大吸收 ,给测定带来麻烦 ;但显色后
三者均 在 52 0 n m 处有最大 吸收 , 且其灵敏
度与紫外测定基本一致 , 故选用显色后进行
可见光测定 。
6
.
3 精密度的测定以样 品溶液的测定结果
较为可靠 。
6
.
4 展开后的薄层板采用浸板显色的方式 ,
可以得到显色均匀的效果 。 加盖玻璃板可以
使得斑点稳定时间更长 。
.
6 5 7
.
表 l样品含 t测定结果 (% ) (n ~3)
采收期 (月 )成分
5 67 8 91 1 01
M
一
1 0
.
1 05 2 0
.
1 3 0 0 9
.
4 01 6 0
.
2 0 9 9 9
.
45 1 6 0
.
5 15 6 0
.
6 0 0 8
M
一 4一 0 . 0 2 87 0 .3 5 8 90 . 2 05 7 0 . 2 6 4 0 9.3 7 4 90 .7 4 6 9
M
一5 0
.
3 7 7 91
.
17 0 2
.
5 6 4 2
,
2 7 2 2
.
6 9 4 2
.
5 7 6 3
.
3 9 4
6
.
5 展开剂 中的水分对分离具有关键的作
用 , 不加水 时斑点严重拖尾 , 影响分离 , 但水
量过大则展开剂变混浊 。
致谢 : 本 所植化 室林茂研究员提供 对照
品 ,表示 感谢 。
参 考 文 献
1 马天波 , 等 . 中草药 , 1 9 8 7 , 1 8 ( 3 ) : 1 0 5
林 茂 , 等 . 药学学报 , 1 9 9 3 , 2 8 ( 6 ) : 4 3 7
中国医学科学 院药物研究 所编著 . 中草药 现代研究 .
第三卷 . 北京 : 北京医 科大学 中国协和医科大学联 合出
版社 , 1 9 9 7 : 2 2 2
C h e n g G F
, e t a l
.
P h y t o m e d i e in e
, 1 9 94 , l
:
2 0 9
杨东旭 , 等 . 药学学报 , 1 9 9 5 , 3 0 ( 2 ) : 2 5 4
周 同惠 ,等 编著 . 纸色谱和薄 层色谱 . 北 京 : 科学出版
社 , 19 8 9 : 2 9 6
( 1 9 9 8
一
1 2
一
1 4 收稿 )
H P L C 法测定冬虫夏草中腺昔含 l
福建省药 品检验 所 (福州 3 5 0 0 0 1) 吴春敏 ` 叶榕平 ”
摘 要 采用甲醇为溶剂 , 提取冬虫夏草及其虫体 、 子座中的核昔 类成分 , 用 H P L C 法测定腺昔的
含量 ;色谱条件 以 产oB it d a p a k C : 。 ( 4 . 6 m m X 2 5 0 m m , 1 0 拌m )为色谱柱 , o . o l m o l /L 磷酸二氢钠 一磷
酸氢二钠缓 冲液 ( p H 6 . 5 》 甲醇 ( 8 5 : 1 5) 为流动相 ,检测波长 U V 26 o n m , ; = 0 . 9 9 99 ,线性范围 。 . 2
一 l 拌 g , 回收率 1 0 4 . 5% 。
关健词 H P L C 冬虫夏 草 腺昔
D e t e r m i n a t i o n o f A d e n o s i n e i n D o n g e h o n g x i a c h a o ( oC
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s s i n e n s i s ) b y H P L C
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C h u n m in a n d Y e R o n g p in g ( F u j i
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,
F u z h o u 3 5 0 0 0 1 )
A b s t r a e t A m e t h o d h a s b e e n d e v e lo p e d f o r t h e d e t e r m i n a t io n o f a d e n o s in e in oC
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T h e li n e a r r a n g e w a s
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2一 1 . 0 拌 g , r = 0 . 9 9 9 9 . T h e a v e r a g e r e e o v e r y w a , 1 0 4 . 5% .
K e y w o r d s oC
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s s in e n s i s a d e n o s in e
冬 虫 夏 草 co r dy c eP : s i n e n s i s ( B e r k · )
S a c
. 是我国传统名贵 中药材之一 。 近年来 ,
人们对人工发酵虫草菌粉提出了质量评测方
法〔 ,一 3〕 , 而针对 天然虫草 的质量评 价方法却
显得相对匾乏 。 为 了有效地控制天然虫草的
质量 , 我们拟定以其有效成分之一的核昔类
化合 物腺昔 ( a d e n o s i n e ) 为检测指标 [` , 4〕 , 采
用 H P L C 法对 西藏和青海虫 草进行定量分
析 , 为冬虫夏草的质量评定提供了一种快捷 、
有效的检测方法 。
A d d r e s s
:
W u C h u n m in
,
F u ji a n In s t i t u t e fo r D r u g C o n t r o l
,
F u z h o u
, ’ 为福建中医学 院 93 级 实习生
.
6 5 8
.